IL-18調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞TNF-α、IL-6、IL-8的表達(dá)
發(fā)布時間:2021-02-26 14:01
目的初步探討白細(xì)胞介素(IL)-18調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、IL-6、IL-8表達(dá)及其機(jī)制。方法以不同濃度的IL-18(3、10、30、100 ng/ml)處理VSMC,采取不同時間,通過Real-time PCR分析TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA水平的表達(dá);ELISA方法分析TNF-α、IL-6、IL-8蛋白水平表達(dá);用特異性抑制劑分別阻斷p38和AKT信號通路,通過Western blot分析這2條信號途徑激活情況及對TNF-α、IL-6、IL-8蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果不同濃度的IL-18能促使VSMC中TNF-α、IL-6、IL-8 mRNA水平表達(dá)升高,表現(xiàn)出劑量依賴效應(yīng);IL-18(30 ng/ml)以時間依賴的方式增加3種細(xì)胞因子的mRNA及蛋白水平表達(dá)。Western blot結(jié)果顯示IL-18能夠激活p38和AKT;特異性阻斷劑分析顯示:IL-18調(diào)控TNF-α、IL-6、 IL-8的表達(dá)部分依賴該2條信號途徑的激活。結(jié)論 IL-18部分依賴p38和AKT信號通路的活化從而促使VSMC中TNF-α、IL-6、 IL-8 3種...
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,55(12)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
1.2 引物
1.3 方法
1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
1.3.2 Real-time PCR檢測TNF-α、IL-6、 IL-8的mRNA水平表達(dá)
1.3.3 ELISA法分析TNF-α、IL-6、IL-8蛋白水平表達(dá)
1.3.4 Western blot分析IL-18的信號通路
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 IL-18對VSMC細(xì)胞中TNF-α、IL-6、 IL-8的mRNA水平表達(dá)的影響
2.2 IL-18對VSMC細(xì)胞中TNF-α、IL-6、 IL-8的蛋白水平表達(dá)的影響
2.3 IL-18對VSMC細(xì)胞中p38MAPK及PI3K/AKT信號通路的影響
2.4 IL-18刺激VSMC后TNF-α、IL-6、 IL-8的蛋白的表達(dá)水平與p38MAPK及AKT信號通路相關(guān)性
3 討論
本文編號:3052690
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2020,55(12)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
1.2 引物
1.3 方法
1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
1.3.2 Real-time PCR檢測TNF-α、IL-6、 IL-8的mRNA水平表達(dá)
1.3.3 ELISA法分析TNF-α、IL-6、IL-8蛋白水平表達(dá)
1.3.4 Western blot分析IL-18的信號通路
1.4 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 IL-18對VSMC細(xì)胞中TNF-α、IL-6、 IL-8的mRNA水平表達(dá)的影響
2.2 IL-18對VSMC細(xì)胞中TNF-α、IL-6、 IL-8的蛋白水平表達(dá)的影響
2.3 IL-18對VSMC細(xì)胞中p38MAPK及PI3K/AKT信號通路的影響
2.4 IL-18刺激VSMC后TNF-α、IL-6、 IL-8的蛋白的表達(dá)水平與p38MAPK及AKT信號通路相關(guān)性
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