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miR-217靶向SPRY1調(diào)控血管內(nèi)皮細胞增殖和凋亡的分子機制

發(fā)布時間:2021-02-19 19:35
  目的探討miR-217對血管內(nèi)皮細胞增殖、凋亡的影響及其作用機制。方法運用25μmol/ml高糖建立血管內(nèi)皮細胞EAhy926損傷;運用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測細胞中miR-217、軟脂;椎鞍祝⊿PRY1)的表達;將HG+anti-miR-con組(轉(zhuǎn)染anti-miR-con)、HG+anti-miR-217組(轉(zhuǎn)染anti-miR-217)、HG+pcDNA組(轉(zhuǎn)染pcDNA)、HG+pcDNA-SPRY1組(轉(zhuǎn)染pcDNA-SPRY1)、HG+anti-miR-217+si-con組(共轉(zhuǎn)染anti-miR-217和si-con)、HG+anti-miR-217+si-SPRY1組(共轉(zhuǎn)染anti-miR-217和si-SPRY1)用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染至EAhy926細胞,再用高糖處理;Western印跡檢測細胞中SPRY1、細胞周期蛋白依靠性激酶抑制劑(p21)、B細胞淋巴瘤/白血。˙cl-2)、Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bax)的蛋白表達;噻唑藍(MTT)法檢測細胞增殖;膜聯(lián)蛋白V-異硫氰酸熒光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)雙染法檢... 

【文章來源】:中國老年學(xué)雜志. 2020,40(20)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細胞培養(yǎng)
    1.3 細胞模型的建立與分組
    1.4 qRT-PCR實驗檢測miR-217、SPRY1表達
    1.5 Western印跡實驗檢測細胞SPRY1、p21、Bax、Bcl-2蛋白表達
    1.6 MTT法檢測細胞增殖
    1.7 Annexin V-FITC/PI雙染檢測細胞凋亡
    1.8 生物信息學(xué)分析
    1.9 雙熒光素酶報告基因?qū)嶒烌炞CmiR-217與SPRY1的靶向結(jié)合
    1.10 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 高糖誘導(dǎo)對人臍靜脈內(nèi)皮細胞中miR-217和SPRY1表達的影響
    2.2 抑制miR-217調(diào)控高糖誘導(dǎo)對人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖
    2.3 抑制miR-217調(diào)控高糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡
    2.4 miR-217靶向SPRY1
    2.5 過表達SPRY1調(diào)控高糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖凋亡
    2.6 干擾miR-217和沉默SPRY1對高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖和凋亡的影響
    2.7 抑制miR-217聯(lián)合沉默SPRY1調(diào)控高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞增殖相關(guān)蛋白和凋亡相關(guān)蛋白
3 討 論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]外泌體來源微小RNA在心血管疾病中作用研究進展[J]. 潘益凱,孫喜慶.  心臟雜志. 2018(04)
[2]高糖誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞損傷microRNA表達紊亂的體外研究[J]. 劉宇,曹清心,于曼麗,張必利,石屹城,崔玲,趙仙先.  現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展. 2015(13)
[3]Spry1和MAPK蛋白在病毒性心肌炎心肌組織中的表達[J]. 許弘飛,孟林,姚健,谷振勇,劉國慶,沈憶文,趙子琴.  法醫(yī)學(xué)雜志. 2013(03)
[4]辛伐他汀抑制高糖誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細胞的凋亡[J]. 徐茂鳳,李永杰,王婉麗.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(41)



本文編號:3041585

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