【摘要】：目的:探討冠心病(Coronary Artery Disease,CAD)患者心外膜脂肪組織(Epicardial Adipose Tissue,EAT)和血清中脂聯(lián)素(adiponectin,APN,ADIPOQ)相關差異表達mi R-455b-3p對脂肪細胞因子APN、Kruppel樣因子4(KLF4)、白細胞介素6(IL-6)和單核細胞因子趨化蛋白1(MCP-1)分泌以及對脂肪細胞分化的影響,闡明mi R-455b-3p在CAD發(fā)生發(fā)展過程中對脂肪細胞分化和炎癥反應影響的可能機制。方法:1、選取受試個體冠心病(CAD)34例和非冠心病(Non-CAD)組16例,收集EAT和血清標本,通過實時熒光定量PCR(q RT-PCR)驗證兩組標本中mi R-455b-3p表達水平。2、在體外培養(yǎng)測成熟脂肪細胞中炎癥因子APN、KLF4、IL-6、MCP-1 m RNA表達水平。3、分別轉染3T3-L1前脂肪細胞,實驗組分為mi R-455b-3p過表達組(轉染mi R-455b-3p模擬物)、抑制劑組(轉染mi R-455b-3p抑制劑)和空白對照組。分別轉染mi R-455b-3p agomir、antagomir和NC至離體培養(yǎng)的已誘導成熟3T3-L1脂肪細胞,q RT-PCR檢mi R-455b-3p agomir、antagomir和NC至離體培養(yǎng)的3T3-L1前脂肪細胞,誘導8天后油紅O染色觀察脂滴積累情況,q RT-PCR檢測脂肪細胞中脂肪細胞分化成熟標志物FABP4、PPARγ及C/EBPαm RNA和APN、FABP4蛋白的表達水平。結果:1.人體組織實驗(1)受試個體一般資料、血脂及血漿炎癥因子水平比較CAD組低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL-c)和超敏C反應蛋白高于non-CAD組,高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL-c)和ADIPOQ低于non-CAD組,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)受試個體EAT組織及血清中mi R-455b-3p表達水平與non-CAD組相比,CAD組EAT和血清中mi R-455b-3p表達均升高(P0.01)。2.體外細胞實驗(1)3T3-L1脂肪細胞的培養(yǎng)及誘導分化未誘導分化的3T3-L1細胞呈梭形,胞漿中無脂滴;誘導分化至第8天,細胞呈橢圓形,90%以上細胞均分化成熟,有較多的脂滴聚集。油紅O染色結果顯示,脂肪細胞中的形成的脂滴被染成紅色,成功誘導3T3-L1細胞分化為脂肪細胞。(2)檢測mi R-455b-3p對脂肪細胞炎癥因子的調控作用與NC組相比,成熟3T3-L1脂肪細胞中mi R-455b-3p過表達組APN、KLF4m RNA表達降低,IL-6、MCP-1表達升高(P0.05);mi R-455b-3p抑制劑組中,APN、KLF4表達升高,IL-6、MCP-1表達降低(P0.05)。(3)檢測mi R-455b-3p對脂肪細胞分化的影響在3T3-L1前脂肪細胞分化過程中mi R-455b-3p表達水平先上升后下降,最后快速上升。與對照組相比,mi R-455b-3p過表達組成熟脂肪細胞中脂滴積累增多,脂肪細胞分化標志物FABP4、PPARγ、C/EBPαm RNA表達升高,FABP4蛋白表達升高,APN蛋白表達降低(P0.05)。結論:(1)在CAD患者EAT中存在差異性表達的mi RNAs,其中mi R-455b-3p高表達;(2)高表達的mi R-455b-3p負調控APN的表達,并且影響脂肪細胞因子KLF4、IL-6以及MCP-1的表達,使炎癥加劇;(3)在脂肪細胞中,mi R-455b-3p促進脂肪細胞分化成熟。
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R541.4

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 魏育濤;付文博;劉誠;宋亞芹;陳新忠;董念國;;心外膜脂肪厚度與冠心病的相關性研究[J];臨床心血管病雜志;2014年09期

相關碩士學位論文 前2條

1 劉洋;冠心病EAT中與脂聯(lián)素基因相關差異性microRNAs的篩選及生物信息學分析[D];石河子大學;2017年

2 劉雅青;IRS-1通過miR-143調節(jié)前脂肪細胞分化的作用與機制研究[D];中南大學;2014年

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本文編號：2709675