研究背景鈣化性主動(dòng)脈瓣疾病（Calcific aortic valve disease,CAVD）是一種常見的心血管疾病,由于缺乏有效的預(yù)防和治療手段而導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率居高不下,在人口老齡化日益加重的今天,CAVD已成為社會(huì)和家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此,深入研究CAVD發(fā)病過程中的細(xì)胞和分子機(jī)制非常重要。既往CAVD曾被認(rèn)為是隨機(jī)體老化發(fā)生的退行性病變。而近年來(lái),對(duì)CAVD的進(jìn)一步研究表明它是一種涉及脂質(zhì)沉積,炎癥反應(yīng),磷酸鹽信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)的成骨過程。而瓣膜間質(zhì)細(xì)胞的成骨性轉(zhuǎn)變被認(rèn)為是CAVD發(fā)病的主要機(jī)制。非編碼RNA是一類功能豐富、作用廣泛的調(diào)節(jié)元件,近期多項(xiàng)研究表明,多種micro RNA（mi RNA）參與調(diào)控骨形成及瓣膜鈣化的過程,但目前對(duì)于mi RNAs在鈣化性瓣膜疾病中的作用研究仍眾說紛紜,更多的mi RNAs在成骨細(xì)胞分化通路中的作用及機(jī)制尚需要進(jìn)一步的研究。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（long non-coding RNA,lnc RNA）是一類長(zhǎng)度超過200 nt的非編碼RNA,可以通過與DNA,蛋白及微小RNA相互作用,在表觀、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后等多個(gè)層面上參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及生理活動(dòng)調(diào)... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：124 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

正常和不同程度鈣化主動(dòng)脈瓣的超聲心動(dòng)圖表現(xiàn)

圖 1-3 鈣化相關(guān)標(biāo)志物在正常及不同程度鈣化主動(dòng)脈瓣中的表達(dá)A 和 B，qPCR 檢測(cè) OPN 和 Runx2 在正常及不同程度鈣化主動(dòng)脈瓣中 mRNA 水平的表達(dá)； C，WB 檢測(cè) OPN 和 Runx2 在正常及不同程度鈣化瓣膜中蛋白水平的表達(dá)；D，以 β-actin 為內(nèi)參，通過灰度值測(cè)定法量化分析各組組織中OPN和Runx2的表達(dá)量差異。* 即 P < 0.05，** 即 P < 0.01，提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

如圖 1-3 所示，通過 qPCR 和 WB 可以在鈣化瓣膜中檢測(cè)到成骨標(biāo)志物 OPN 和 Runx2 的升高表達(dá)。(三) 成骨相關(guān) miRNA 的差異表達(dá)miRNA 作為重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子，可參與調(diào)控多種生理和病理過程。隨著研究深入，許多 miRNA 被報(bào)道在調(diào)節(jié)骨髓基質(zhì)細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞成骨分化中起重要作用，包括 miR-21，miR-22，miR-148a，miR-204，miR-10 和 miR-125b等[4-8]。我們之前也曾證實(shí) miR-22 是人牙周膜干細(xì)胞成骨分化的重要正調(diào)節(jié)因子。為了檢測(cè)這些成骨相關(guān) miRNA 在主動(dòng)脈瓣鈣化過程中的差異表達(dá)譜，我們通過實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)小樣本 CAVD 患者（n = 5）及正常對(duì)照組（n = 5）中這些 miRNA 的表達(dá)，結(jié)果如圖 1-4 所示，與正常對(duì)照組相比，miR-21，miR-22和 miR-125a/b 的表達(dá)在鈣化的主動(dòng)脈瓣膜組織中顯著增加，而 miR-10，miR-214和 miR-204 顯著降低，其中 miR-22 的差異表達(dá)最為顯著。因此，我們將進(jìn)一步在所有瓣膜組織樣本中對(duì) miR-22 進(jìn)行檢測(cè)。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]微小RNA-451靶向調(diào)節(jié)鈣結(jié)合蛋白39對(duì)MSCs成骨分化的促進(jìn)效應(yīng)[J]. 康夏,康菲,楊波,郭洪峰,權(quán)毅,董世武.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2013(09)



本文編號(hào)：2915323