【摘要】：第一部分D-松醇對(duì)STZ誘導(dǎo)的SAMP-8小鼠糖尿病心肌病的保護(hù)作用及機(jī)制研究背景糖尿病心肌病(DCM)是糖尿病重要并發(fā)癥之一,是指不能用高血壓、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化及其他心臟病變來解釋的發(fā)生于糖尿病患者的心肌疾病。DCM被認(rèn)為是引起糖尿病患者心力衰竭及死亡率升高的驅(qū)動(dòng)因素。目前的研究認(rèn)為DCM的病因主要包括心肌細(xì)胞代謝紊亂、心肌細(xì)胞鈣轉(zhuǎn)運(yùn)缺陷、冠狀動(dòng)脈微循環(huán)障礙、心肌間質(zhì)纖維化及心臟的自主神經(jīng)病變等。主要表現(xiàn)是在代謝紊亂及微血管病變的基礎(chǔ)上引發(fā)心肌廣泛灶性壞死,出現(xiàn)亞臨床的心功能異常,最終進(jìn)展為心力衰竭、心律失常及心源性休克,重癥患者甚至猝死。目前對(duì)DCM的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明,亦無特異性治療藥物。血糖控制不佳導(dǎo)致的氧化應(yīng)激反應(yīng)增加、自噬調(diào)節(jié)的紊亂,目前被普遍認(rèn)為是DCM的發(fā)病機(jī)制之一。D-松醇是D-手性肌醇的衍生物,近年的研究發(fā)現(xiàn),D-松醇能發(fā)揮胰島素類似物的作用,調(diào)控血糖,但是它在DCM中的具體作用及機(jī)制尚未明確。因此本實(shí)驗(yàn)通過研究D-松醇對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病SAMP-8小鼠心肌氧化應(yīng)激、心肌細(xì)胞凋亡、糖自噬及相關(guān)信號(hào)通路的作用,探討D-松醇對(duì)糖尿病心肌病的作用及機(jī)制。研究目的1.研究D-松醇對(duì)SAMP-8小鼠糖尿病心肌病的作用;2.研究D-松醇對(duì)SAMP-8小鼠糖尿病心肌損傷的保護(hù)作用機(jī)制。研究方法1.糖尿病模型的建立:應(yīng)用快速衰老型小鼠(SAMP-8),采用低劑量的鏈脲佐菌素(STZ,50mg/kg/day)連續(xù)腹腔注射5天,分別于1、2周后通過剪尾法采血測(cè)量小鼠血糖,確定建模是否成功。2.分組及灌胃治療:20只衰老抵抗小鼠(SAMR-1)為正常對(duì)照組(SAMR-1組)。SAMP-8小鼠60只分為3組:分別為衰老對(duì)照組(SAMP-8組)(建模時(shí)腹腔注射等量STZ溶解劑,n=20);糖尿病組(DM組)(建模成功后,每日等體積雙蒸水灌胃,n=20);糖尿病治療組(DMT組)(建模成功后,D-松醇100mg/kg/day灌胃,共10周,n=20)。3.記錄血糖、體重的情況:分別記錄建模0周,2周,4周,8周,12周各組小鼠血糖及體重情況。4.心臟超聲檢查:建模后第13周,對(duì)各組小鼠麻醉后行經(jīng)胸心臟超聲檢測(cè),測(cè)量左室射血分?jǐn)?shù)等相關(guān)指標(biāo)。5.心肌氧化應(yīng)激及自噬等相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè):Masson染色檢測(cè)心肌膠原纖維合成情況;ELISA檢測(cè)心肌組織SOD、GSH、GPx及MDA含量;TUNEL檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡情況;透射電鏡檢測(cè)心肌超微結(jié)構(gòu)及自噬體情況;PCR檢測(cè)各組心肌組織BNP、ANP、α-MHC及β-MHC表達(dá);免疫印跡法檢測(cè)心肌Nrf2、bcl-2、caspase 3、caspase 9、STBD1、LC3B、Beclin-1、p62、Atg8、PI3K、Akt 及 mTOR 等蛋白表達(dá)。研究結(jié)果1.建模后第4周、8周及12周,DMT組血糖顯著低于DM組;建模后第8周及12周,DMT組體重較DM組升高;2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),與SAMP-8組相比,DM組小鼠左室射血分?jǐn)?shù)減低,心肌肥厚增加,心肌纖維排列紊亂,膠原纖維合成增多,心肌細(xì)胞凋亡增加,抗氧化因子合成減少,氧化因子合成增加,自噬體形成增多;3.與DM組相比,DMT組小鼠心臟左室射血分?jǐn)?shù)增加,心肌肥厚及纖維化程度減輕,心肌細(xì)胞凋亡減少,氧化應(yīng)激減輕,自噬體形成減少。PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路活躍度增加。結(jié)論1.D-松醇對(duì)STZ誘導(dǎo)的SAMP-8小鼠糖尿病心肌病具有保護(hù)作用;2.D-松醇可以通過調(diào)控血糖,改善氧化應(yīng)激,抑制心肌細(xì)胞凋亡,調(diào)控糖自噬,調(diào)控PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路,改善糖尿病SAMP-8小鼠心肌損傷。第二部分D-松醇對(duì)晚期糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移的保護(hù)機(jī)制研究背景糖尿病的大血管病變是糖尿病嚴(yán)重的慢性并發(fā)癥之一,以不斷進(jìn)展的動(dòng)脈粥樣硬化及血管重構(gòu)為特征。而動(dòng)脈中膜細(xì)胞外基質(zhì)成分增多和平滑肌細(xì)胞增殖及其相互間的關(guān)系在糖尿病大血管病的致病過程中起著關(guān)鍵的作用。本實(shí)驗(yàn)通過研究D-松醇對(duì)晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)誘導(dǎo)的小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖和遷移的作用及內(nèi)在機(jī)制,探討D-松醇對(duì)糖尿病大血管病變的保護(hù)作用。研究目的1.研究不同濃度D-松醇對(duì)VSMC增殖及遷移的作用;2.研究D-松醇對(duì)VSMC增殖和遷移的保護(hù)作用機(jī)制。研究方法體外分離培養(yǎng)小鼠主動(dòng)脈VSMC,應(yīng)用AGEs建立血管平滑肌細(xì)胞糖基化損傷模型,觀察不同濃度的D-松醇對(duì)細(xì)胞增殖和遷移的影響,應(yīng)用CCK-8測(cè)定細(xì)胞增殖,細(xì)胞劃痕檢測(cè)細(xì)胞遷移,并測(cè)定各組細(xì)胞中TGF-β 1、p-smad2、p-smad3、Asporin蛋白的表達(dá)。研究結(jié)果1.AGEs組細(xì)胞增殖、遷移、TGF-ββ1、p-smad2、p-smad3、Asporin蛋白表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組(P0.01);2.與AGEs組比較,不同濃度D-松醇可明顯抑制VSMC的增殖和遷移并下調(diào)TGF-β1、p-smad2、p-smad3及Asporin蛋白的表達(dá),且呈濃度依賴性(P0.05或P0.01)。結(jié)論1.D-松醇可抑制AGEs誘導(dǎo)的小鼠血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移;2.Asporin可能通過TGF-β/smad通路參與血管平滑肌細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)過程。
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R587.2;R542.2
【圖文】：

逡逑如圖１－Ａ所示，建模后４周、８周及１２周，ＤＭ組小鼠體重明顯低于ＳＡＭＰ－８逡逑組（Ｐ＜邋０．０１），Ｄ－松醇治療６周后，ＤＭＴ組體重較ＤＭ組升高（尸＜０．０１）。如逡逑圖１－Ｂ所示，與ＳＡＭＰ－８組相比，建模后２周、４周、８周及１２周，ＤＭ組小鼠逡逑血糖明顯升高（尸＜０．０１），而與ＤＭ組相比，ＤＭＴ組小鼠血糖在建模后４周、８逡逑周及１２周血糖降低（尸＜邋０．０１）。逡逑３．

圖３各組小鼠心肌肥厚相關(guān)指標(biāo)的變化Ａ．心臟重量與脛骨長(zhǎng)度比值；Ｂ．心臟逡逑重量與體重比值；Ｃ，Ｄ．邋ａ－ＭＨＣ及Ｐ－ＭＨＣ邋ｍＲＮＡ表達(dá)變化�！埃停剩希戾义�

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 于澤宇;馬建;崔璇;;中西醫(yī)治療糖尿病心肌病的文獻(xiàn)研究[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2019年38期

2 劉婷婷;謝田田;芮濤;;糖尿病心肌病的診斷與治療進(jìn)展[J];海南醫(yī)學(xué);2018年14期

3 王棟;;糖尿病心肌病發(fā)病機(jī)制及相關(guān)中藥研究進(jìn)展[J];中醫(yī)研究;2018年11期

4 周楊;鄭承紅;張帆;;津力達(dá)聯(lián)合曲美他嗪治療糖尿病心肌病的療效觀察[J];湖北中醫(yī)雜志;2016年12期

5 楊梅;周丹;;磁共振成像在糖尿病心肌病心肌評(píng)價(jià)中的進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)影像技術(shù);2017年07期

6 殷俊;;糖尿病心肌病性心力衰竭的臨床特點(diǎn)分析[J];中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2014年21期

7 馮新星;陳燕燕;;糖尿病心肌病的研究進(jìn)展[J];中國(guó)循環(huán)雜志;2015年01期

8 郭鑫;;關(guān)于糖尿病心肌病的臨床探討[J];糖尿病新世界;2015年09期

9 屈會(huì)云;;糖尿病心肌病的基礎(chǔ)與臨床研究現(xiàn)狀[J];健康之路;2018年01期

10 曹婧;李興;;脂聯(lián)素對(duì)2型糖尿病心肌病變的保護(hù)作用[J];中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2014年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 潘繼興;鄧文祥;吳華英;陳青揚(yáng);曾光;李亮;林湘東;劉平安;黃惠勇;;中醫(yī)藥對(duì)糖尿病心肌病病理生理影響的研究進(jìn)展[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)診斷專業(yè)委員會(huì)第十次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2016年

2 黎妮;;運(yùn)動(dòng)與糖尿病心肌病[A];第四屆（2016）全國(guó)運(yùn)動(dòng)生理與生物化學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議——運(yùn)動(dòng)·體質(zhì)·健康論文摘要匯編[C];2016年

3 馮琨;王丹;許麗娟;劉靜;孫世欣;呂喜玲;周艷;;氟伐他汀對(duì)2型糖尿病心肌病患者血清CTGF及心功能的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)第十六次全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2012年

4 崔金濤;許祖建;;糖尿病心肌病的研究近況[A];第七次中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合糖尿病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

5 吳濤;胡申江;;結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在糖尿病心肌病中作用的研究進(jìn)展[A];2004年浙江省心血管病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

6 黃靜;倪青;;糖尿病心肌病的中西醫(yī)研究進(jìn)展[A];5TH全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌代謝病學(xué)術(shù)大會(huì)暨糖尿病論壇論文集[C];2012年

7 張薇;鐘明;張運(yùn);;糖尿病心肌病心肌損傷機(jī)制研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十一次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議專題報(bào)告匯編[C];2009年

8 張冉;江力勤;趙圣剛;陳善漿;葉先才;;新西蘭大白兔糖尿病心肌病模型的建立[A];2012年浙江省內(nèi)科學(xué)年會(huì)論文集[C];2012年

9 王東;周麗諾;;糖尿病心肌病大鼠的心肌基因表達(dá)譜分析及意義[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)第十次全國(guó)糖尿病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

10 劉冬戈;喬旭柏;杜俊;楊重慶;方芳;馬正中;陳曼麗;錢貽簡(jiǎn);;糖尿病心肌病的病理組織學(xué)觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)2007年學(xué)術(shù)年會(huì)暨第九屆全國(guó)病理大會(huì)論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 記者 白毅;燈盞花素為糖尿病心肌病治療辟新徑[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

2 記者　應(yīng)洪舒;糖尿病心肌病中氧自由基作用新研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 常曉;活血降糖飲對(duì)糖尿病心肌病氧化應(yīng)激的作用和臨床研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2017年

2 管文娟;血漿RBP4、Apelin12與糖尿病心肌病相關(guān)性及干預(yù)研究[D];鄭州大學(xué);2018年

3 殷中偉;重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的microRNA投遞在阿霉素心臟損傷及糖尿病心肌病中的作用與機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2018年

4 王冠;白藜蘆醇通過增加Nrf2表達(dá)和轉(zhuǎn)錄活性對(duì)糖尿病心肌病保護(hù)作用的研究[D];吉林大學(xué);2018年

5 扈馨月;富馬酸二甲酯對(duì)糖尿病心肌病的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2018年

6 叢麗;心肌胃促胰酶與糖尿病心肌病變關(guān)系的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

7 苗雅;糖尿病心肌病發(fā)病機(jī)制、早期診斷和治療的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2005年

8 張楠;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療糖尿病心肌病的研究[D];浙江大學(xué);2007年

9 李震花;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病心肌病發(fā)病機(jī)制中作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2008年

10 陳艷芬;黃芪散對(duì)糖尿病心肌病變的干預(yù)作用及其機(jī)制研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 徐梅;D-松醇對(duì)糖尿病心肌病和血管病變的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2019年

2 楊開雯;miR-146在糖尿病心肌病中的調(diào)控作用[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2018年

3 牟嬌;EPO通過抑制心肌細(xì)胞凋亡保護(hù)糖尿病心肌病大鼠心功能[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2018年

4 柯旋;調(diào)控vaspin治療糖尿病心肌病及其機(jī)制研究[D];南昌大學(xué);2018年

5 王文斌;磁共振T2~*WI成像對(duì)亞臨床期2型糖尿病心肌病變?cè)\斷價(jià)值的研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2017年

6 夏聰穎;ACOT1基因過表達(dá)對(duì)糖尿病心肌病的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2016年

7 王程瑜;IGF-1對(duì)糖尿病大鼠心肌病的保護(hù)作用及機(jī)制[D];延邊大學(xué);2017年

8 趙明霞;Salusin-β在糖尿病心肌病的炎癥和氧化應(yīng)激中的作用與機(jī)制[D];南京醫(yī)科大學(xué);2017年

9 黃岸清;基于PI3K/Akt/FoxO3a通路白藜蘆酵保護(hù)糖尿病心肌病大鼠心功能的機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2017年

10 李蓮靜;糖尿病心肌病發(fā)病機(jī)制、診療方法及中醫(yī)藥辨治等相關(guān)方面初探[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2004年

本文編號(hào)：2731344