研究背景冠狀動脈粥樣硬化（AS）是造成急性冠脈綜合征（ACS）的主要原因,導致大多數心血管事件的發(fā)生。它是動脈壁的一種慢性炎癥性疾病,血管內皮細胞功能障礙在動脈粥樣硬化的早期起著關鍵作用,過量的脂質和炎癥反應被認為是斑塊形成的主要因素。受累動脈病變先是內皮功能障礙、然后內膜內廣泛的脂質沉積,吞噬細胞和血小板粘附、聚集以及炎性因子的釋放造成炎癥反應。PECAM-1在內皮細胞表面有表達,尤其血管內皮細胞連接部位高度表達,有研究認為PECAM-1在動脈粥樣硬化的發(fā)病機制中發(fā)揮作用,其作為內皮細胞表面機械感受器調節(jié)細胞功能的變化。氧化應激引起的活性氧（ROS）產生是許多血管疾病的重要原因。ROS主要由NADPH氧化酶產生,在生理條件下,血管NADPH氧化酶具有較低的活性。然而,NADPH氧化酶含量可以在脂多糖（LPS）等刺激物的作用下得到提高,誘導內皮細胞功能改變,引起炎癥反應,破壞血管穩(wěn)態(tài)。PARP-1是一種高度保守的DNA結合核酶,在氧化應激DNA損傷時被激活,PARP-1可以調節(jié)各種關鍵炎癥因子的表達,包括細胞間粘附分子1（ICAM-1）和血管細胞粘附分子1（VCAM-1）等。PARP-... 

【文章來源】：濟南大學山東省

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
主要符號表
摘要
Abstract
前言
材料和方法
    1.1 主要材料和儀器設備
        1.1.1 主要材料
        1.1.2 儀器設備
    1.2 細胞株培養(yǎng)
        1.2.1 細胞復蘇
        1.2.2 細胞換液及傳代
        1.2.3 細胞凍存
    1.3 研究方法
        1.3.1 技術路線圖
        1.3.2 分組方法
    1.4 Western blot
        1.4.1 配膠
        1.4.2 配液
        1.4.3 提蛋白
        1.4.4 SDS-PAGE電泳
        1.4.5 轉膜
        1.4.6 封閉
        1.4.7 一抗孵育
        1.4.8 二抗孵育
        1.4.9 化學發(fā)光顯影
    1.5 細胞免疫熒光
    1.6 ELISA
    1.7 DCFDA熒光檢測ROS
    1.8 統計分析
結果
    2.1 最適濃度的選擇
        2.1.1 PECAM-1 siRNA最適抑制濃度
        2.1.2 Apocynin的最適抑制濃度
        2.1.3 DPQ的最適抑制濃度
    2.2 LPS誘導HAEC中 ROS、NOX4、PARP-1蛋白及炎性因子生成增加
        2.2.1 LPS促進ROS的產生
        2.2.2 LPS誘導人主動脈內皮細胞中NOX4 表達量增加
        2.2.3 LPS誘導血管內皮細胞PARP-1蛋白及炎性因子的表達增加
    2.3 NOX4/ROS參與PECAM-1對PARP-1蛋白及炎性因子表達的調控
        2.3.1 NOX4/ROS上調PARP-1及炎性因子的表達
        2.3.2 PECAM-1上調PARP-1蛋白及炎性因子的表達
        2.3.3 抑制PECAM-1能減輕LPS誘導的炎癥反應
        2.3.4 LPS上調PECAM-1表達
        2.3.5 PARP-1蛋白促進炎性因子VCAM-1、ICAM-1、MCP-1表達
        2.3.6 PECAM-1對ROS的表達沒有明顯的調控作用
討論
結論
創(chuàng)新與不足
參考文獻
致謝
附錄



本文編號：2917288