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丹蔞片通過PI3K/Akt信號通路促血管內皮細胞增殖、遷移的機制研究

發(fā)布時間:2021-01-13 09:14
  目的以人動脈血管內皮細胞(HAEC)為培養(yǎng)模型,觀察丹蔞片對細胞增殖、遷移的作用及其相關功能蛋白、信號通路蛋白的表達。探索丹蔞片促HAEC細胞增殖和遷移的可能機制。方法1.實驗分組:本實驗共分為五組,即血清饑餓組、空白對照組、丹蔞片組、可定組和混合組。每組由相應10%含藥血清作用24小時后,進行后續(xù)實驗。2.含藥血清的制備:新西蘭白兔16只,隨機分為四組,每組4只。分別給予丹蔞片2.5g/kg/d、可定5mg/kg/d、丹蔞片2.5g/kg/d+可定5mg/kg/d灌胃,空白對照組以等體積生理鹽水灌胃。連續(xù)灌胃5天后,腹主動脈采血,離心取上清,-70℃冰箱凍存?zhèn)溆谩?.HAEC細胞增殖活力的測定:取指數生長期HAEC細胞,調整密度以2×103個/孔的密度接種于96孔板,完全貼壁后,無血清同步化24h。加不同10%含藥血清作用24h,收集細胞培養(yǎng)上清于-70℃冰箱凍存?zhèn)溆。Cell Titer-Glo化學發(fā)光法測各組細胞增殖活力。4.HAEC細胞遷移能力的測定:取指數生長期HAEC細胞,調整細胞密度為1×105個/ml,取200μl單細胞懸液接種Transwell小室上層。各組小室下層加... 

【文章來源】:河南中醫(yī)藥大學河南省

【文章頁數】:74 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
前言
材料與方法
    1.實驗材料
    2.實驗方法與步驟
    3.統計學處理
結果
    1.細胞形態(tài)學觀察
    2.細胞生長曲線
    3.細胞增殖活力
    4.細胞遷移能力
    5.細胞周期分布
    6.各組細胞VEGF、SDF-1、e NOS的表達
    7.各組細胞PCNA、Cyclin D1、CDK4、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表達水平的變化
討論
    1.丹蔞片對ECs增殖活力、細胞周期及其相關蛋白的影響
    2.丹蔞片對ECs遷移及其分泌VEGF和SDF-1 的影響
    3.丹蔞片對e NOS-NO系統的影響
    4.丹蔞片對ECs磷脂酰肌醇 3-激酶/蛋白激酶B信號通路的影響
結論
致謝
參考文獻
附錄1 文獻綜述
    參考文獻
附錄2 在校期間科研情況和論文著作


【參考文獻】:
期刊論文
[1]支架內新生動脈粥樣硬化研究進展[J]. 羅明華,王賀,關懷敏.  中國循環(huán)雜志. 2014(10)
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[7]丹蔞片治療瘀血阻絡型不穩(wěn)定型心絞痛療效觀察[J]. 魯文濤.  新中醫(yī). 2013(09)
[8]應用光學相干斷層成像評價藥物洗脫支架術后再發(fā)急性冠脈綜合征患者的原因[J]. 陳玉善,張金盈,關懷敏,解金紅,邱承杰.  醫(yī)藥論壇雜志. 2013(08)
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[10]冠心病介入治療后再狹窄機制的中西醫(yī)研究進展[J]. 聶謙,許勇.  世界科學技術-中醫(yī)藥現代化. 2013(05)

博士論文
[1]雷帕霉素抑制內皮細胞增殖和遷移:PI3K/Akt/mTOR/p70S6K信號通路的作用[D]. 劉海濤.第四軍醫(yī)大學 2010
[2]冠心病介入治療前后中醫(yī)證候特征及客觀化研究[D]. 任毅.廣州中醫(yī)藥大學 2009



本文編號:2974627

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