研究背景:急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）是一種常見的心血管事件,由AMI所導(dǎo)致的心肌缺血再灌注損傷（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）性疾病的致殘率和病死率逐年增加。另外,隨著心臟介入治療技術(shù)和外科手術(shù)的不斷創(chuàng)新和普及應(yīng)用,其治療后引起的MIRI也不容忽視。MIRI性疾病已經(jīng)成為臨床工作中的常見病和多發(fā)病,可引起心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變、代謝功能障礙以及細(xì)胞凋亡,影響心肌功能、代謝及心臟電生理,嚴(yán)重可誘發(fā)心梗。因此。預(yù)防和減少M(fèi)IRI對減少死亡率、改善患者預(yù)后有著至關(guān)重要的作用。MIRI的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜,多數(shù)研究表明其機(jī)制可能與氧化應(yīng)激、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、炎癥反應(yīng)、能量代謝障礙以及細(xì)胞凋亡等相關(guān)。微小核糖核酸（microRNA,miRNA,miR）是一段長度為19-25個核苷酸的小非編碼RNA,是多細(xì)胞生物中一類豐富的基因調(diào)控分子,影響許多蛋白編碼基因的表達(dá)。miRNA通過與靶向mRNA特異結(jié)合,抑制靶mRNA翻譯或降解靶mRNA,對靶基因表達(dá)進(jìn)行負(fù)調(diào)控。越來越多的證據(jù)表明miRNA參與調(diào)控許多... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：111 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１．２免疫熒光檢測原代心肌細(xì)胞的純度（２００＞〇?（綠色熒光為特異性標(biāo)記的ａ－ａｃｔｉｎｉｎ，藍(lán)??色熒光為ＤＡＰＩ特異性標(biāo)記的細(xì)胞核）

參???第一部分ｍｉＲ－９３介導(dǎo)Ｎｒｆ２信號通路在ＯＧＤ心肌細(xì)胞中的作用???圖１．５?ＴａｒｇｅｔＳｃａｎ對ｍｉＲ－９３?ＩＥ基因的預(yù)測??ｍｉ?ＤＢ??Ｔｈｅｒｅ?ａｒｅ．?９６３?ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｔａｒｇｅｔｓ?ｆｏｒ?ｎｍｉｕ－ｍｉＲ－９３－５ｐ?ｉｎ?ｍｉＲＤＢ．??｜?ｍｌＲＷＡ?Ｗｉ＞ｍｅ?｜?Ｇｅｎｅ?Ｓｙｍｂｏｌ?Ｇ＾ｎｅ?Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ???石－Ｉ?ｉ?１３０?ｉ?ｎｆｎｕ?ｍ－Ｒ－ｓ＾－＾ｐ?！?：＾ｒ－；?＾ｎａ＊ｆ．．?ｆ＾Ｘｌ－ＶｒＶｅ?ｃｏｎｔｃ?ｉｎｃ?：??Ｃ－＾：ｃ?２?ｉ?：０Ｃ?ｎｒｒｊ－ｎｖｒｔ－９３－Ｓｐ?ｊ?？ｗ?＇ｔｃｒｉｇ＾?ｎ?２５???３?Ｉ?９５?ｉ?ｍｒｙｊ－ｍ？?ｉ２－Ｓｊ＞?ｊ?－Ｑｉ＾．?ｔｆ＇ｊｅｒ?：?＾?５２？???；?４?；?ｍｎｕ?ｒｒ－－Ｒ－?；３－ｒ＆?ｊ?ｉＬｂｕ－ｎｉ：?１２?ＵＫ？???Ｃ＇ｔ－：３＝；?５?４９?ｎｆＴ�。辏颍睿唬耍常�?？ａ?Ｉ?ｄｉ．?ｋ＾Ｃ３Ｚ?３ｒ?！ｊｃｃｔｏ：〇ｔ?ｕｔｐｏ－ｔ?；．ｃ！－？ｆ?＜ａｃ??ｉ?－?ｙ＾ｊ?ｏ?■?ｗ?■＾．ｔｒ＾－ｒｒ?Ｋ－ｙｊ－?￣ｐ?：?ｓｃｋｓｔｒ．ｎ?ｈ；－Ｔ＾ｃｃ？？?ｑ？￣．ａｉ?？■－ｃｃ￣：ａｉｎ＇－－；．?ｆａｎ％?ａ?￣?＾ｉｒ．ｃｅｒ?????７?｝?Ｍ?ｉ?ｍｍｕ－ｒｅ＜Ｒ－９３－￡ｐ?ＳｔｌＵ?ｊｓｎｈａｎｅｇ?ｏｆ?２ｓｓｔｅ?ｌ?『印任８８？＊?２?ｓｕｂｕｏｉｆｃ??Ｓ?ｊ?＇－３?ａｒｒ＾－ｎ：＾．－?＇」‘乂＞—?；．．：．?ｖｊｅ＾－３Ｃｔ�。觯幔簦澹�?ｐｒｃ

?第一部分ｍｉＲ－９３介導(dǎo)Ｎｒｆ２信號通路在ＯＧＤ心肌細(xì)胞中的作用???２．６雙熒光素酶報(bào)告檢測驗(yàn)證靶向關(guān)系??為了驗(yàn)證ｍｉＲ－９３是否能夠靶向調(diào)控Ｎｒｔ２的表達(dá)，根據(jù)結(jié)合位點(diǎn)構(gòu)建??ｐＭＩＲ－ＲＥＰＯＲＴ－Ｎｒｆ２－ＷＴ?及?ｐＭＩＲ－ＲＥＰ０ＲＴ－Ｎｒｆ２－ＭＵＴ?雙熒光素酶報(bào)告重組載??體，并通過共轉(zhuǎn)染進(jìn)行雙熒光素酶報(bào)告基因檢測。以ｍｉＲ－９３－ＮＣ＋ＮｒＱ－ＷＴ載體??為參照，不同轉(zhuǎn)染組中相對熒光素梅的活性如圖１．８所示。轉(zhuǎn)染Ｎｒｆ２－ＭＵＴ載體??后，ｍｉＲ－９３ａｇｏｍｉｒ和ＮＣ－ａｇｏｍｉｒ組中細(xì)胞中焚光素酶活性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，即焚??光素酶活性均未受到抑制。在轉(zhuǎn)染Ｎｒｆ２－ＷＴ載體后，ｍｉＲ－９３ａｇｏｍｉｒ組熒光素酶??的相對活性明顯低于ＮＣ－ａｇｏｍｉｒ組，提示ｍｉＲ－９３能夠結(jié)合到Ｎｒｆ２基因的３＇－ＵＴＲ??區(qū)，抑制熒光素酶的活性。??Ａ?Ｊ＊?ＧＡｉ；ＣＸ；ＡＣＧＬＧＣｌ；ｌ：ｔ；ｉ：ｔＸ；ｉ?ＣＡＡＡＣ?Ｓ＊??ｎｎ?ｉｆ?ｉ?ｍｍ??Ｌ?ＴＨ?５＃?Ｕ?ＣＫ?Ａ?－?？?ＡＡ（?Ａｔａ?ｉｙ??ＭｕＬ?ｎｒｐ?ｙ?ｉ－ＸＵ?５＊?－?Ｃ；?＼?＜?Ａｌ?ｌ；?＼＜?ｃ；ｔ?ｖ．＜．?ｙ??Ｂ??１．５?ｎ??ＤＮＣ－ａｇｏｎｉｒ??＊＊?■?ｎｉＲ－９３?ａｇｏｍｉｒ??＾?ｉ??�。海�?ｎ＿?ｎｉ??Ｎｒｆ２－＼＼Ｔ?Ｎｒｆ２－ＭＵＴ??圖１．８雙熒光素酶報(bào)告基因檢測結(jié)果（Ａ：野生型及突變型Ｎｒｆ２?３＇－ＵＴＲ與ｍｉＲ－９３結(jié)合位??點(diǎn)堿基序列；Ｂ：雙熒光素酶報(bào)告檢測結(jié)果。注：＊＊Ｐ＜０．０１。）??２．７?ｍｉＲ－９３?ａｎｔａｇｏｍｉｒ?qū)Γ希牵模倚募〖?xì)胞Ｎ

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3125519