發(fā)布時間：2020-10-16 11:28

　　 目的:目前冠心病是世界范圍主要的死亡原因。及時有效地恢復(fù)心肌灌注是挽救缺血心肌的基本措施,但其同時也會導(dǎo)致心肌的進一步損傷,即心肌缺血再灌注損傷,其臨床上主要表現(xiàn)為再灌注心律失常、心肌梗死面積擴大和心功能降低等。因此,如何有效地減輕缺血再灌注損傷,是臨床上需要迫切解決的一個問題。維生素C,又名L-抗壞血酸,其具有抗氧化性及酸性兩個特性,在臨床上廣泛應(yīng)用,其能減輕氧自由基對人體的傷害,但針對于其是否能夠減輕缺血再灌注時氧自由基的爆發(fā)來發(fā)揮心肌保護作用的相關(guān)研究較少。本研究通過給予缺血再灌注大鼠模型維生素C后處理,觀察其是否存在保護作用,并試圖從再灌注期間細胞內(nèi)環(huán)境紊亂及細胞凋亡兩方面探究其可能的相關(guān)機制。方法:健康雄性SD大鼠48只,體重280-320g,通過結(jié)扎冠狀動脈前降支,制作缺血再灌注模型,隨機分為4組,每組12只:假手術(shù)組(sham組)、缺血再灌注組(I/R組)、維生素C后處理組(VC組)、鹽酸后處理組(HCl組)(PH值與VC組相同,均為2.5)。Powerlab多道生理記錄儀記錄各時間點的心電圖和心功能指標:心率(HR)、左心室舒張末壓(LVEDP)、左心室收縮壓(LVSP)、左心室壓力最大變化速率(±dp/dtmax)。TBR4100氣體信號分子和自由基檢測儀記錄再灌注后1小時內(nèi)心肌內(nèi)活性氧H_2O_2,氣體信號分子NO的濃度變化情況。再灌結(jié)束后,測定血清中乳酸脫氫酶(LDH)、超氧岐化酶(SOD)活性;TTC染色法計算心肌梗死面積,心臟冷凍切片后行HE染色觀察細胞結(jié)構(gòu)變化;Western Blot檢測相關(guān)凋亡蛋白的表達。本實驗數(shù)據(jù)均為計量資料,以均數(shù)±標準差(~_x±SD)表示。多組間比較,采用單因素方差(ANOVA)分析,方差齊時選用LSD檢驗,方差不齊時選用Tamhane,s T2檢驗以P0.05為差異有統(tǒng)計學意義;H_2O_2,氣體信號分子NO變化數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析,以P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:在血流動力學方面:各組各時間點HR(除1min外),LVEDP指標比較無統(tǒng)計學差異(P0.05);給予VC后處理后,VC組較I/R組在缺血再灌注后各時間點的±dp/dtmax、LVSP均有顯著的升高(P0.05);HCL組在缺血再灌注早期1min、30min時LVSP有顯著升高(P0.05),1min時+dp/dtmax有顯著升高(P0.05)。血清酶學方面:給予VC后處理后,VC組(305.54±46.56 U/L)的血清LDH含量較I/R組(374.66±21.44 U/L)出現(xiàn)顯著降低(P0.05),HCL組(366.05±37.67 U/L)的血清LDH含量則無明顯降低(P0.05);VC組(566.67±62.46 U/L)血清SOD的濃度較I/R組(433.00±61.34U/L)顯著升高(P0.05),HCL組(382.67±35.93 U/L)血清SOD的濃度無明顯改變(P0.05)。VC組(21.38±2.74%)心肌梗死面積較I/R組(41.65±2.62%)顯著減少(P0.05),HCl組(36.80±2.41%)組心肌梗死面積有部分減少,但無統(tǒng)計學差異(P0.05)。在細胞形態(tài)學方面:給予VC后處理后,心肌纖維的排列結(jié)構(gòu)及腫脹程度,及炎癥細胞浸潤程度,及壞死灶大小方面有明顯的減輕。而給予HCL后處理后心肌損傷程度較I/R有一定程度減輕,但較VC組減輕程度較弱。各組缺血再灌注心肌中的H_2O_2及NO結(jié)果示:較Sham組I/R組中的心肌H_2O_2含量隨時間變化出現(xiàn)了明顯的升高(P0.05);與I/R組相比,VC組及HCL組再灌注后心肌的H_2O_2含量顯著降低(P0.05),但HCL組較VC組心肌的H_2O_2含量仍較高(P0.05)。較Sham組I/R組心肌的NO含量隨時間變化出現(xiàn)了明顯的降低(P0.05);較I/R組VC組再灌注后心肌的NO含量降低幅度顯著下降(P0.05),甚至較缺血前NO含量有所升高,而HCL組中心肌NO含量無明顯變化(P0.05)。凋亡蛋白方面:同Sham組相比,I/R組、VC組、HCL組中Bax、BCl-2、Caspase-9、Cyto-C、P-ERK表達顯著增多(P0.05),Bcl-2/Bax比值明顯降低(P0.05)。與I/R組相比,VC組中Bax、Caspase-9、Cyto-C、P-ERK的表達均明顯減少(P0.05),Bcl-2表達及Bcl-2/Bax比值明顯增加(P0.05);HCL組中的Bax、BCl-2、Caspase-9、Cyto-C的表達及Bcl-2/Bax比值無明顯變化(P0.05),P-ERK表達明顯減少(P0.05),但相較HCL組VC組的P-ERK表達差異更顯著。結(jié)論:維生素C后處理可能通過直接抑制氧自由基的爆發(fā)、提高心肌NO濃度、間接抑制PH值反常、鈣離子超載來改善內(nèi)環(huán)境紊亂對心肌的直接損害,并抑制凋亡ERK信號通路,下調(diào)Cyto-C、Bax、Caspase-9的表達,上調(diào)Bcl-2凋亡蛋白表達及提高Bcl-2/Bax的比值抑制缺血再灌注中心肌細胞凋亡來減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷;其保護作用主要與其抗氧化作用相關(guān),與其弱酸性有一定的相關(guān)性。
【學位單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：R541.4
【部分圖文】：

圖 1 缺血再灌注模型心電圖變化1 The changes of electrocardiogram on ischemia-reperfusi：The Fig.1.1 is the ECG before ischemia, The Fig.1.2 g ischemia, The Fig.1.3 is the ECG after reperfusion.

圖 1 缺血再灌注模型心電圖變化he changes of electrocardiogram on ischemia-reperfThe Fig.1.1 is the ECG before ischemia, The Fig.1chemia, The Fig.1.3 is the ECG after reperfusion.

圖 3 心肌 H2O2, NO 測量示意圖Fig.3 The schematic diagram of measurement tomyocardial H2O2, N
【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Intermittent hypoxia attenuates ischemia/reperfusion induced apoptosis in cardiac myocytes via regulating Bcl-2/Bax expression[J];Cell Research;2003年05期

本文編號：2843196