【摘要】：研究背景—微血栓是動脈血栓和心肌梗死發(fā)生發(fā)展中的重要起始環(huán)節(jié)。微血栓破壞微血管環(huán)境并增加了心衰、心律不齊和死亡的發(fā)生概率。血小板異常活化被認為是微血栓形成的首要因素。然而,血小板活化在缺血性微栓塞中的作用機制尚不清楚。哺乳動物雷帕霉素靶點(Mammalian target of rapamycin,m TOR)對于細胞的增殖和代謝十分重要,其主要通過活化AGC激酶,包括Akt,血清/糖皮質激素誘導蛋白激酶(Serum/glucocorticoid induced kinase,SGK)和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC),對營養(yǎng)物質、應激以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)產生應答,發(fā)揮功能。本研究中發(fā)現(xiàn)在缺血缺氧誘導的微栓塞中,Sin1作為m TORC2復合體中重要組分,正向調控整合素介導的信號通路以及低氧應答中的血小板活化。研究方法和結果—我們研究發(fā)現(xiàn)在收集的接受非體外循環(huán)心臟不停搏冠狀動脈旁路移植手術(off-pump coronary artery bypass grafting,OPCABG)的心�；颊唛]塞冠脈遠端的血小板內,m TORC2下游底物Akt S473位磷酸化水平顯著上調。并且Akt S473位上游重要調控分子Sin1 T86位磷酸化程度也呈較高水平。重要的是,在61例STEMI心梗病人的血小板內Sin1和Akt磷酸化水平上調的程度與PCI術后無復流事件的發(fā)生有較高的相關性(相對Akt S473磷酸化水平:OR值為3.62,95%置信區(qū)間為1.75-7.48,P0.01;相對Sin1 T86磷酸化水平:OR值為2.12,95%置信區(qū)間為1.30-3.46,P0.01)。由此,我們構建了血小板Sin1特異性敲除小鼠和Sin1 T86位磷酸化缺陷的小鼠,以研究心梗事件中血小板的活化機制。我們發(fā)現(xiàn)Sin1 T86位發(fā)生磷酸化可調控m TORC2介導的下游信號以及整合素αIIbβ3介導的外向內信號通路。在低氧狀態(tài)下,Sin1通過部分抑制SOD2和Sirt3的水平而調控血小板ROS的產生。更重要的是,在小鼠心臟左前降支結扎模型中,血小板Sin1缺失顯著地降低了小鼠心肌缺血所誘導的微血管栓塞和心臟功能障礙。研究結論—綜上所述,我們的研究首次揭示了Sin1在調控血小板活化中的關鍵作用。血小板Sin1可能是有效預防缺氧誘導的心肌梗死重要的潛在治療靶點。
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R54
【圖文】：

Figure 4. MP-Sin1-/-mice exhibited圖 4.巨核細胞/血小板 Sin1 缺失小鼠心梗后呈mTORC1/2 抑制劑 PP242 處理后的 Akt S473 和小板 Akt，Sin1，Rictor 和 mTOR 表達水平。（C）各組小鼠數(shù)目為 15 只。（D）MP-Sin1-/-和 Sin1況。（E）MP-Sin1-/-小鼠 LAD 手術后第三天的照組 Sin1f/f小鼠 (n=5, P<0.01)。（F）MP-Sin

Figure 6. Sin1 regulates platelet activation sign圖 6. Sin1 通過整合素介導的外向內信號途徑U46619 和 ADP 刺激下，Sin1 缺失的血小板聚集和 ADP 刺激下，Sin1f/f和 Sin1-/-血小板內 Akt SThrombin 刺激下，Sin1f/f與 Sin1-/-血小板結合血小板在固相纖維蛋白原上的鋪展。隨機選取血小板在 Thrombin 刺激下的栓塊收縮。分別在對栓塊收縮效率進行

Figure 7. Sin1 amplifies αIIbβ3-mediate圖7. Sin1調控放大αIIbβ3介導的Akt S473和PDK1 抑制劑 OSU03012 以及 Akt 抑制劑 MK2隨機選擇并拍攝三個血小板鋪展視野進行統(tǒng)計OSU03012 以及 MK2206 處理后，在固相纖維板鋪展視野進行統(tǒng)計分析。（C）經 DMSO、O以及人的血小板在鋪展狀態(tài)下 Akt S473

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 高京生;羅德成;田景亮;王仕軍;;缺氧復合肺微栓塞對大鼠肺含水量的影響[J];四川生理科學動態(tài);1987年01期

2 劉杰,張克勤,黃純全,王陸軍,張文賢,高京生,王仕軍;缺氧復合肺微栓塞對大鼠肺含水量的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;1988年05期

3 高京生;羅德成;田景亮;王仕軍;;缺氧復合肺微栓塞對大鼠肺含水量的影響[J];中國應用生理學雜志;1989年02期

4 朱海燕;沈洪;劉育英;劉秀華;徐菲菲;;動脈微栓塞組織血栓調節(jié)蛋白變化的實驗研究[J];中國全科醫(yī)學;2006年08期

5 張良惠,葛均波,錢菊英,張慶勇,羅忠池,汪源源,蔡

本文編號：2796900