【摘要】：研究背景心房顫動(房顫,AF)是臨床上最常見的快速性心律失常之一,可引起心力衰竭、腦卒中和動脈栓塞等多種并發(fā)癥,具有多發(fā)性、高致殘率和致死率等特點,隨著年齡增長發(fā)病率也逐漸增加,嚴(yán)重影響了患者的身體健康和生活質(zhì)量。房顫治療已成為世界范圍的心血管領(lǐng)域的重點關(guān)注內(nèi)容之一。目前由于房顫的藥物治療效果差強人意,因此近年來能夠根治房顫的射頻消融術(shù)(Radiofrequency catheter ablation,RFCA)是房顫治療的重要手段之一。RFCA具有微創(chuàng)、術(shù)后恢復(fù)快等特點。在近年來的歐洲和美國的房顫管理指南中,對于藥物治療后仍有癥狀存在的房顫均將RFCA作為IA類推薦。但房顫RFCA術(shù)后的高復(fù)發(fā)率依然是困擾醫(yī)生和患者的重要因素,降低了 RFCA的遠(yuǎn)期療效,增加了患者再次接受RFCA治療的痛苦與經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。如何針對患者術(shù)前的多種資料進(jìn)行分析,從而預(yù)測RFCA術(shù)后是否復(fù)發(fā),對于準(zhǔn)確篩選消融患者、提高RFCA治療效率、減少復(fù)發(fā)率具有十分重要的意義。目前已有研究發(fā)現(xiàn),房顫患者的部分術(shù)前基線特征和血漿生化標(biāo)記物可在一定程度上作為RFCA術(shù)后房顫復(fù)發(fā)的預(yù)測因素,但特異性的遺傳學(xué)標(biāo)志物microRNA(miRNA)與RFCA術(shù)后房顫復(fù)發(fā)風(fēng)險的相關(guān)性研究尚未見報道。miRNA是生物體內(nèi)一類內(nèi)源性非編碼小RNA,在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的表達(dá),具有高度的保守性和特異性。目前研究發(fā)現(xiàn),miRNA可在血漿中穩(wěn)定存在,并且能夠通過實時熒光定量PCR(qRT-PCR)進(jìn)行檢測。已有研究顯示,miRNA能通過調(diào)控心房的電重構(gòu)或結(jié)構(gòu)重構(gòu)的相關(guān)基因參與房顫的發(fā)生、維持。其中miRNA-1、miRNA-206、miRNA-328參與調(diào)節(jié)離子通道的相關(guān)基因的表達(dá),miRNA-21、miRNA-133、miRNA-150參與調(diào)控與房顫心房纖維化的相關(guān)調(diào)節(jié)基因,均與房顫的發(fā)生維持有明確的相關(guān)性。有研究證實miRNA-21、miRNA-328、miRNA-150等在房顫患者血漿中有差異性表達(dá)。研究目的1.收集房顫患者和正常人群靜脈血,檢測房顫人群與正常人群血漿中mi-RNAs表達(dá)量的差異。2.綜合臨床基線資料、血漿生化指標(biāo)及血漿中miRNAs表達(dá)量,尋找預(yù)測RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)危險因素。資料與方法1.選取研究對象及收集臨床資料和生化學(xué)標(biāo)志物收集2014年9月至2016年5月山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院查體無房顫者100例作為對照組。同期收集山東大學(xué)附屬千佛山醫(yī)院心內(nèi)一科和山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院心內(nèi)科行房顫RFCA患者270例作為房顫組。收集患者的術(shù)前一般臨床資料(如:房顫類型、病程時間、吸煙、高血壓史、糖尿病史、左房前后徑、左室射血分?jǐn)?shù)等)。采集患者空腹靜脈血,行生化標(biāo)志物檢測(包括肝功能、腎功能、糖化血紅蛋白等)檢測。2.miRNA檢測2.1 miRNA的提取采集患者空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血保存于EDTA抗凝管中,2h內(nèi),4℃離心制備血漿。按照QIAGEN miRNeasy Serum/Plasma Kit 試劑盒(Germeny Duesseldorf)說明書進(jìn)行操作提取miRNA。2.2逆轉(zhuǎn)錄成cDNA和實時熒光定量PCR按照 GeneCopoeia All-In-OneTM miRNA qRT-PCR Detection Kit試劑盒(USA)說明書進(jìn)行操作,采用加尾法行逆轉(zhuǎn)錄,合成cDNA。實時熒光定量PCR檢測患者血漿中的miRNA表達(dá)量。3.射頻消融治療根據(jù)患者臨床診斷和術(shù)中情況,對患者進(jìn)行射頻消融治療,直到消融終點;如未能達(dá)到消融終點者實施電復(fù)律以恢復(fù)竇性心律。4.術(shù)后隨訪與分組術(shù)后3個月患者定期門診復(fù)診,3個月后行電話或門診隨訪,隨訪時間為12個月。按房顫復(fù)發(fā)情況將患者分為術(shù)后復(fù)發(fā)組和術(shù)后未復(fù)發(fā)組;再按房顫類型將陣發(fā)性房顫患者分為陣發(fā)性房顫術(shù)后復(fù)發(fā)和未復(fù)發(fā)亞組,及將持續(xù)性房顫患者分為持續(xù)性房顫術(shù)后復(fù)發(fā)和未復(fù)發(fā)亞組。結(jié)果1.臨床基線資料各組單因素分析在房顫術(shù)后復(fù)發(fā)組與術(shù)后未復(fù)發(fā)組的比較中發(fā)現(xiàn),房顫術(shù)后復(fù)發(fā)組房顫類型、術(shù)中電復(fù)律、病程時間、CHADS2評分、左房前后徑(LAD)、左室射血分?jǐn)?shù)、尿酸、血漿miRNA-21表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。在陣發(fā)性房顫亞組分析中發(fā)現(xiàn),陣發(fā)性房顫術(shù)后復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)亞組相比,LAD、LVEF、術(shù)中電復(fù)律、尿酸相比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);在持續(xù)性房顫亞組中發(fā)現(xiàn),持續(xù)性房顫術(shù)后復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)亞組相比病程時間、LAD、尿酸相比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.血漿miRNA表達(dá)量單因素分析在房顫組與對照組的比較中發(fā)現(xiàn),房顫組血漿中miRNA-21、miRNA-206、miRNA-328表達(dá)量上調(diào),而血漿中miRNA-150、miRNA-133表達(dá)量下調(diào),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。在術(shù)后復(fù)發(fā)組與術(shù)后未復(fù)發(fā)組的比較重發(fā)現(xiàn),房顫術(shù)后復(fù)發(fā)組與術(shù)后未復(fù)發(fā)組血漿miRNA-21表達(dá)量相比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。進(jìn)一步亞組分析中發(fā)現(xiàn),與陣發(fā)性未復(fù)發(fā)亞組相比和陣發(fā)性房顫復(fù)發(fā)亞組中僅血漿miRNA-21表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義;與持續(xù)性未復(fù)發(fā)亞組相比,持續(xù)性房顫復(fù)發(fā)亞組中僅血漿miRNA-21表達(dá)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.Logistic回歸分析在陣發(fā)性房顫亞組中,LAD(OR=1.187,P=0.031)、血漿miRNA-21表達(dá)量(OR=1.226,尸=0.012)在陣發(fā)性房顫復(fù)發(fā)亞組組與未復(fù)發(fā)亞組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。而在持續(xù)性房顫亞組中,LAD(OR=1.125,P=0.035)、病程時間(OR=1.023,P=0.019)、血漿miRNA-21表達(dá)量(OR =1.177,P=0.032)在亞組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義。4.ROC曲線下面積(AUC)陣發(fā)性房顫亞組中以LAD為指標(biāo)計算ROC曲線下面積(AUC)為0.750,將血漿miRNA-21表達(dá)量與LAD進(jìn)行并聯(lián)作為綜合指標(biāo)后,AUC=0.844;持續(xù)性房顫亞組中,將LAD、病程時間及血漿miRNA-21表達(dá)量并聯(lián)作為綜合指標(biāo)后測得AUC亦具有一定的參考價值。結(jié)論1.實驗發(fā)現(xiàn),不同類型的房顫具有不同的復(fù)發(fā)危險因素影響房顫術(shù)后復(fù)發(fā)。2.實驗結(jié)果表明,LAD及血漿miRNA-21表達(dá)量是預(yù)測陣發(fā)性房顫患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨立危險因素。3.實驗結(jié)果表明,LAD、病程時間及血漿miRNA-21表達(dá)量是預(yù)測持續(xù)性患者RFCA術(shù)后復(fù)發(fā)的獨立危險因素。
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本文編號：2692810