目的：探討CD137-CD137L軸通過(guò)調(diào)節(jié)CyPA在ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成、進(jìn)展中的作用及機(jī)制。方法：采用ApoE-/-小鼠頸動(dòng)脈硅膠圈植入法快速制作動(dòng)脈粥樣斑塊模型,分別利用抗CD137、抗CD137L激活或抑制CD137-CD137L軸,在激動(dòng)組和抑制組中分別加用CyPA慢病毒抑制載體、CyPA慢病毒過(guò)表達(dá)載體,將各組小鼠斑塊進(jìn)行病理形態(tài)學(xué)分析,并用RT-PCR,免疫組化、ELASA、Western Blot、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)斑塊、小鼠脾臟淋巴細(xì)胞、主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞中CyPA mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：（1）與正常對(duì)照組相比,手術(shù)組小鼠血清TC、TG、LDL-C顯著升高,HDL-C顯著降低。（2）正常對(duì)照組小鼠頸動(dòng)脈內(nèi)膜較為光整平滑,血管管壁呈類透明狀；未見斑塊和脂紋形成,管壁彈力板顯示完整。術(shù)后ApoE-/-動(dòng)脈粥樣斑塊模型小鼠頸動(dòng)脈管壁則見明顯的斑塊形成,板塊中見大量的泡沫細(xì)胞、脂質(zhì)成分、膽固醇結(jié)晶,彈力板出現(xiàn)變性、甚至斷裂。術(shù)后給予anti-CD137刺激劑后斑塊更顯著,抑制CyPA后斑塊明顯減少。術(shù)后給予anti-CD137L抑制劑后斑塊較正常對(duì)... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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摘要
ABSTRACT
-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的調(diào)節(jié)作用">第一部分 CD137-CD137L軸對(duì)ApoE^-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的調(diào)節(jié)作用
    1 前言
        1.1 CD137的分子生物學(xué)特性
        1.2 配體CD137L的分子生物學(xué)特性
        1.3 CD137-CD137L表達(dá)的調(diào)節(jié)
        1.4 動(dòng)脈粥樣硬化的炎性學(xué)說(shuō)
        1.5 CD137-CD137L在動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)中的作用
    2 材料
        2.1 儀器
        2.2 試劑及材料
        2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.4 高脂高膽固醇（Western diet）飼料
    3 方法
        3.1 動(dòng)物分組
        3.2 動(dòng)脈斑塊模型制作
        3.3 病理取材
        3.4 血脂測(cè)定
        3.5 標(biāo)本的處理
        3.6 蘇木素-伊紅（HE）染色
        3.7 血清sCD137水平測(cè)定
        3.8 統(tǒng)計(jì)分析
    4 結(jié)果
        4.1 sCD137在動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展中的表達(dá)水平
        4.2 體內(nèi)刺激/阻斷CD137-CD137L軸對(duì)斑塊形成的影響
    5. 討論
-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制研究">第二部分 CD137-CD137L通過(guò)CyPA調(diào)節(jié)ApoE^-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制研究
    1 前言
        1.1 CyPA與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系
            1.1.1 CyPA對(duì)單核/巨唆細(xì)胞的作用
            1.1.2 CyPA對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的作用
            1.1.3 CyPA對(duì)血管平滑肌的作用
            1.1.4 CyPA與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的關(guān)系
        1.2 CyPA 與 CD137-CD137L 軸的關(guān)系
            1.2.1 CyPA與AS炎性反應(yīng)的關(guān)系
            1.2.2 CD137-CD137L軸與AS炎性反應(yīng)的關(guān)系
    2 材料
        2.1 主要儀器
        2.2 試劑及材料
        2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    3 方法
        3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        3.2 動(dòng)脈斑塊模型制作
        3.3 病理取材
        3.4 蘇木素-伊紅（HE）染色
        3.5 CyPA免疫組化染色
        3.6 定量PCR檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)
        3.7 Western blot法檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.8 血清CyPA水平測(cè)定
-/-小鼠脾臟淋巴細(xì)胞制備">        3.9 ApoE^-/-小鼠脾臟淋巴細(xì)胞制備
        3.10 間接免疫熒光流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CyPA的表達(dá)
        3.11 平滑肌原代細(xì)胞培養(yǎng)
        3.12 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
-/-小鼠CyPA表達(dá)的影響">        4.1 CD137-CD137L相互作用對(duì)ApoE^-/-小鼠CyPA表達(dá)的影響
-/-小鼠動(dòng)脈硬化斑塊形成">        4.2 CD137-CD137L軸通過(guò)CyPA調(diào)節(jié)ApoE^-/-小鼠動(dòng)脈硬化斑塊形成
    5 體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.1 體外刺激CD137-CD137L軸影響淋巴細(xì)胞CyPA mRNA和蛋白的表達(dá)
        5.2 體外阻斷CD137-CD137L軸影響淋巴細(xì)胞CyPA mRNA和蛋白的表達(dá)
        5.3 體外刺激CD137-CD137L軸影響平滑肌細(xì)胞CyPA mRNA和蛋白的表達(dá)
    討論
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
展望
綜述
    參考文獻(xiàn)
常用縮略詞對(duì)照表
致謝
攻讀博士學(xué)位期間的科研成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]MRP8和親環(huán)素A在喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J]. 馮明亮,周建榮,魏蓮枝,余林,董浦江.  臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2011(18)
[2]細(xì)胞親環(huán)素A對(duì)單核來(lái)源泡沫細(xì)胞功能的影響[J]. 戎夢(mèng)瑤,朵瑞雪,朱平,王聰華,汪莉,樊春梅,王彥宏.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2011(05)
[3]親環(huán)素A和CD147在皮膚衰老過(guò)程中表達(dá)的研究（英文）[J]. 李吉,謝紅付,易梅,彭樂(lè)芳,雷丹,陳翔,簡(jiǎn)丹.  中南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(03)



本文編號(hào)：3059253