目的:通過檢測房顫患者射頻消融術(shù)前及術(shù)后血清纖維化標志物水平,從而探討與房顫發(fā)生和房顫射頻消融術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)的纖維化指標的臨床價值;檢測纖維化重要標志物轉(zhuǎn)化生長因子β1(Transforming Growth Factor beta 1,TGF-β1)基因rs1800468、rs1800469單核苷酸多態(tài)性(Single Neucleotide Polymorphism,SNP),探索這兩個多態(tài)性位點與房顫的相關(guān)性;以房顫HATCH評分為因變量,以TGF-β1、Ⅰ型膠原C末端肽(C-telopeptide of TypeⅠCollagen,ⅠCTP)、III型前膠原N末端肽(Precollagen type III,P IIIP N-P)、透明質(zhì)酸(Hyaluronic Acid,HA)、層粘連蛋白(Laminin,LN)為自變量建立基于纖維化標志物血清學(xué)水平的HATCH評分的評分參數(shù)模型,并驗證其對房顫射頻消融術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測價值。方法:采用病例-對照研究收集標本,正常對照組100例和病例組108例;采集研究對象的一般臨床資料,根據(jù)患者術(shù)后3個月內(nèi)房顫是否復(fù)發(fā),將病例組分為房顫復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組,并檢測術(shù)前及術(shù)后TGF-β1、ⅠCTP、P IIIP N-P、HA、LN等主要纖維化標志物的血清水平,應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS22.0繪制ROC曲線,通過ROC曲線下面積(AUC)、95%CI、P值等參數(shù)來評價TGF-β1、ⅠCTP、P IIIP N-P、HA、LN對房顫的診斷價值;計算HATCH評分分值并將其與各纖維化相關(guān)標志物的血清水平進行相關(guān)性回歸分析,建立HATCH評分參數(shù)模型并進行驗證;運用聚合酶鏈反應(yīng)對TGF-β1基因rs1800468和rs1800469多態(tài)性位點進行擴增并測序,采用非條件Logstic回歸分析來比較rs1800468、rs1800469位點的基因多態(tài)性與房顫的易感性,及其基因型與房顫患病風(fēng)險、TGF-β1血清水平、HATCH評分的相關(guān)性。結(jié)果:與對照組相比,房顫組術(shù)前TGF-β1和ⅠCTP水平上均明顯升高且在兩組間具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);房顫組TGF-β1水平在術(shù)后高于術(shù)前,而ⅠCTP在術(shù)后低于術(shù)前,均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);房顫復(fù)發(fā)組與未復(fù)發(fā)組在年齡、總手術(shù)時間、造影劑用量、LAD、LVEDD、BNP、cTn I、CRP及術(shù)前TGF-β1、ⅠCTP、HA、LN、P IIIP N-P、HATCH評分水平上有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);復(fù)發(fā)組TGF-β1水平在術(shù)后明顯高于術(shù)前,且具有統(tǒng)計學(xué)差異(p0.05);在兩個位點基因型組合分析中,房顫組和對照組均以雙雜合突變基因型GA/CT比例最大;與攜帶雙野生型GG/CC的個體比較,雙純合突變基因型組合AA/TT的個體在房顫組與對照組間的分布具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);房顫二元Logistic回歸分析中,發(fā)現(xiàn)年齡、TGF-β1、ⅠCTP是房顫患病的危險因子,HA、LN、P IIIP N-P是房顫的保護性因子;TGF-β1基因rs1800468和rs1800469位點的多態(tài)性與房顫發(fā)病相關(guān);TGF-β1水平在TGF-β1基因rs1800468(F=4.596,P=0.008)、rs1800469(F=5.756,P=0.002)位點各基因型間表達有統(tǒng)計學(xué)意義,且兩者的血清水平均從雜合子突變到純合子突變逐步增高;ROC曲線中TGF-β1的曲線下面積最大為0.950,它對房顫的診斷價值最大;最終建立基于TGF-β1、ⅠCTP、HA、LN、PIIIP N-P的回歸方程:HATCH評分=0.026TGF-β1+0.013ⅠCTP-0.054HA-0.028LN-0.032 PIIIP N-P-0.674,并進行驗證。結(jié)論:1.TGF-β1、ⅠCTP血清學(xué)水平可作為房顫的輔助診斷指標,其中以TGF-β1對房顫的輔助診斷價值最大,TGF-β1、ⅠCTP、HA、LN和PIIIP N-P血清水平可作為房顫射頻消融術(shù)后復(fù)發(fā)的預(yù)測指標。2.rs1800468、rs1800469多態(tài)性與房顫的易感性相關(guān),-800A/-509T與房顫的發(fā)生和血清TGF-β1的表達水平相關(guān)。3.構(gòu)建基于TGF-β1、ⅠCTP、HA、LN、PIIIP N-P血清水平值計算的HATCH評分參數(shù)模型:HATCH評分=0.026TGF-β1+0.013ⅠCTP-0.054HA-0.028LN-0.032PIIIP N-P-0.674。此參數(shù)模型可作為評估房顫射頻消融術(shù)后復(fù)發(fā)的輔助指標。
【學(xué)位單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R541.75
【部分圖文】：

圖 1-1 TGF-β1 標準曲線Figue 1-1 The standard line of TGF-β1表 1-2 ⅠCTP 標準品濃度及相應(yīng)光密度值Tab. 1-2: The standard concentration and its optical density of ⅠCTP準品 1 2 3 4 5 6D 值 0.043 0.099 0.181 0.359 0.873 1.663度（ng/ml） 25 50 100 200 400 800

圖 1-1 TGF-β1 標準曲線Figue 1-1 The standard line of TGF-β1表 1-2 ⅠCTP 標準品濃度及相應(yīng)光密度值Tab. 1-2: The standard concentration and its optical density of ⅠCTP準品 1 2 3 4 5 6D 值 0.043 0.099 0.181 0.359 0.873 1.663度（ng/ml） 25 50 100 200 400 800

充分混勻，放入微波爐，中加入 10μl 4S Green 核酸染液模具中，避免產(chǎn)生氣泡，使，梳齒下緣應(yīng)與膠槽模具底后，小心去除加樣梳，倒入電泡應(yīng)盡量去掉。CR 產(chǎn)物加入點樣孔底部，加樣時槍頭不要觸碰加樣孔的后立即接通電源，樣品因攜帶小時左右，停止電泳。像儀中觀察凝膠中的特異性段，記錄并分析結(jié)果。rker：600bp，電泳圖見圖 1-
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本文編號：2879786