目的 眾所周知,急性心肌梗死已成為嚴(yán)重危害人類健康的常見病。再灌注治療可以使缺血的組織重新獲得血液供應(yīng),從而使該區(qū)域組織獲得有效的救治,因此再灌注療法是治療心肌梗死的最重要的方法。但由于心肌缺血-再灌注損傷（MIRI）的存在,在一定程度上限制了再灌注治療的療效,因此如何降低MIRI,現(xiàn)如今在心血管系統(tǒng)疾病研究中,已成為重點(diǎn)及熱點(diǎn)問題�；|(zhì)交感分子1（STIM1）是細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的跨膜蛋白,研究發(fā)現(xiàn)STIM1及其下游信號(hào)因子廣泛存在心血管系統(tǒng)中,并且調(diào)控著細(xì)胞的多種生物學(xué)行為。本研究主要是探討沉默基質(zhì)交感分子1對(duì)H9C2心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷的影響。方法 培養(yǎng)H9C2心肌細(xì)胞,建立心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧（H/R）模型,將培養(yǎng)的細(xì)胞隨機(jī)分成4組:對(duì)照組（Control組）;缺氧/復(fù)氧組（H/R組）;缺氧/復(fù)氧+STIM1-si RNA組（H/R+STIM1-si RNA組）;缺氧/復(fù)氧+scramble si RNA組（H/R+scramble si RNA組）。利用STIM1-si RNA轉(zhuǎn)染H9C2心肌細(xì)胞以下調(diào)STIM1表達(dá)。流式細(xì)胞技術(shù)檢測各組細(xì)胞凋亡率,Western blot法檢測各... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
Abstract
1 引言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 H9C2細(xì)胞株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 H9C2心肌細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.3 建立H9C2心肌細(xì)胞H/R模型
        2.2.4 siRNA構(gòu)建及驗(yàn)證
        2.2.5 siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞干擾H9C2心肌細(xì)胞中STIM1的表達(dá)
        2.2.6 流式細(xì)胞技術(shù)檢測H9C2心肌細(xì)胞經(jīng)過不同的處理后所表現(xiàn)的凋亡情況
2+濃度">        2.2.7 Fluo3-AM熒光探針檢測細(xì)胞內(nèi)Ca²⁺濃度
        2.2.8 RT-PCR檢測Stim1 mRNA的水平
        2.2.9 Western blot法檢測STIM1-siRNA轉(zhuǎn)染效率及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 siRNA對(duì)H9C2心肌細(xì)胞STIM1 mRNA和蛋白表達(dá)的影響
    3.2 各組H9C2心肌細(xì)胞STIM1的表達(dá)
    3.3 STIM1-siRNA轉(zhuǎn)染后H9C2心肌細(xì)胞凋亡的變化
2+濃度的影響">    3.4 STIM1-siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)H9C2心肌細(xì)胞Ca²⁺濃度的影響
    3.5 STIM1-siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)H9C2心肌細(xì)胞Bax、Bcl-2、caspase-3表達(dá)的影響
4 討論
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]天麻素預(yù)處理減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷的可能機(jī)制[J]. 位凱,王飛,張瑾,李珍,沈兵,王烈成,孔德虎,胡金蘭.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(06)



本文編號(hào)：3104457