目的:研究miR-144對巨噬細胞脂質蓄積和炎癥反應的作用,探討miR-144對動脈粥樣硬化（atherosclerosis, As）的影響。方法:體外培養(yǎng)巨噬細胞,轉染miR-144后,檢測細胞內(nèi)脂質蓄積,檢測培養(yǎng)上清中炎癥因子水平的水平;探討miR-144是否與c-Fos 3 ’UTR靶向結合并抑制其表達;miR-144對巨噬細胞脂質蓄積及炎癥因子分泌的作用及機制;miR-144對apoE-/-小鼠主動脈壁內(nèi)脂質蓄積、血脂水平、As病變、c-Fos的表達水平和炎癥因子表達高低的變化。結果:（一）實驗結果表明,miR-144 mimic能夠降低體外培養(yǎng)巨噬細胞內(nèi)游離膽固醇、總膽固醇、以及細胞內(nèi)脂滴體積和數(shù)量,miR-144的互補序列則可阻斷以上效應,增加巨噬細胞內(nèi)脂滴體積和數(shù)量,增加巨噬細胞內(nèi)游離膽固醇和膽固醇酯的水平;酶聯(lián)免疫實驗證明miR-144 mimic明顯降低巨噬細胞炎癥因子包括IL-6、IL-1β、TNF-α的含量和水平,而miR-144反向核苷酸序列通過與miR-144的互補阻斷miR-144的作用。（二）生物信息學分析發(fā)現(xiàn)miR-144具有靶向調(diào)控c-Fos的生物學基... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學院北京市

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖１?ｍｉＲＮＡ生成過程??個ｍｉＲＮＡ存在生理功能，其中超過數(shù)百個，已通過克隆和復制序列，研宄了其生??理功能［２６＿２７］

實時定量ＰＣＲ技術檢測，結果發(fā)現(xiàn)，ｎｎＲ－１４４的水平增加，說明外源性轉染效率較??高，可以開始下一步實驗。兩種細胞表現(xiàn)出一致的結果。轉染ｍｉＲ－１４４反義核苷酸??序列的組別則檢測到的表達水平較低，和對照組相比有統(tǒng)計學差異（如圖１．１，圖??１．２所示）。??〇?４－｜??＇Ｉ?＊??Ｉ：?｜??ｉ：Ｗｕｍ??，，，??，、／??圖１．１?ＴＨＰ－１巨噬細胞轉染ｍｉＲ－１４４模擬物后ｍｉＲ－１４４表達水平??注：和對照組相比＊Ｐ?＜?０．０５認定有統(tǒng)計學意義；??和對照組相比＃Ｐ?＜?０．０５認定有統(tǒng)計學意義；??２４??

轉染ｍｉＲ－１４４模擬物及反義核苷酸序列后，用油紅染色實驗檢測結果，發(fā)現(xiàn)人ＴＨＰ－１??巨噬細胞如果ｍｉＲ－１４４的水平較高則可以降低脂質水平，ｍｉＲ－１４４水平較低則巨噬??細胞內(nèi)脂質含量較高。（如圖１．３所示）。??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｎｅｇａｔｉｖｅ??２５??

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Activation of immediate-early response gene c-Fos protein in the rat paralimbic cortices after myocardial infarction[J]. Ji Yun Ahn,Hyun-Jin Tae,Jeong-Hwi Cho,In Hye Kim,Ji Hyeon Ahn,Joon Ha Park,Dong Won Kim,Jun Hwi Cho,Moo-Ho Won,Seongkweon Hong,Jae-Chul Lee,Jeong Yeol Seo.  Neural Regeneration Research. 2015(08)
[2]Computational Prediction of Micro RNAs from Toxoplasma gondii Potentially Regulating the Hosts’ Gene Expression[J]. Müs?erref Duygu Saar,Caner Bagc?,Jens Allmer.  Genomics,Proteomics & Bioinformatics. 2014(05)
[3]電針對心肌缺血模型大鼠孤束核c-fos表達及心電圖STⅡ的影響[J]. 李江山,嚴潔,何軍鋒,彭娜.  針刺研究. 2009(03)
[4]硫化氫對大鼠心肌缺血/再灌注損傷的保護作用及其對c-Fos蛋白表達的影響（英文）[J]. 祝曉瑩,嚴曉紅,陳世健.  生理學報. 2008(02)
[5]活血潛陽方對自發(fā)性高血壓大鼠心肌肥厚組織原癌基因c-fos和c-myc表達的影響[J]. 符德玉,王世紅,周端,馬宇瀅,金露,祖亮華.  中西醫(yī)結合學報. 2008(04)
[6]AngⅡ誘導的心肌肥大中c-fos,c-jun mRNA表達變化及丹參酮ⅡA的影響[J]. 周代星,梁黔生,何雪心,占成業(yè).  中國中藥雜志. 2008(08)



本文編號：2972632