心肌缺血再灌注（ischemia reperftusion,IR）常常發(fā)生于臨床心血管手術(shù)及心梗的治療過程中,可導(dǎo)致不可逆的組織損傷。在IR損傷過程中,促炎因子持續(xù)上調(diào)引起過度的炎癥反應(yīng),會(huì)加重組織細(xì)胞損傷。與此同時(shí),心肌細(xì)胞有限的增殖分化能力限制了心臟組織的再生修復(fù),進(jìn)一步促使細(xì)胞凋亡、膠原沉積,最終阻礙心臟的修復(fù)。目前臨床上通常使用小分子抑制劑進(jìn)行IR損傷的治療,但潛在的副作用以及高昂的治療成本大大限制了其在臨床治療中的應(yīng)用�；蛑委�,特別是RNA干擾技術(shù)（RNAi）,具有特異性強(qiáng)、治療效率高等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于多種疾病的治療。通過遞送siRNA下調(diào)炎癥因子的表達(dá),可以抑制損傷后過激的炎癥反應(yīng),亦或抑制心肌細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞再生修復(fù),重塑心臟組織處失衡的微環(huán)境。這兩種方法均可阻遏心臟由急性心肌梗塞發(fā)展為心臟衰竭的過程,從而達(dá)到治療IR損傷的目的。基因治療的關(guān)鍵在于高效、低毒的基因遞送載體的構(gòu)建。以細(xì)胞穿膜肽為基礎(chǔ)的α螺旋陽離子聚多肽具有較強(qiáng)的穿膜活性,可介導(dǎo)高效的跨膜基因藥物遞送,從而促進(jìn)基因轉(zhuǎn)染,達(dá)到治療疾病的目的。此外,體內(nèi)穩(wěn)定性是陽離子載體用于基因遞送的另一挑戰(zhàn),通過細(xì)胞膜包... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．３非病毒載體體內(nèi)基因藥物遞送的屏障［２６］

第一章?基于螺旋陽離子聚多肽的ｓｉＲＮＡ遞送體系用于心肌缺血再灌注損傷的治療研究??１．３．２．１脂質(zhì)體??脂質(zhì)體是由兩性分子，如磷脂（卵磷脂、棕櫚酰磷脂酰膽堿）形成的具有雙分??子層結(jié)構(gòu)的封閉型囊泡，由一個(gè)水溶性內(nèi)核和外層疏水膜構(gòu)成，可以高效包載親疏??水藥物分子。其次，脂質(zhì)體具有與生物膜類似的雙分子層膜結(jié)構(gòu)，可通過膜融合的??方式將藥物遞送進(jìn)細(xì)胞（圖１．４）?［３１，３２］。目前，己有多種商業(yè)化脂質(zhì)體試劑應(yīng)用??于基因遞送，包括?ＲＮＡｉｆｅｃｔ?Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ?（Ｑｉａｇｅｎ）、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ?（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）等??［３３］。然而，由于脂質(zhì)體不易在體內(nèi)降解，因此具有較高的細(xì)胞毒性，同時(shí)脂質(zhì)體??介導(dǎo)的藥物遞送存在非特異性細(xì)胞攝取等缺點(diǎn)，大大限制了其在體內(nèi)安全、有效的??應(yīng)用。??＾?Ｔａｒｇｅｔｅｄ?ｒｅｃｅｐｔｏｒ?ｂ??ＴｒｉｔｏｎＸ－１００?？?Ｄｒｕ９?＾?＾??Ｓｏｄｉｕｍ?Ｄｅｏｘｙｃｈｏｌａｔｅ?＾?Ｖ－?４??Ｆｉｇｕｒｅ?１．４?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｂｉｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ?ｌｉｐｏｓｏｍｅ－ｌｉｋｅ?ｎａｎｏｖｅｓｉｃｌｅ?（ＢＬＮ）??ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ［３２］．??圖１．４生物功能化類脂質(zhì)體納米囊泡（ＢＬＮ）的制備［３２］。??１．３．２．２陽離子聚合物??離子聚合物可通過靜電作用穩(wěn)定包載帶有負(fù)電性的核酸分子，提高其在細(xì)胞??內(nèi)的遞送效率，是非病毒基因載體最重要的分類之一。常用的陽離子聚合物包括聚??賴氨酸（ｐｏｌｙ（ｌｙｓｉｎｅ），?ＰＬＬ）、聚乙稀亞胺（ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｉｍｉｎｅ，?ＰＥＩ）、

ａｍｉｎｅ?（ＰＡＭＡＭ）?ｄｅｎｄｒｉｍｅｒ－ＧＩ?ｐｏｌｙ＜Ｌｈｉｓｌｉｎ￡）?ｐｏｌｙ（屮?ａｍｉｎｏ?ｅｓｔｅｒ）ｓ??咖？喲?ＣＰＨｌｓ）〇?（ＰＢＡＥＯ??Ｗ?〇＼＾°?［Ｓ?Ｘ］?。?。??１?ｌ?ｌ?ｌｎ??一。Ｈ／。。Ｘ＞??Ｎ?ＮＨ，?Ｎ??Ｏ＾ｉ?ｋ＾Ｏ??ＨｊＮ?？ＮＨ?ＨＮ，ＮＨｊ??Ｆｉｇｕｒｅ?１．５?Ｃｈｅｍｉｃａｌ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ?ｏｆ?ｃａｔｉｏｎｉｃ?ｐｏｌｙｍｅｒｓ?ｆｏｒ?ｇｅｎｅ?ｄｅｌｉｖｅｒｙ［３４］．??圖１．５用于基因遞送的陽離子聚合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式［３４］。??ＰＬＬ是最早應(yīng)用于基因遞送的陽離子聚合物，本質(zhì)是生物可降解的多肽，在體??內(nèi)應(yīng)用方面具有很大的優(yōu)勢(shì)［３８］。然而ＰＬＬ與核酸分子形成的復(fù)合物會(huì)與血漿中??的蛋白結(jié)合，并從循環(huán)系統(tǒng)中清除。此外，該復(fù)合物通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞后，易??被內(nèi)含體／溶酶體捕獲，使核酸分子不能順利釋放，導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率的大幅降低。為??了降低ＰＬＬ的系統(tǒng)毒性，增強(qiáng)復(fù)合物的內(nèi)含體逃逸能力，通常利用氯唾、膜破壞??性肽或咪唑等修飾，或與ＰＥＩ、聚乳酸－羥基乙酸（ＰＬＧＡ）等聚合物形成共聚物，??來提高ＰＬＬ的基因轉(zhuǎn)染效率［３９，?４０］。??ＰＥＩ是最常用的基因載體，其質(zhì)子化后電荷密度較高，可以通過“質(zhì)子海綿效??應(yīng)”介導(dǎo)復(fù)合物逃避內(nèi)含體／溶酶體，因此展現(xiàn)出強(qiáng)有力的基因轉(zhuǎn)染能力［４卜４４］。??ＰＥＩ與核酸分子的結(jié)合能力、基因遞送效率與其分子量息息相關(guān)。低分子量的ＰＥＩ??的電荷密度較小，不能緊密結(jié)合核酸分子，影響其基因遞送效率。高分子量的ＰＥＩ??可以介導(dǎo)更高效的基因轉(zhuǎn)染，但是隨之增加的正電荷密度也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷，


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