目的:探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（Endoplasmic Reticulum Stress/ERS）參與房顫發(fā)生的機(jī)制。方法:1.大鼠心房顫動(dòng)模型的建立:10只8周齡雄性SD大鼠經(jīng)食道快速心房起搏后,觀察房顫誘發(fā)的情況,并記錄房顫誘發(fā)前后心電圖的改變,制備房顫組模型（A F）,對(duì)照組（control group）除不行經(jīng)食道快速心房起搏,其余同AF組。2.大鼠及乳鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型建立:用衣霉素刺激大鼠（成年）心肌細(xì)胞,建立內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型（衣霉素組1）,用衣霉素刺激乳鼠心肌細(xì)胞,建立細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型（衣霉素組2）,在此基礎(chǔ)上轉(zhuǎn)染miR-105 mimic建立衣霉素+miR-105mi mic組,磷酸鹽緩沖液（PBS）處理成鼠心肌細(xì)胞建立對(duì)照組1,磷酸鹽緩沖液（P BS）處理乳鼠心肌細(xì)胞建立對(duì)照組2,對(duì)照組2加入miR-105mimic建立對(duì)照組+mi R-105mimic組。3.GRP78、RyR2及miR-105檢測(cè):蛋白免疫印跡法檢測(cè)葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白GR P78、RyR2磷酸化表達(dá)水平,Real-time PCR檢測(cè)心房顫動(dòng)后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的mi R-105。結(jié)果:1.10只SD大鼠經(jīng)食道快速心房... 

【文章來源】：西安醫(yī)學(xué)院陜西省

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

BL-420F生物機(jī)能系統(tǒng)描記大鼠心電圖(記錄標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián))

西安醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文27抗甘油酸-3-磷酸脫氫酶抗體中國(guó)杭州GoodHere公司TUNEL檢測(cè)試劑盒上海嶸威達(dá)實(shí)業(yè)有限公司SYBR-Green熒光試劑盒中國(guó)西安海寧生物工程有限公司2.2主要儀器設(shè)備表2主要儀器設(shè)備儀器名稱公司小動(dòng)物心電圖機(jī)湖南鼠行生物科技有限公司流式細(xì)胞檢測(cè)儀美國(guó)CST公司反轉(zhuǎn)錄儀美國(guó)ABI公司實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)美國(guó)福斯特應(yīng)用生物醫(yī)學(xué)公司電泳儀美國(guó)Bio-Rad公司轉(zhuǎn)膜儀美國(guó)Bio-Rad公司化學(xué)發(fā)光成像儀瑞士羅氏公司2.3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)比較采用Student-t檢驗(yàn)。P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1大鼠心房顫動(dòng)模型的制備與鑒定10只SD大鼠經(jīng)食道快速心房起搏后，行心電圖檢查觀察房顫誘發(fā)的情況。房顫模型制備成功數(shù)6只，（n=6，成功率=60%）3.1.1心電圖（Electrocardiogram/ECG）評(píng)價(jià)心房顫動(dòng)模型手術(shù)前及手術(shù)后8天分別行心電圖檢查，明確心房顫動(dòng)模型的制備。心電圖示：①正常心房P波消失；②f波出現(xiàn)，中間無等電位線；傘心室率較起搏前明顯加快。具體如圖2。大鼠竇性心律大鼠房顫心律圖2大鼠竇性及房顫的心電圖

西安醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文283.1.2GRP78評(píng)估大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的程度GRP78是發(fā)現(xiàn)最早的一類內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶蛋白，是進(jìn)化保守的應(yīng)激蛋白，既往研究表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)活化伴隨GRP78顯著升高，因此GRP78增高，可作為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激活化的重要指標(biāo)。如圖3示：n=6,對(duì)照組VS房顫組(0.385±0.179VS1.373±0.431)與對(duì)照組比較，AF組心房肺靜脈交界處心肌組織GRP78蛋白水平表達(dá)顯著增加（P<0.05），GAPDH無顯著變化（P＞0.05），表明房顫大鼠內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激活化；AF組與對(duì)照組GRP78，CHOP蛋白水平表達(dá)水平比較，*與對(duì)照組相比，P<0.05；圖3房顫大鼠模型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激活化3.2大鼠房顫內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激模型中RyR2的表達(dá)大鼠房顫內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激活化后，在心房肺靜脈交界處心肌組織中，應(yīng)用Westernblot檢測(cè)法檢測(cè)，n=3,房顫組RyR2總含量對(duì)照組VS房顫組(1.23±0.28VS2.23±0.27)，與對(duì)照組相比，房顫組RyR2mRNA表達(dá)水平顯著增加（圖4A，P<0.05）；與對(duì)照組相比，房顫組RyR2蛋白，PS2814-RyR2及PS2808-RyR2蛋白水平表達(dá)均顯著增加（P<0.05）（圖4A）；Real-timePCR檢測(cè)法檢測(cè)，n=5,eRyR2/β-actinmRNA表達(dá)量對(duì)照組VS房顫組(1.0±0VS14.83±3.38)與對(duì)照組相比，房顫組eRyR2/β-actinmRNA表達(dá)量顯著增高（P<0.01）（圖4B）；表明大鼠房顫內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激活化后，RyR2總含量增高，RyR2磷酸化水平顯著增高。圖4A圖4B

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]心房顫動(dòng):目前的認(rèn)識(shí)和治療的建議-2018[J]. 黃從新,張澍,黃德嘉,華偉.  中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志. 2018(04)
[2]心房顫動(dòng)動(dòng)物模型建立的方法學(xué)[J]. 陳雯雯,羅章源,陳穎敏.  中國(guó)心臟起搏與心電生理雜志. 2010(05)



本文編號(hào)：3004446