【摘要】：目的:探究mi R-195和Smad7在急性Stanford A型主動脈夾層中的表達(dá),以及二者之間的相互作用對急性Stanford A型夾層發(fā)生的影響及其臨床意義。方法:選取12例術(shù)前經(jīng)主動脈CTA及術(shù)中情況診斷為急性Stanford A型主動脈夾層患者為夾層組,12例術(shù)前經(jīng)主動脈CTA及術(shù)中情況診斷為升主動脈瘤并接受Bentall手術(shù)、David手術(shù)或Wheat手術(shù)的患者為動脈瘤組,6例診斷冠心病并接受冠脈旁路移植術(shù)的患者為冠心病組。收集術(shù)中切除廢棄及中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院心臟外科標(biāo)本庫中的升主動脈壁組織,分別對其分別采取HE染色法、Masson染色法、免疫組化染色法、Wesern Blot法,比較三組主動脈壁組織形態(tài)學(xué)區(qū)別及TGF-β1、Smad7的表達(dá)。應(yīng)用q RT-PCR分別檢測三組主動脈壁組織中的mi R-195表達(dá)。應(yīng)用mi R-195、NC、下調(diào)的mi R-195、NC分別轉(zhuǎn)染人血管平滑肌細(xì)胞細(xì)胞株24h、48h后,鏡下觀察細(xì)胞生長情況,應(yīng)用Wesern Blot檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中TGF-β1、Smad7的表達(dá)。結(jié)果:動脈瘤組及夾層組的組織中,主動脈中膜排列紊亂,組織疏松,呈結(jié)節(jié)狀突入內(nèi)膜,細(xì)胞基質(zhì)多發(fā)黏液樣變性;主動脈夾層組織中可見多發(fā)彈力纖維斷裂,粘液樣變性嚴(yán)重,炎性細(xì)胞浸潤,膠原纖維增生顯著;冠心病組組織中膜結(jié)構(gòu)排列緊密,彈性纖維排列有序,無明顯彈性纖維增生,肌纖維正常連續(xù),主動脈機制無明顯黏液樣變性。TGF-β在動脈瘤組和夾層組組織中表達(dá)呈陽性,冠心病組低表達(dá)。Smad7在三組組織中均有表達(dá),且冠心病組中明顯高于動脈瘤組和夾層組。Western Blot半定量分析顯示,夾層組TGF-β1表達(dá)明顯高于冠心病組(P0.05),Smad7表達(dá)顯著低于冠心病組(P0.05)。mi R-195在動脈瘤組及夾層組較冠心病組明顯高表達(dá)(P0.05)。在體外細(xì)胞學(xué)實驗中,經(jīng)上調(diào)mi R-195感染的人血管平滑肌細(xì)胞中,TGF-β1表達(dá)較未感染和mimic NC組細(xì)胞明顯增高,Smad7表達(dá)較未感染和mimic NC組細(xì)胞明顯降低。但是,經(jīng)下調(diào)mi R-195感染的人血管平滑肌細(xì)胞中,TGF-β1表達(dá)較未感染和mimic NC組細(xì)胞明顯降低,并且較感染上調(diào)mi R-195的細(xì)胞明顯降低;Smad7表達(dá)較未感染和mimic NC組細(xì)胞明顯升高,并且較感染上調(diào)mi R-195的細(xì)胞明顯降低。以上結(jié)果表明,在人血管平滑肌細(xì)胞中,TGF-β1的表達(dá)可能與mi R-195相關(guān),具體表現(xiàn)為mi R-195促進TGF-β1的表達(dá)。同時,mi R-195抑制Smad7的表達(dá),并通過下調(diào)mi R-195可以使Smad7過表達(dá)。結(jié)論:mi R-195可能通過抑制Smad7表達(dá)調(diào)控主動脈夾層的發(fā)生和發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R543.1
【圖文】：

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 結(jié)果一、 組織 HE 染色如圖 1 所示，從三組組織標(biāo)本病理切片看，主動脈夾層及主動脈瘤組織中，主動脈中膜排列紊亂，組織疏松，呈結(jié)節(jié)狀突入內(nèi)膜，并且細(xì)胞基質(zhì)多發(fā)黏液樣變性；主動脈夾層組織中可見多發(fā)彈力纖維斷裂，粘液樣變性嚴(yán)重，炎性細(xì)胞浸潤；冠心病組組織中膜結(jié)構(gòu)排列緊密，彈性纖維排列有序，無明顯彈性纖維增生，主動脈機制無明顯黏液樣變性。對比可知從組織形態(tài)學(xué)看，主動脈夾層組及主動脈瘤組組織中膜原有組織結(jié)構(gòu)破壞，彈性纖維形態(tài)及功能可能不足，由此可能影響了主動脈中層結(jié)構(gòu)及功能的穩(wěn)定性，導(dǎo)致主動脈血管壁彈性及強度降低，耐受血流沖擊的強度及剪切力能力降低，從而容易導(dǎo)致主動脈夾層的形成。

響了主動脈中層結(jié)構(gòu)及功能的穩(wěn)定性，導(dǎo)致主動脈血管壁彈性及強度降低，耐受血流沖擊的強度及剪切力能力降低，從而容易導(dǎo)致主動脈夾層的形成。圖 1，升主動脈壁組織 HE 染色 200 倍（冠心病組：主動脈壁結(jié)構(gòu)完整，中層細(xì)胞排列緊密、有序，細(xì)胞形態(tài)完整；動脈瘤組和夾層組：中層細(xì)胞排列紊亂，組織疏松，呈結(jié)節(jié)狀突入內(nèi)膜，基質(zhì)多發(fā)黏液樣變性）二、 Masson 三色染色法如圖 2 所示，從三組組織標(biāo)本切片看，主動脈夾層組合主動脈瘤組中膠原纖維增生明顯；而冠心病組膠原纖維未見明顯增生，肌纖維正常連續(xù)。

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文維缺乏連續(xù)性，機制多發(fā)黏液樣變性）三、 免疫組織化學(xué)法檢測蛋白表達(dá)應(yīng)用 ImagePro Plus 6.0 分析軟件，200 倍視野下每個標(biāo)本隨機選取 3 個視野，對陽性區(qū)域進行分析，TGF-β1、Smad7 在免疫組化切片中以棕黃色為陽性表達(dá)。統(tǒng)計各視野中 TGF-β1、Smad7 的陽性表達(dá)，計算光密度，并經(jīng) SPSS 統(tǒng)計可得：冠心病組TGF-β1的陽性表達(dá)平均光密度為13.77±3.84(與其余兩組比較P＜0.01），動脈瘤組為 30.71±9.09（與夾層組對比 P＞0.05），夾層組為 29.33±8.18。冠心病組 Smad7 的陽性表達(dá)率為 15.30±6.91（與其余兩組比較 P 小于 0.01），動脈瘤組 6.43±2.15（與夾層組比較 P 大于 0.05），夾層組為 2.73±0.72。組間差異經(jīng) SPSS 檢驗，應(yīng)用單因素方差分析，以 P<0.05 為標(biāo)準(zhǔn)，實驗結(jié)果的組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。TGF-β1 在動脈瘤組及夾層組組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，而在冠心病組中呈現(xiàn)低表達(dá)。Smad7 在冠心病組中相對于動脈瘤組及夾層組表達(dá)增高。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 王端;張揚春;王引利;;2014年歐洲心臟病學(xué)會 主動脈疾病診斷及治療指南(部分)[J];心血管病學(xué)進展;2014年05期

2 楊守國;王春生;陳昊;朱仕杰;洪濤;賴顥;;胸主動脈夾層動脈壁TGF-β1表達(dá)與細(xì)胞外基質(zhì)分布[J];中華胸心血管外科雜志;2010年01期

本文編號：2796589