背景:通過(guò)及時(shí)的再灌注干預(yù)手段治療急性心肌梗死（AMI）很大程度上提高了冠心病患者的生存預(yù)后。但是,僅開(kāi)通心外膜血管,有時(shí)并不能改善病人的真正預(yù)后。因此,該研究將聚焦于心臟的再灌注損傷的機(jī)制研究和藥物干預(yù)手段。微循環(huán)是心臟血供的最末端,是感應(yīng)缺血缺氧最敏感的部分,因此微循環(huán)的內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞是作為該研究的重點(diǎn)。我們前期研究提示細(xì)胞內(nèi)鈣超載和過(guò)量活性氧生成是造成一系列損傷的啟動(dòng)因素。SERCA2a作為最重要的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上鈣回收蛋白被廣泛進(jìn)行研究。前期研究證實(shí)在IR條件下,SERCA2a活性降低,導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)超載損傷。其他研究有提示SERCA2a的轉(zhuǎn)錄后修飾是其活性降低的主要因素。因此我們首先將聚焦于心臟缺血再灌注（IR）條件下SERCA2a的轉(zhuǎn)錄后修飾作用。因此,更深一步研究將聚焦于SERCA2a誘導(dǎo)的細(xì)胞鈣超載,是否與線(xiàn)粒體損傷性分裂,以及線(xiàn)粒體鈣超載導(dǎo)致的線(xiàn)粒體凋亡程序啟動(dòng)有直接相關(guān)性。除此以外,該團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn),褪黑素對(duì)微循環(huán)缺血再灌注損傷有保護(hù)作用,因此針對(duì)線(xiàn)粒體的研究,我們力求完善褪黑素保護(hù)IR損傷后的線(xiàn)粒體結(jié)構(gòu)功能的機(jī)制研究。目的:本研究旨在闡明心肌缺血再灌注介導(dǎo)微循環(huán)損傷的分... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１：于小鼠心臟的ＩＲＩ模型中，觀(guān)察ＳＥＲＣＡ２ａ的表達(dá)和小鼠心功能改變

圖２：?ＳＥＲＣＡ２ａ的恢復(fù)減輕了微循環(huán)ＩＲ損傷和微血管再灌注缺損。Ａ－Ｂ：?ＤＨＥ熒光染色??缺血２小時(shí)再灌注１０小時(shí)，觀(guān)察不同分組熒光的強(qiáng)度；Ｃ－Ｆ：缺血２小時(shí)后再灌注１０小時(shí)，??抽取尾靜脈血，檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)；Ｇ－Ｊ：?ＳＥＲＣＡＣ６７４－Ｓ０３Ｈ特異性抗體被用于免疫組化??染色檢測(cè)其在不同組左心室梗死區(qū)的表達(dá)；ＳＥＲＣＡ２ａ與硝基酪氨酸和ＳＥＲＣＡ２ａ與ＧＳＨ??通過(guò)免疫共沉淀測(cè)定法檢測(cè)共表達(dá)水平；全蛋白質(zhì)印跡分析譜檢測(cè)完整的ＵＯｋＤａ??ＳＥＲＣＡ２ａ蛋白在不同的組中的降解情況。＊ｐ＜０．０５ｖｓ．正常野生小鼠組；＃ｐ＜０．０５ｖｓ．野??生小鼠ＩＲ損傷組。??３．３體內(nèi)過(guò)表達(dá)ＳＥＲＣＡ２ａ，觀(guān)察小鼠微循環(huán)結(jié)構(gòu)和功能完整性的影響??構(gòu)建ＳＥＲＣＡ２ａ病毒轉(zhuǎn)染的過(guò)表達(dá)基因鼠（ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶｍｉｃｅ）完成后，我??們使用缺血２小時(shí)再灌注１０小時(shí)建立體外ＩＲ損傷模型，觀(guān)察微循環(huán)受損情況。??２１??

?解放軍醫(yī)學(xué)院博士論文???野生小鼠ＩＲ組顯示紅細(xì)胞（ＲＢＣ）的排列異常（如圖２Ｅ），尤其可見(jiàn)紅細(xì)胞微??血栓，而ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ組可將ＲＢＣ排列形態(tài)逆轉(zhuǎn)為降落傘常規(guī)形狀。至于血管??完整性和微血管功能，ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ調(diào)節(jié)的ＩＲ誘導(dǎo)增加ＩＣＡＭ－１的表達(dá)或微循??環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞的ｅＮＯＳ釋放減少（圖２Ｃ－Ｆ）。該受損的微血管受到ＩＲ組中分散的??ＣＤ６８陽(yáng)性炎癥細(xì)胞增加的支持（圖２Ｇ）。而ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ組炎癥滲出現(xiàn)象有所??緩解。破壞了微血管完整性和屏障功能，該結(jié)果與ＴＵＮＥＬ測(cè)定一致。進(jìn)一步用??明膠油墨檢測(cè)微血管密度表明ＩＲ組中斷了血流的延伸，而ＳＥＲＣＡ２ａＡＶＶ可在一??定程度上恢復(fù)微血管完整性（圖２Ｈ）。這些數(shù)據(jù)均表明ＳＥＲＣＡ２ａ的過(guò)度表達(dá)有??益于心臟的收縮功能，維持微血管的完整性和隨后減弱炎癥分散。??Ａ?Ｓｈ？ｍ（ＷＩ）?Ｓｈａｍ（ＳＥＲＣ．＼Ａ＞Ｎ）?Ｃ?Ｓｈａｍ（ＷＴ）?Ｓｈａｍ（ＳＦ．ＲｒＡ＾）?ＩＲＩ（＾Ｔ）?ＩＲＩ（ＳＦ．ＲｒＡ？＾??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Recent advances in the diagnosis and treatment of acute myocardial infarction[J]. Koushik Reddy,Asma Khaliq,Robert J Henning.  World Journal of Cardiology. 2015(05)



本文編號(hào)：3104481