冠心�。╟oronary artery diseases, CAD）是一種常見的嚴重危害人們身心健康的疾病,動脈粥樣硬化（atherosclerosis, AS）是其病理生理基礎,研究表明內皮功能不全及炎癥反應是動脈粥樣硬化形成的核心環(huán)節(jié),但其機制尚未完全闡明。血管過氧化物酶（Vascular peroxidase, VPO）是本課題組發(fā)現(xiàn)并命名的一種新的過氧化物酶,其為過氧化物酶家族成員之一,與髓過氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）具有高達44.5%的同源性,二者均可催化過氧化氫（H202）（弱氧化劑）成為次氯酸（HOC1）（強氧化劑）從而發(fā)揮其生物學功能,與MPO主要由中性粒細胞和單核巨噬細胞分泌不同,VPO主要存在于血管及心肌組織中,目前已證實VPO具有兩種亞型,VPO1和VP02,在血管內皮中的以VPO1表達為主。我們之前的研究證實冠心病患者血漿中VPO1濃度顯著升高,且與氧化性低密度脂蛋白（ox-LDL）呈明顯正相關。此外,VPO1基因沉默后可顯著抑制ox-LDL誘導的內皮細胞凋亡,其機制與抑制NADPH gp91phox蛋白表達,從而抑制ROS/p38MA... 

【文章來源】：中南大學湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

ox-LDL對內皮細胞VPOl表達及細胞內HOCl的影響（量效及時效實檢）

3.2穩(wěn)定轉染VP01 shRNA的內皮細胞的鑒定如圖1-2可見，質粒被轉入細胞內建立穩(wěn)定細胞系后，在熒光顯微鏡下觀察GFP表達，通過計算表達GFP的細胞來計算細胞轉染率達90%以上（圖1-2 A)。用Western Blot方法來鑒定細胞內VP01的蛋白表達，轉染后的細胞的VP01的蛋白表達明顯降低（圖1-2 B)。AmL ‘ - ?-'- ；_； _Jcontrol GFP expression19

— VP01p-actincontrol VP01 shRNA圖1-2穩(wěn)定轉染VPOl shRNA的內皮細胞模型構建。注：A:左圖為光鏡下內皮細胞；右圖為綠色焚光激發(fā)下內皮細胞圖像，可見轉染效90%以上。B: Control:為轉染空質粒組；VP01 shRNA組：轉染VP01 shRNA內皮細可見VPOlsh RNA組VP01蛋白表達顯著降低。VP01基因沉默對OX-LDL誘導的內皮細胞NO水平的影響與對照組相比，OX-LDL (lOO^g/ml)培養(yǎng)內皮細胞24 h顯著抑制內皮細胞生成，而VP01基因沉默可逆轉OX-LDL對內皮細胞NO生成的抑制作用，非特異性shRNA對OX-LDL的損傷作用無顯著影響。VP01基因沉默的內胞或轉染非特異性shRNA的內皮細胞，對細胞NO水平無顯著影響（圖)。100


本文編號：3002406