冠心�。╟oronary artery diseases, CAD）是一種常見(jiàn)的嚴(yán)重危害人們身心健康的疾病,動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是其病理生理基礎(chǔ),研究表明內(nèi)皮功能不全及炎癥反應(yīng)是動(dòng)脈粥樣硬化形成的核心環(huán)節(jié),但其機(jī)制尚未完全闡明。血管過(guò)氧化物酶（Vascular peroxidase, VPO）是本課題組發(fā)現(xiàn)并命名的一種新的過(guò)氧化物酶,其為過(guò)氧化物酶家族成員之一,與髓過(guò)氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）具有高達(dá)44.5%的同源性,二者均可催化過(guò)氧化氫（H202）（弱氧化劑）成為次氯酸（HOC1）（強(qiáng)氧化劑）從而發(fā)揮其生物學(xué)功能,與MPO主要由中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞分泌不同,VPO主要存在于血管及心肌組織中,目前已證實(shí)VPO具有兩種亞型,VPO1和VP02,在血管內(nèi)皮中的以VPO1表達(dá)為主。我們之前的研究證實(shí)冠心病患者血漿中VPO1濃度顯著升高,且與氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL）呈明顯正相關(guān)。此外,VPO1基因沉默后可顯著抑制ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,其機(jī)制與抑制NADPH gp91phox蛋白表達(dá),從而抑制ROS/p38MA... 

【文章來(lái)源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞VPOl表達(dá)及細(xì)胞內(nèi)HOCl的影響（量效及時(shí)效實(shí)檢）

3.2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染VP01 shRNA的內(nèi)皮細(xì)胞的鑒定如圖1-2可見(jiàn)，質(zhì)粒被轉(zhuǎn)入細(xì)胞內(nèi)建立穩(wěn)定細(xì)胞系后，在熒光顯微鏡下觀察GFP表達(dá)，通過(guò)計(jì)算表達(dá)GFP的細(xì)胞來(lái)計(jì)算細(xì)胞轉(zhuǎn)染率達(dá)90%以上（圖1-2 A)。用Western Blot方法來(lái)鑒定細(xì)胞內(nèi)VP01的蛋白表達(dá)，轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞的VP01的蛋白表達(dá)明顯降低（圖1-2 B)。AmL ‘ - ?-'- ；_； _Jcontrol GFP expression19

— VP01p-actincontrol VP01 shRNA圖1-2穩(wěn)定轉(zhuǎn)染VPOl shRNA的內(nèi)皮細(xì)胞模型構(gòu)建。注：A:左圖為光鏡下內(nèi)皮細(xì)胞；右圖為綠色焚光激發(fā)下內(nèi)皮細(xì)胞圖像，可見(jiàn)轉(zhuǎn)染效90%以上。B: Control:為轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組；VP01 shRNA組：轉(zhuǎn)染VP01 shRNA內(nèi)皮細(xì)可見(jiàn)VPOlsh RNA組VP01蛋白表達(dá)顯著降低。VP01基因沉默對(duì)OX-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞NO水平的影響與對(duì)照組相比，OX-LDL (lOO^g/ml)培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞24 h顯著抑制內(nèi)皮細(xì)胞生成，而VP01基因沉默可逆轉(zhuǎn)OX-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞NO生成的抑制作用，非特異性shRNA對(duì)OX-LDL的損傷作用無(wú)顯著影響。VP01基因沉默的內(nèi)胞或轉(zhuǎn)染非特異性shRNA的內(nèi)皮細(xì)胞，對(duì)細(xì)胞NO水平無(wú)顯著影響（圖)。100


本文編號(hào)：3002406