研究背景原發(fā)免疫性血小板減少癥（immune thrombocytopenia,ITP）是一種獲得性的自身免疫性疾病,其特征表現(xiàn)為孤立的血小板減少癥。本病常病情遷延且容易復(fù)發(fā),其發(fā)病機(jī)制亦尚未完全明確,為疾病的明確診斷和藥物的研發(fā)帶來(lái)困難。外泌體是一種小型的細(xì)胞外膜性囊泡,最近的研究揭示了其在信號(hào)傳遞和免疫調(diào)節(jié)方面的重要意義。研究發(fā)現(xiàn)外泌體可參與多種自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等的發(fā)病過(guò)程,這提示我們外泌體可能也同樣參與了 ITP的發(fā)病機(jī)制。本研究針對(duì)ITP患者的血漿外泌體進(jìn)行蛋白組學(xué)測(cè)定及microRNA測(cè)序分析,可以幫助我們更好的理解ITP的發(fā)病機(jī)制,并可能為將來(lái)提供新的治療靶點(diǎn)。目的對(duì)比原發(fā)免疫性血小板減少癥患者與健康對(duì)照者在血漿外泌體蛋白組學(xué)表達(dá)譜、microRNA測(cè)序表達(dá)譜之間存在的差異,發(fā)掘潛在發(fā)病機(jī)制及治療靶點(diǎn)。方法所有研究對(duì)象均嚴(yán)格按照入組標(biāo)準(zhǔn)納入本研究。對(duì)原發(fā)免疫性血小板減少癥患者與健康對(duì)照者進(jìn)行空腹采血并按照規(guī)范流程提取血漿外泌體。通過(guò)透射電子顯微鏡分析、Western Blot蛋白印跡分析、納米顆粒示蹤分析驗(yàn)證所提取外泌體,并與相關(guān)合作單位協(xié)同進(jìn)... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
第一章 前言
第二章 實(shí)驗(yàn)方法與對(duì)象
    2.1 受試者選擇
        2.1.1 患者入組標(biāo)準(zhǔn)
        2.1.2 患者排除標(biāo)準(zhǔn)
        2.1.3 健康對(duì)照者入組標(biāo)準(zhǔn)
    2.2 研究方法
        2.2.1 血液標(biāo)本的準(zhǔn)備
        2.2.2 血漿外泌體的制備
        2.2.3 透射電子顯微鏡分析
        2.2.4 Western Blot蛋白印記分析
        2.2.5 納米顆粒示蹤分析（NTA）
        2.2.6 蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析
        2.2.7 microRNA表達(dá)測(cè)序分析
第三章 結(jié)果
    3.1 基本臨床信息
    3.2 從血漿標(biāo)本中分離及驗(yàn)證外泌體
    3.3 蛋白標(biāo)本的質(zhì)量控制
    3.4 外泌體蛋白的識(shí)別鑒定
    3.5 外泌體差異性表達(dá)蛋白的基因本體論（GO）分析
    3.6 載脂蛋白E的KEGG通路分析
    3.7 miRNA測(cè)序的質(zhì)量控制
    3.8 外泌體miRNA的識(shí)別鑒定
    3.9 外泌體內(nèi)差異顯著的miRNA的基因本體論（GO）分析
    3.10 外泌體中差異顯著的miRNA的KEGG通路分析
第四章 討論
    4.1 載脂蛋白E
    4.2 microRNA
        4.2.1 ITP患者外泌體中表達(dá)下調(diào)的microRNA
        4.2.2 ITP患者外泌體中表達(dá)上調(diào)的microRNA
    4.3 本實(shí)驗(yàn)的局限性
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表



本文編號(hào)：3021948