目的:白細胞介素-5（IL-5）被證實能對抗動脈粥樣硬化（As）發(fā)生發(fā)展,其具體作用機制尚未被完全認識。本研究旨在探討IL-5能否通過JAK2/STAT3途徑上調(diào)THP-1巨噬細胞ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）表達。方法:將THP-1細胞誘導轉(zhuǎn)變成泡沫細胞,經(jīng)不同濃度的IL-5處理相同時間或同一濃度IL-5（0.15 ng/mL）處理不同時間（0,6,12,24,48 h）,用油紅O染色觀察細胞內(nèi)脂滴多少,高效液相色譜法測定細胞內(nèi)膽固醇含量,液體閃爍計數(shù)法檢測細胞內(nèi)膽固醇流出率;Western blot測定細胞內(nèi)ABCA1蛋白含量,實時定量PCR檢測ABCA1 mRNA水平。IL-5或抗IL-5抗體處理細胞24小時,Western blot檢測細胞內(nèi)磷酸化的JAK2、STAT3及總蛋白水平。JAK2和STAT3抑制劑或轉(zhuǎn)染JAK2和STAT3 siRNA對IL-5作用下的細胞處理24小時,檢測細胞內(nèi)ABCA1、JAK2和磷酸化STAT3蛋白水平。結(jié)果:IL-5能夠上調(diào)THP-1巨噬細胞ABCA1蛋白及m RNA表達水平,且呈現(xiàn)出一定時間和劑量依賴性。進一步實驗證實IL-5通過激活... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 緒論
第2章 實驗材料
    2.1 主要試劑與抗體
    2.2 主要儀器與器材
第3章 實驗方法
    3.1 THP-1 細胞培養(yǎng)與處理
    3.2 氧化低密度脂蛋白的制備及鑒定
    3.3 油紅O染色觀察細胞脂滴
    3.4 THP-1 細胞總蛋白提取
    3.5 提取RNA和實時定量PCR
    3.6 蛋白定量及蛋白免疫印跡（Western blot）檢測ABCA1、總的JAK2、STAT3蛋白及磷酸化的JAK2、STAT3蛋白含量
    3.7 JAK2、STAT3小干擾RNA（siRNA）轉(zhuǎn)染THP-1 巨噬細胞
    3.8 高效液相色譜法檢測 THP-1 巨噬細胞膽固醇含量
    3.9 液體閃爍計數(shù)法檢測細胞內(nèi)膽固醇流出
    3.10 統(tǒng)計學分析
第4章 實驗結(jié)果
    4.1 IL-5 促進THP-1 巨噬細胞膽固醇流出，減少細胞內(nèi)膽固醇蓄積
    4.2 I L - 5 上調(diào)T H P - 1 巨噬細胞A B C A 1 蛋白和m R N A表達
    4.3 IL-5 影響JAK2及STAT3的活化
    4.4 STAT3與IL-5 誘導ABCA1表達相關(guān)
    4.5 JAK2/STAT3信號通路參與IL-5 上調(diào)ABCA1表達
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
碩士期間發(fā)表論文
致謝
基金


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3158599