近年來心絞痛、急性心肌梗死等缺血性心臟病(ischemic heart disease)的發(fā)病率居高不下。溶栓、早期經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療(percutaneous coronary intervention,PCI)等方法的廣泛應(yīng)用,使缺血的心臟能夠在短時(shí)間內(nèi)重新獲得血液灌注并恢復(fù)氧供,從而有利于病情的好轉(zhuǎn);然而再灌注有時(shí)反而會(huì)加重心臟的結(jié)構(gòu)及功能障礙,這種現(xiàn)象稱為心肌缺血再灌注損傷(myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI),臨床中可表現(xiàn)為惡性心律失常、心功能不全甚至猝死等情況,嚴(yán)重危害患者健康。因此,MIRI一直是心血管醫(yī)療工作者關(guān)注的焦點(diǎn)話題之一。如何使再灌注治療在盡早恢復(fù)缺血冠脈血流的同時(shí),盡可能地減少再灌注損傷,已經(jīng)成為了冠心病,特別是急性心肌梗死治療中亟待解決的關(guān)鍵問題。MIRI是多種因素共同參與的復(fù)雜過程,線粒體膜通透性改變、鈣超載或鈣再分布、氧自由基生成、補(bǔ)體系統(tǒng)激活等機(jī)制是形成MIRI的重要原因。其中,線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換孔(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)與ATP敏感性鉀通道(ATP sensitive potassium channel,K_(ATP))均與缺血再灌注這一過程緊密相連。K_(ATP)通道主要分為細(xì)胞膜K_(ATP)(sarcolemmal K_(ATP))通道和線粒體K_(ATP)(mitochondrial K_(ATP),mitoK_(ATP))通道。mPTP開放導(dǎo)致的線粒體膜通透性改變是缺血再灌注時(shí)各種損傷的匯聚點(diǎn),而mitoK_(ATP)通道的開放則可以通過逆轉(zhuǎn)鈣超載、穩(wěn)定細(xì)胞膜等機(jī)制減少M(fèi)IRI,發(fā)揮心肌保護(hù)作用;并且mitoK_(ATP)通道的開放可以抑制mPTP開放,從而阻斷mPTP下游凋亡蛋白酶激活的級(jí)聯(lián)反應(yīng),抑制心肌細(xì)胞凋亡。C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein,CRP)是最先發(fā)現(xiàn)的一種急性時(shí)相蛋白,由于其能在鈣離子存在時(shí)與肺炎球菌C型多糖發(fā)生沉淀反應(yīng)而得名。生理?xiàng)l件下體內(nèi)的CRP含量非常低,當(dāng)出現(xiàn)急性炎癥或組織損傷時(shí),CRP濃度急劇升高,因此CRP最早主要用于檢測(cè)和評(píng)估急性損傷與炎癥的發(fā)展程度。上世紀(jì)80年代,有研究發(fā)現(xiàn)CRP增高可以預(yù)測(cè)未來發(fā)生冠狀動(dòng)脈事件的幾率,從而引起了廣大醫(yī)生特別是心血管內(nèi)科醫(yī)生的高度關(guān)注。隨后,許多大型流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)研究支持CRP成為動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病以及缺血性腦卒中等心腦血管疾病發(fā)生、發(fā)展強(qiáng)有力的預(yù)測(cè)因子。不僅如此,越來越多的研究表明,CRP可能直接參與了動(dòng)脈粥樣硬化的形成、發(fā)展和演變以及缺血再灌注損傷的過程。然而,CRP作為干預(yù)因子,對(duì)心肌缺血再灌注這一過程的影響至今少有研究,其發(fā)生機(jī)制尚不完全清楚。此外,如前所述,mPTP與mitoK_(ATP)通道是缺血再灌注發(fā)生過程中的兩個(gè)重要的相關(guān)作用位點(diǎn)。mitoK_(ATP)開放劑二氮嗪(diazoxide)與mPTP阻斷劑環(huán)孢菌素A(cyclosporin A,CsA)均可以減少M(fèi)IRI的發(fā)生,而CRP與缺血再灌注時(shí)mitoK_(ATP)、mPTP的關(guān)系目前尚不知曉。通過對(duì)上述問題的研究,有可能為日后減少心肌缺血再灌注損傷的發(fā)生提供新的治療靶點(diǎn),從而使更多的患者從再灌注治療中獲益。其次,細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、Jun N端激酶/應(yīng)激活化的蛋白激酶(Jun N-terminal kinase/Stress Activated Protein Kinase,JNK/SAPK)和磷脂酰肌醇-3-激酶/絲氛酸-蘇氨酸蛋白激酶(Phosphatidyl Inositol 3-kinase/serine-threonine kinase,P13K/Akt)通路是機(jī)體內(nèi)重要的信號(hào)傳導(dǎo)通路,均與缺血再灌注這一過程緊密相關(guān)。發(fā)生心肌缺血再灌注損傷時(shí)CRP對(duì)上述通路有何種影響的相關(guān)報(bào)道尚少。通過對(duì)此問題的研究,可以幫助我們較為深入地探討CRP影響心肌缺血再灌注損傷的作用機(jī)制,以便為減少缺血再灌注損傷提供充分的理論基礎(chǔ)。另外,他汀類藥物在冠心病的治療中占據(jù)重要地位,其除了具有降低血脂的作用以外,還可以發(fā)揮獨(dú)立于降脂作用之外的效應(yīng),如抑制炎癥反應(yīng)、改善內(nèi)皮功能、穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣斑塊等。缺血再灌注損傷與他汀多效性均為本課題組多年來的研究領(lǐng)域。證據(jù)表明,病理水平的CRP能夠直接參與動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程,我們預(yù)測(cè)CRP亦可能會(huì)促進(jìn)心肌缺血再灌注損傷的發(fā)生,如果此結(jié)論被證實(shí),則降低CRP水平即可減少缺血再灌注損傷,因而能夠?yàn)闇p少缺血再灌注損傷提供新的治療靶點(diǎn)。雖然目前尚無CRP特異性阻斷劑廣泛應(yīng)用于臨床,但已有一些相關(guān)的基礎(chǔ)研究與臨床研究顯示,阿司匹林、他汀等藥物均可以降低CRP水平。如JUPITER大型臨床研究表明,對(duì)于CRP水平升高的患者,使用他汀類藥物能夠在大幅降低低密度脂蛋白的同時(shí)顯著降低CRP水平,從而減少心血管事件的發(fā)生。我們課題組在前期研究中發(fā)現(xiàn),他汀類藥物能夠通過活化mitoK_(ATP)通道、減少活性氧生成和鈣超載,進(jìn)而抑制mPTP的開放等機(jī)制減輕心肌缺血再灌注損傷。本課題亦將探討阿托伐他汀(atorvastatin,Ator)對(duì)CRP參與后的心肌缺血再灌注損傷如何發(fā)揮心肌保護(hù)作用。為此,我們擬應(yīng)用SD新生乳鼠原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞建立體外氧糖剝奪再灌注模型,通過比較發(fā)生缺血再灌注時(shí)有無CRP干預(yù)后心肌細(xì)胞活力及乳酸脫氫酶(LDH)活性水平等指標(biāo)的變化,明確CRP對(duì)心肌缺血再灌注損傷的影響。同時(shí),通過對(duì)氧糖剝奪再灌注時(shí)加用mitoK_(ATP)通道開放劑二氮嗪或mPTP阻斷劑環(huán)孢菌素A后心肌細(xì)胞mPTP開放程度、線粒體膜電位水平等指標(biāo)的變化,了解CRP與mitoK_(ATP)及mPTP的關(guān)系,并探討CRP對(duì)相關(guān)信號(hào)通路的影響機(jī)制,從而為早日研究出CRP特異性阻斷劑提供研究基礎(chǔ)。此外,通過觀察在CRP干預(yù)的基礎(chǔ)上加用阿托伐他汀共同處理后上述指標(biāo)的變化,明確他汀類藥物對(duì)CRP介導(dǎo)的心肌缺血再灌注損傷能否發(fā)揮同樣的心肌保護(hù)作用,從而在臨床工作中為高CRP人群減少缺血再灌注損傷的治療方案提供更為充足的理論依據(jù)。第一部分C反應(yīng)蛋白對(duì)SD大鼠原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注的影響目的:研究作為刺激因子的C反應(yīng)蛋白能否加重模擬體內(nèi)缺血再灌注損傷過程的原代培養(yǎng)心肌細(xì)胞的氧糖剝奪再灌注損傷。方法:選擇出生1-2天的SD大鼠,通過建立氧糖剝奪再灌注損傷模型模擬體內(nèi)的心肌缺血再灌注損傷,心肌細(xì)胞進(jìn)行氧糖剝奪3h,再灌注1h。CRP使用濃度的確定:以往的研究中使用的C反應(yīng)蛋白濃度通常在5μg/mL至50μg/mL之間。因此,我們測(cè)試了不同CRP作用濃度對(duì)缺血再灌注的影響。通過MTS測(cè)定表明,在氧糖剝奪前給予10ug/mL的CRP進(jìn)行預(yù)處理,即可以明顯加重心肌缺血再灌注損傷。新生SD大鼠原代培養(yǎng)的心肌細(xì)胞隨機(jī)分組如下:1.control組:使用含10%FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基,在37℃、5%CO_2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的原代心肌細(xì)胞。2.OGD/R組:給予氧糖剝奪3h,再灌注1h。3.CRP+OGD/R組:先向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入10μg/mL的CRP孵育24h,再進(jìn)行OGD/R。進(jìn)行OGD/R后,通過MTS檢測(cè)細(xì)胞活力,通過比色測(cè)定法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH漏出率,以了解心肌受損程度。采用鈣黃綠素-AM(calcein/AM)和氯化鈷(CoCl_2)共同孵育法及激光掃描共聚焦顯微鏡(laser scanning confocal microscopy,LSCM)技術(shù),測(cè)定各指標(biāo)干預(yù)下的mPTP開放程度;采用四甲基羅丹明乙酯Tetramethylrhodamine ethylester(TMRE)孵育法及LSCM技術(shù)測(cè)定線粒體膜電位水平的變化。結(jié)果:1.CRP干預(yù)對(duì)氧糖剝奪再灌注時(shí)心肌細(xì)胞活力的影響通過MTS檢測(cè)心肌細(xì)胞活力,每個(gè)組別以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。經(jīng)過OGD/R處理后,心肌細(xì)胞活力可下降至82.36%±6.18%(P=0.0031)。此外,與OGD/R組相比,CRP預(yù)處理組可進(jìn)一步顯著降低心肌細(xì)胞活力,達(dá)到了對(duì)照組的64.84%±4.06%(P=0.0007)。2.CRP干預(yù)對(duì)心肌細(xì)胞LDH水平的影響與control組比較,OGD/R組心肌細(xì)胞上清液中的LDH水平明顯上升(95.10 U/L±21.57 U/L versus 145.30 U/L±16.06 U/L,P=0.0319)。而給予CRP預(yù)處理后,LDH數(shù)值進(jìn)一步升高(208.20 U/L±19.23 U/L),其差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0122)。3.CRP干預(yù)對(duì)mPTP開放程度的影響每組以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。與control組相比,OGD/R組心肌細(xì)胞綠色熒光強(qiáng)度明顯減弱(60.93%±2.82%,P0.0001)。給予CRP干預(yù)的OGD/R組的熒光強(qiáng)度則進(jìn)一步顯著下降(33.08%±3.48%,P0.0001)。4.CRP干預(yù)對(duì)線粒體膜電位的影響每組以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。OGD/R組心肌細(xì)胞紅色熒光強(qiáng)度(57.26%±2.95%)明顯低于control組,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。而給予CRP干預(yù)后,其熒光強(qiáng)度進(jìn)一步顯著減弱(33.31%±2.03%,P0.0001)。結(jié)論:1.CRP的干預(yù)明顯降低了OGD/R后的心肌細(xì)胞活力。2.CRP的干預(yù)增加了OGD/R后細(xì)胞培養(yǎng)液中的LDH水平。3.CRP的干預(yù)使OGD/R時(shí)mPTP開放程度增加。4.CRP的干預(yù)明顯降低了OGD/R時(shí)的線粒體膜電位水平。5.CRP加重了心肌細(xì)胞的氧糖剝奪再灌注損傷。第二部分C反應(yīng)蛋白與氧糖剝奪再灌注損傷發(fā)生時(shí)mitoK_(ATP)、mPTP通道的關(guān)系及對(duì)信號(hào)通路的影響目的:探討CRP與發(fā)生心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷時(shí)mitoK_(ATP)、mPTP通道的關(guān)系,并探討CRP對(duì)于心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注相關(guān)信號(hào)通路的影響,即了解CRP加重心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷的可能機(jī)制。方法:從新生SD大鼠分離并培養(yǎng)原代心肌細(xì)胞,建立氧糖剝奪再灌注模型。心肌細(xì)胞進(jìn)行氧糖剝奪3h,再灌注1h。新生大鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)分組如下:1.control組:使用含10%FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基,在37℃、5%CO_2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的原代心肌細(xì)胞。2.OGD/R組:給予氧糖剝奪3h,再灌注1h。3.CRP+OGD/R組:先向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入10μg/mL的CRP孵育24h,再進(jìn)行OGD/R。4.CRP+CsA+OGD/R組:培養(yǎng)的心肌細(xì)胞先與10μg/mL的CRP共同孵育24h,然后進(jìn)行3h的OGD。在再灌注開始時(shí),加入10μM的環(huán)孢菌素A與心肌細(xì)胞孵育20min,繼續(xù)再灌注共1h。5.CRP+Diazoxide+OGD/R組:培養(yǎng)的心肌細(xì)胞先與10μg/mL的CRP共同孵育24h,在進(jìn)行OGD/R前,加入100μM的二氮嗪共同孵育90分鐘,再進(jìn)行OGD/R。進(jìn)行OGD/R后,通過MTS檢測(cè)細(xì)胞活力,通過比色測(cè)定法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH漏出率,以了解心肌受損程度。采用calcein/AM和CoCl_2共同孵育法及LSCM技術(shù),測(cè)定各指標(biāo)干預(yù)下的mPTP開放程度;采用TMRE孵育法及LSCM技術(shù)測(cè)定線粒體膜電位水平的變化。前三組通過Western blot法檢測(cè)ERK、JNK等蛋白表達(dá)水平的變化,探討與CRP介導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷相關(guān)的信號(hào)通路。結(jié)果:1.環(huán)孢菌素A與二氮嗪對(duì)CRP介導(dǎo)的心肌細(xì)胞活力下降的影響通過MTS分析法測(cè)定心肌細(xì)胞的活力。每個(gè)組別以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。CRP干預(yù)后的OGD/R組的MTS值比OGD/R組進(jìn)一步下降(64.84%±4.06%)。而給予環(huán)孢菌素A或二氮嗪預(yù)處理后,MTS值均有了顯著增高(分別為91.30%±5.18%,92.63%±5.74%);與CRP+OGD/R組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.0001)。2.環(huán)孢菌素A與二氮嗪對(duì)CRP介導(dǎo)的LDH水平增高的影響CRP+OGD/R組的LDH水平較OGD/R組明顯增高(208.20U/L±19.23U/L versus 145.30 U/L±16.06 U/L,P=0.0122)。而預(yù)先給予環(huán)孢菌素A或二氮嗪處理后,均能夠顯著降低LDH水平(分別為92.72U/L±17.56U/L,93.37U/L±23.99U/L,P值分別為0.0015,0.0029)。3.環(huán)孢菌素A與二氮嗪對(duì)CRP介導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注mPTP開放程度增加的影響每組以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。OGD/R組心肌細(xì)胞的熒光強(qiáng)度較control組減弱,而CRP干預(yù)后其熒光強(qiáng)度進(jìn)一步下降(33.08%±3.48%)。然而,在上述CRP介導(dǎo)的OGD/R的基礎(chǔ)上加入了環(huán)孢菌素A或二氮嗪,均可以使熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)(分別為:85.09%±4.11%,81.17%±4.13%,P0.0001)。4.環(huán)孢菌素A與二氮嗪對(duì)CRP介導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注時(shí)線粒體膜電位下降的影響每組以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。CRP+OGD/R組的熒光強(qiáng)度明顯減弱(33.31%±2.03%)。而事先給予環(huán)孢菌素A或二氮嗪預(yù)處理后,均可明顯增加熒光強(qiáng)度(分別為77.35%±2.38%,72.26%±2.45%,P0.0001)。4.CRP對(duì)發(fā)生心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注時(shí)信號(hào)通路的影響通過Western Blot分析法檢測(cè)ERK1/2、JNK等信號(hào)通路相關(guān)的蛋白表達(dá)水平。CRP干預(yù)后磷酸化ERK1/2和總ERK1/2水平均顯著升高,其中又以磷酸化ERK增加的幅度更具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(93.53%±1.94%和170.4%±3.00%,P0.0001)。然而,與OGD/R組相比,在經(jīng)過CRP干預(yù)后,p38MAPK和JNK的表達(dá)水平?jīng)]有顯著變化。結(jié)論:1.mPTP抑制劑環(huán)孢菌素A及mitoK_(ATP)通道開放劑二氮嗪能夠抵消CRP引起的上述變化,證明mPTP和mitoK_(ATP)都參與了CRP介導(dǎo)的心肌氧糖剝奪再灌注損傷。2.CRP能夠通過激活ERK加重心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷。第三部分阿托伐他汀對(duì)C反應(yīng)蛋白介導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷的心肌保護(hù)作用及機(jī)制探討目的:研究阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)CRP介導(dǎo)的原代SD大鼠心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷是否具有保護(hù)作用及其可能的發(fā)生機(jī)制。方法:從新生SD大鼠分離并培養(yǎng)原代心肌細(xì)胞,建立氧糖剝奪再灌注模型。心肌細(xì)胞進(jìn)行氧糖剝奪3h,再灌注1h。隨機(jī)分為以下幾組:1.control組:使用含10%FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基,在37℃、5%CO_2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)的原代心肌細(xì)胞。2.OGD/R組:給予氧糖剝奪3h,再灌注1h。3.CRP+OGD/R組:先向細(xì)胞培養(yǎng)液中加入10μg/mL的CRP孵育24h,再進(jìn)行OGD/R。4.Ator+CRP+OGD/R組:培養(yǎng)的心肌細(xì)胞先與1μM的阿托伐他汀孵育3h,再與10μg/mL的CRP共同孵育24h,然后再進(jìn)行OGD/R。進(jìn)行OGD/R后,通過MTS檢測(cè)細(xì)胞活力,通過比色測(cè)定法測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)液中LDH漏出率,以了解心肌受損程度。采用calcein/AM和CoCl_2共同孵育法及LSCM技術(shù),測(cè)定各指標(biāo)干預(yù)下的mPTP開放程度;采用TMRE孵育法及LSCM技術(shù)測(cè)定線粒體膜電位水平的變化。通過Western blot法檢測(cè)ERK、Akt、JNK等蛋白表達(dá)水平的變化,結(jié)果:1.Ator預(yù)處理對(duì)CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)心肌細(xì)胞活力的影響每組以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。與CRP+OGD/R組相比,加用Ator預(yù)處理后明顯增加了心肌細(xì)胞活力(64.84%±4.06%versus98.61%±5.01%,P0.0001)。2.Ator預(yù)處理對(duì)CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)LDH水平的影響CRP干預(yù)后的OGD/R組的LDH水平(208.20U/L±19.23U/L)較control組(95.10U/L±21.57U/L)、單純OGD/R組(145.30U/L±16.06U/L)均明顯升高。加用Ator預(yù)處理后則可以使LDH水平顯著下降(94.35U/L±14.83U/L),與CRP+OGD/R組相比,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.0013)。3.Ator預(yù)處理對(duì)CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)mPTP開放程度的影響每組以所測(cè)結(jié)果與control組相比的百分?jǐn)?shù)表示。OGD/R組熒光強(qiáng)度低于control組,CRP+OGD/R組熒光強(qiáng)度又比OGD/R組進(jìn)一步下降。而事先給予Ator干預(yù)后的熒光強(qiáng)度明顯高于CRP+OGD/R組(92.74%±2.47%versus 33.08%±3.48%,P0.0001)。4.Ator預(yù)處理對(duì)CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)線粒體膜電位的影響各個(gè)實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)以所測(cè)得的紅色熒光強(qiáng)度與control組熒光強(qiáng)度的百分?jǐn)?shù)來表示。與OGD/R組相比,CRP干預(yù)后的熒光強(qiáng)度進(jìn)一步減弱(33.31%±2.03%)。而在此基礎(chǔ)上加用Ator干預(yù),則抵消了上述CRP的影響,即熒光強(qiáng)度顯著增高(84.00%±2.31%,P0.0001)。Ator預(yù)處理抑制了CRP介導(dǎo)的線粒體膜電位的下降。5.Ator預(yù)處理對(duì)CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)信號(hào)通路的影響通過Western Blot分析法檢測(cè)各個(gè)干預(yù)組ERK1/2、Akt、JNK等信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。與單純CRP介導(dǎo)的OGD/R組相比,加用Ator預(yù)處理后可以使Akt表達(dá)明顯增加(122.7%±5.30%versus 184.2%±6.96%,P=0.0003)。此外,與單純CRP介導(dǎo)的OGD/R組相比,加入Ator可以使ERK和磷酸化ERK表達(dá)水平均降低,其中又以對(duì)磷酸化ERK的影響更為顯著。綜上所述,Ator能夠激活A(yù)kt信號(hào)通路及降低磷酸化ERK表達(dá)水平。結(jié)論:1.Ator預(yù)處理增加了CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)的心肌細(xì)胞活力,具有心肌保護(hù)作用。2.Ator預(yù)處理明顯減少了CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)的LDH水平。3.Ator預(yù)處理降低了CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)的mPTP開放程度。4.Ator預(yù)處理增加了CRP介導(dǎo)的OGD/R發(fā)生時(shí)的線粒體膜電位水平。5.Ator通過激活A(yù)kt及減少ERK表達(dá)而發(fā)揮對(duì)CRP介導(dǎo)的心肌細(xì)胞氧糖剝奪再灌注損傷的心肌保護(hù)作用。
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R542.22
【部分圖文】：

圖 1 本部分的實(shí)驗(yàn)方案OGD/R：氧糖剝奪再灌注；CRP：C 反應(yīng)蛋白Fig.1 The experimental program in this section. OGD/R: oxygen-glucodeprivation/ reoxygenation. CRP: C- reactive protein.

圖 2 不同時(shí)期新生 SD 大鼠心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察(A)差速貼壁后；(B)培養(yǎng) 24 小時(shí)；(C)培養(yǎng) 48 小時(shí)；(D)培養(yǎng) 72 小時(shí)Fig.2 The morphological observation of myocardial cells in newborn SD ratsat different times. (A) After differential attachment. (B) After 24h. (C) After

圖 3 采用 α-actin 免疫組化法鑒定心肌細(xì)胞ells were identified by α-actin immunohistochemistry
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