【摘要】：目的:探討冠心病(Coronary Artery Disease,CAD)患者心外膜脂肪組織(Epicardial Adipose Tissue,EAT)和血清中脂聯(lián)素(adiponectin,APN,ADIPOQ)相關(guān)差異表達(dá)mi R-455b-3p對脂肪細(xì)胞因子APN、Kruppel樣因子4(KLF4)、白細(xì)胞介素6(IL-6)和單核細(xì)胞因子趨化蛋白1(MCP-1)分泌以及對脂肪細(xì)胞分化的影響,闡明mi R-455b-3p在CAD發(fā)生發(fā)展過程中對脂肪細(xì)胞分化和炎癥反應(yīng)影響的可能機(jī)制。方法:1、選取受試個體冠心病(CAD)34例和非冠心病(Non-CAD)組16例,收集EAT和血清標(biāo)本,通過實時熒光定量PCR(q RT-PCR)驗證兩組標(biāo)本中mi R-455b-3p表達(dá)水平。2、在體外培養(yǎng)測成熟脂肪細(xì)胞中炎癥因子APN、KLF4、IL-6、MCP-1 m RNA表達(dá)水平。3、分別轉(zhuǎn)染3T3-L1前脂肪細(xì)胞,實驗組分為mi R-455b-3p過表達(dá)組(轉(zhuǎn)染mi R-455b-3p模擬物)、抑制劑組(轉(zhuǎn)染mi R-455b-3p抑制劑)和空白對照組。分別轉(zhuǎn)染mi R-455b-3p agomir、antagomir和NC至離體培養(yǎng)的已誘導(dǎo)成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞,q RT-PCR檢mi R-455b-3p agomir、antagomir和NC至離體培養(yǎng)的3T3-L1前脂肪細(xì)胞,誘導(dǎo)8天后油紅O染色觀察脂滴積累情況,q RT-PCR檢測脂肪細(xì)胞中脂肪細(xì)胞分化成熟標(biāo)志物FABP4、PPARγ及C/EBPαm RNA和APN、FABP4蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:1.人體組織實驗(1)受試個體一般資料、血脂及血漿炎癥因子水平比較CAD組低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL-c)和超敏C反應(yīng)蛋白高于non-CAD組,高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-c)和ADIPOQ低于non-CAD組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)受試個體EAT組織及血清中mi R-455b-3p表達(dá)水平與non-CAD組相比,CAD組EAT和血清中mi R-455b-3p表達(dá)均升高(P0.01)。2.體外細(xì)胞實驗(1)3T3-L1脂肪細(xì)胞的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化未誘導(dǎo)分化的3T3-L1細(xì)胞呈梭形,胞漿中無脂滴;誘導(dǎo)分化至第8天,細(xì)胞呈橢圓形,90%以上細(xì)胞均分化成熟,有較多的脂滴聚集。油紅O染色結(jié)果顯示,脂肪細(xì)胞中的形成的脂滴被染成紅色,成功誘導(dǎo)3T3-L1細(xì)胞分化為脂肪細(xì)胞。(2)檢測mi R-455b-3p對脂肪細(xì)胞炎癥因子的調(diào)控作用與NC組相比,成熟3T3-L1脂肪細(xì)胞中mi R-455b-3p過表達(dá)組APN、KLF4m RNA表達(dá)降低,IL-6、MCP-1表達(dá)升高(P0.05);mi R-455b-3p抑制劑組中,APN、KLF4表達(dá)升高,IL-6、MCP-1表達(dá)降低(P0.05)。(3)檢測mi R-455b-3p對脂肪細(xì)胞分化的影響在3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過程中mi R-455b-3p表達(dá)水平先上升后下降,最后快速上升。與對照組相比,mi R-455b-3p過表達(dá)組成熟脂肪細(xì)胞中脂滴積累增多,脂肪細(xì)胞分化標(biāo)志物FABP4、PPARγ、C/EBPαm RNA表達(dá)升高,FABP4蛋白表達(dá)升高,APN蛋白表達(dá)降低(P0.05)。結(jié)論:(1)在CAD患者EAT中存在差異性表達(dá)的mi RNAs,其中mi R-455b-3p高表達(dá);(2)高表達(dá)的mi R-455b-3p負(fù)調(diào)控APN的表達(dá),并且影響脂肪細(xì)胞因子KLF4、IL-6以及MCP-1的表達(dá),使炎癥加劇;(3)在脂肪細(xì)胞中,mi R-455b-3p促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化成熟。
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R541.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 魏育濤;付文博;劉誠;宋亞芹;陳新忠;董念國;;心外膜脂肪厚度與冠心病的相關(guān)性研究[J];臨床心血管病雜志;2014年09期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 劉洋;冠心病EAT中與脂聯(lián)素基因相關(guān)差異性microRNAs的篩選及生物信息學(xué)分析[D];石河子大學(xué);2017年

2 劉雅青;IRS-1通過miR-143調(diào)節(jié)前脂肪細(xì)胞分化的作用與機(jī)制研究[D];中南大學(xué);2014年

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本文編號：2709675