【摘要】：心臟發(fā)育是個(gè)體從一個(gè)胚胎到成體持續(xù)進(jìn)行的復(fù)雜過(guò)程,涉及細(xì)胞增殖,遷移,分化和程序性細(xì)胞死亡以及結(jié)構(gòu)重塑,心臟的正常發(fā)育是維持其基本功能的重要基礎(chǔ)。眾所周知,心臟的發(fā)育受到遺傳、環(huán)境及表觀遺傳的多種因素的影響。過(guò)去幾年的研究表明,表觀遺傳修飾在調(diào)控心臟發(fā)育過(guò)程中起到重要作用。表觀遺傳機(jī)制主要包括DNA甲基化、染色質(zhì)重塑、組蛋白修飾及非編碼RNA,其中DNA甲基化是研究最廣泛的能夠改變心臟發(fā)育過(guò)程的表觀遺傳修飾。DNA甲基化狀態(tài)(5-mc)向去甲基化狀態(tài)(5-hmc)轉(zhuǎn)變的過(guò)程,是一種新的DNA表觀遺傳修飾。這一過(guò)程主要由DNA雙加氧酶TET(Ten-eleven translocation,TET)蛋白家族(Tet1、Tet2、Tet3)介導(dǎo)。在哺乳動(dòng)物中,TET家族蛋白參與了心臟發(fā)育多個(gè)生物學(xué)過(guò)程的調(diào)控,影響了組織特異性基因表達(dá)的調(diào)節(jié)、細(xì)胞發(fā)育和基因組穩(wěn)定性,保證了機(jī)體中心臟結(jié)構(gòu)和功能的正常。本文主要研究DNA去甲基化酶Tet1介導(dǎo)的DNA去甲基化過(guò)程對(duì)心臟發(fā)育、結(jié)構(gòu)及功能的影響作用。利用細(xì)胞生物學(xué)、免疫組織化學(xué)、小鼠心臟超聲、高通量全基因組測(cè)序等技術(shù),探究Tet1參與的調(diào)控作用。研究發(fā)現(xiàn),在小鼠出生后的整個(gè)發(fā)育過(guò)程中,Tet1心臟中均有持續(xù)表達(dá),Tet1蛋白的表達(dá)量P1P14P8W,成年后表達(dá)量顯著下降。在心臟發(fā)育的各個(gè)時(shí)期,5hmC修飾在WT小鼠中明顯多于KO小鼠。通過(guò)成年小鼠心臟組織染色,研究發(fā)現(xiàn)P8W KO小鼠出現(xiàn)一定程度的心肌纖維化、心腔擴(kuò)張,而WT小鼠并未出現(xiàn)這一特征。同時(shí),小鼠心臟超聲結(jié)果顯示KO小鼠較WT小鼠心臟收縮功能下降。綜上研究結(jié)果表明,去甲基化酶Tet1介導(dǎo)的DNA去甲基化參與了心臟發(fā)育過(guò)程的調(diào)控,繼而影響了心臟的結(jié)構(gòu)與功能。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R541
【圖文】：

圖３．１邋（Ａ邋）邋ｑＰＣＲ檢測(cè)Ｔｅｔｌ邋ＷＴ和ＫＯ小鼠心臟Ｔｅｔｌ的表達(dá)；（Ｂ邋）邋ｑＰＣＲ檢測(cè)野逡逑生型邋ＰＩ、Ｐ１４、Ｐ８Ｗ邋小鼠心臟邋Ｔｅｔｌ邋的表達(dá)；（Ｃ邋）Ｄｏｔ邋Ｂｌｏｔ邋檢測(cè)邋ＰＩ、Ｐ１４、Ｐ８Ｗ邋ＷＴ／ＫＯ逡逑小鼠心臟５ｈｍＣ修飾情況逡逑１９逡逑

選�。校福祝祝裕耍闲∈螅ǎ睿剑保埃�，提前三天每天胸部刺激預(yù)處理，提前一天心逡逑臟部位脫毛，進(jìn)行小鼠心臟超聲實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示ＫＯ小鼠心臟收縮舒張的幅度較逡逑ＷＴ小鼠�。▓D３．３邋Ａ邋）。統(tǒng)計(jì)超聲數(shù)據(jù)，結(jié)果顯示ＥＦ（射血分?jǐn)?shù)）ＫＯ小鼠較ＷＴ小逡逑鼠顯著下降，ＦＳ（短軸縮短率）ＫＯ小鼠較ＷＴ小鼠顯著下降（圖３．３邋Ｂ），提示Ｔｅｔｌ逡逑ＫＯ小鼠心功能下降。逡逑２０逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 郭奕斌;;基因診斷中測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用及優(yōu)缺點(diǎn)[J];遺傳;2014年11期

本文編號(hào)：2715340