膳食鋅干預(yù)HFpEF大鼠心肌鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的變化
發(fā)布時(shí)間:2020-07-17 08:29
【摘要】:目的探討不同濃度膳食鋅干預(yù)下HFpEF大鼠心肌中Zn~(2+)濃度變化以及鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip7、Zip10及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子表達(dá)變化。方法1.在建立的HFpEF大鼠模型基礎(chǔ)上檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠血清及心肌組織中Zn~(2+)的濃度:本課題組另一成員(張明哲)在前期實(shí)驗(yàn)中已采用達(dá)爾鹽敏感性雄性大鼠(DSS大鼠)建立了HFpEF的動(dòng)物模型。其將DSS大鼠隨機(jī)分為5組(每組12只),其中模型組/實(shí)驗(yàn)組分為4組,包括高鹽低鋅飲食組(HL組)、高鹽正常鋅飲食組(HN組)、高鹽高鋅飲食組(HH90組)以及高鹽極高鋅飲食組(HH270組);對(duì)照組為正常鹽正常鋅飲食組(NN組)。實(shí)驗(yàn)組的高鹽飼料中氯化鈉的含量均為8%,而各實(shí)組飼料中鋅的含量分別為10mg/kg、30mg/kg、90mg/kg以及270mg/kg;對(duì)照組飼料中氯化鈉的含量則為0.3%、鋅的含量為30mg/kg;其它飼料組份的含量以及飼養(yǎng)的條件各組間均相同。然后從7周齡飼養(yǎng)至20周齡,通過(guò)癥狀體征、超聲心動(dòng)、濕肺/干肺比值、血清及心肌組織BNP含量等對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià),并留取心臟及血清標(biāo)本。在此基礎(chǔ)上,采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法(ICPOES)檢測(cè)各大鼠血清及心肌組織中Zn~(2+)的濃度。2.檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip10的表達(dá)情況:使用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈鎖反應(yīng)(qPCR)及蛋白免疫印跡(WB)分別檢測(cè)各大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip10的mRNA及蛋白表達(dá)情況。3.檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠心肌組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激情況:使用qPCR及WB分別檢測(cè)各大鼠心肌組織中CHOP、Bip等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子的mRNA及蛋白表達(dá)情況。4.檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip7的表達(dá)情況:使用qPCR及WB分別檢測(cè)各大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip7的mRNA及蛋白表達(dá)情況。結(jié)果1.ICPOES結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織Zn~(2+)濃度明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),各實(shí)驗(yàn)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);實(shí)驗(yàn)組大鼠血清Zn~(2+)濃度明顯低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.qPCR和WB結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip10的mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),各實(shí)驗(yàn)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.qPCR和WB結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織中CHOP、Bip等內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)因子的mRNA及蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),各實(shí)驗(yàn)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.qPCR和WB結(jié)果顯示,實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip7的mRNA和蛋白表達(dá)水平略高于對(duì)照組,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),實(shí)驗(yàn)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.HFpEF大鼠血清Zn~(2+)濃度降低,心肌組織Zn~(2+)濃度升高,鋅穩(wěn)態(tài)失衡。2.HFpEF大鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip10的mRNA和蛋白表達(dá)下調(diào)。3.HFpEF大鼠心肌組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平增高。4.不同濃度膳食鋅干預(yù)對(duì)HFpEF大鼠心肌組織中Zn~(2+)濃度、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體Zip7、Zip10表達(dá)情況和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激水平未見(jiàn)影響。
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R541.6
【圖文】:
A. 實(shí)驗(yàn)組大鼠 B.對(duì)照組大鼠圖 1.20 周齡時(shí),實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠的外觀特征1.2.3 心肌組織鋅離子濃度的測(cè)定(1)心肌組織的消解①將 5ml 小燒杯經(jīng)泡酸、清水洗凈、高壓滅菌等處理后備用。②用天平稱取約 50mg 的心肌組織并放入到稱量過(guò)重量的 1.5ml EP 管中,放入真空干燥箱中在 60℃ 1.5h 條件下烘干心臟組織,再次稱量重量,將烘干的心臟組織放入到小燒杯中,向燒杯中加入 1ml 生理鹽水,用干凈的剪刀將心肌組織剪碎后加入 2ml 65%的濃硝酸,同時(shí)將石墨可控溫電熱板放在通風(fēng)櫥中并將溫度調(diào)至 120℃,將裝有心肌組織的燒杯放在板面上,加熱約 1h,使硝酸完全揮發(fā)為止。③向加熱好的小燒杯中加入 0.6ml 65%濃硝酸及 2.4ml 的超純水,使硝酸濃度變成 13%。④將小燒杯放入超聲波清洗機(jī)中(避免水進(jìn)入燒杯),使燒杯中的物質(zhì)充
天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果大鼠心肌組織中 Zn2+濃度升高,血清中 Zn2+濃度降大鼠心肌組織中 Zn2+濃度升高CPOES 檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織中 Zn2+濃度134.39±53.09 ug/g,HN 139.92±56.55 ug/g,HH90 122.07±.76±31.22 ug/g VS NN 71.43±28.19 ug/g ),差異有統(tǒng),各實(shí)驗(yàn)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。(見(jiàn)圖
** vs.對(duì)照組 p<0.01,#.兩者相比 p<0.05圖 3.血清 Zn2+相對(duì)濃度鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體 Zip10 表達(dá)下調(diào)織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體 Zip10 mRNA 表達(dá)下調(diào)CR 檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組各組大鼠心肌組織 Zip10對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),各實(shí)驗(yàn)組之0.05)。(見(jiàn)圖 4)
【學(xué)位授予單位】:天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R541.6
【圖文】:
A. 實(shí)驗(yàn)組大鼠 B.對(duì)照組大鼠圖 1.20 周齡時(shí),實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組大鼠的外觀特征1.2.3 心肌組織鋅離子濃度的測(cè)定(1)心肌組織的消解①將 5ml 小燒杯經(jīng)泡酸、清水洗凈、高壓滅菌等處理后備用。②用天平稱取約 50mg 的心肌組織并放入到稱量過(guò)重量的 1.5ml EP 管中,放入真空干燥箱中在 60℃ 1.5h 條件下烘干心臟組織,再次稱量重量,將烘干的心臟組織放入到小燒杯中,向燒杯中加入 1ml 生理鹽水,用干凈的剪刀將心肌組織剪碎后加入 2ml 65%的濃硝酸,同時(shí)將石墨可控溫電熱板放在通風(fēng)櫥中并將溫度調(diào)至 120℃,將裝有心肌組織的燒杯放在板面上,加熱約 1h,使硝酸完全揮發(fā)為止。③向加熱好的小燒杯中加入 0.6ml 65%濃硝酸及 2.4ml 的超純水,使硝酸濃度變成 13%。④將小燒杯放入超聲波清洗機(jī)中(避免水進(jìn)入燒杯),使燒杯中的物質(zhì)充
天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果大鼠心肌組織中 Zn2+濃度升高,血清中 Zn2+濃度降大鼠心肌組織中 Zn2+濃度升高CPOES 檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織中 Zn2+濃度134.39±53.09 ug/g,HN 139.92±56.55 ug/g,HH90 122.07±.76±31.22 ug/g VS NN 71.43±28.19 ug/g ),差異有統(tǒng),各實(shí)驗(yàn)組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。(見(jiàn)圖
** vs.對(duì)照組 p<0.01,#.兩者相比 p<0.05圖 3.血清 Zn2+相對(duì)濃度鼠心肌組織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體 Zip10 表達(dá)下調(diào)織中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體 Zip10 mRNA 表達(dá)下調(diào)CR 檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組各組大鼠心肌組織 Zip10對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),各實(shí)驗(yàn)組之0.05)。(見(jiàn)圖 4)
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2 葉敏;陳達(dá)柔;陳宇中;杜少冰;杜展鑫;李玉鳳;唐s鉈
本文編號(hào):2759207
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