【摘要】：目的:通過分析骨髓增生異常綜合征(MDS)患者骨髓巨噬細胞所占比例及其極化狀態(tài),并分析其與Th細胞活化、紅系分化與凋亡的關(guān)系,探討巨噬細胞在MDS發(fā)病機制中的作用及意義,為MDS貧血的治療提供新思路。方法:運用流式細胞術(shù)檢測骨髓增生異常綜合征患者與正常人骨髓巨噬細胞、M1型巨噬細胞、M2型巨噬細胞比例。并運用免疫組化、實時熒光定量PCR對流式結(jié)果進行驗證。酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測骨髓液上清IFH-γ、IL-4濃度。流式細胞術(shù)檢測Th細胞極化。流式細胞術(shù)檢測骨髓有核紅細胞分化及凋亡。分析MDS患者骨髓巨噬細胞與預后相關(guān)因素的相關(guān)性。并對MDS患者骨髓巨噬細胞與Th細胞極化、紅系分化與凋亡的相關(guān)性進行分析。結(jié)果:(1)低危MDS患者骨髓巨噬細胞比例顯著高于正常對照以及高危MDS患者,并且MDS患者M1型巨噬細胞比例與Th1細胞百分比呈現(xiàn)出正相關(guān)性;(2)低危MDS患者骨髓巨噬細胞出現(xiàn)異常極化,偏向于M1型巨噬細胞;(3)低危MDS患者CD45-細胞中,CD71~+CD235a~+細胞百分比與CD71~(int)CD235a~+百分比之比高于正常對照以及高危MDS患者,存在幼紅細胞分化阻滯,并且阻滯程度與骨髓巨噬細胞比例呈正相關(guān);(4)低危MDS患者有核紅細胞凋亡率顯著增加,并且與M1型巨噬細胞占總巨噬細胞的百分比(M1%)呈正相關(guān);(5)外周血血紅蛋白濃度與骨髓巨噬細胞比例呈負相關(guān)。(6)MDS患者骨髓巨噬細胞比例與IPSS積分呈負相關(guān)。(7)MDS患者骨髓巨噬細胞比例與骨髓CD34+細胞比例呈負相關(guān)。結(jié)論:巨噬細胞參與MDS異常免疫過程,低危MDS患者骨髓巨噬細胞比例增加并出現(xiàn)異常I型極化。骨髓巨噬細胞異常免疫狀態(tài)對紅系造血的負面影響可能是低危MDS患者貧血的原因之一。MDS患者骨髓巨噬細胞比例與IPSS積分及CD34+細胞比例呈負相關(guān),或可提示疾病進展程度和評估預后。
【圖文】：

去上清。加入 1ml 破膜液，4℃避光反應 15 分鐘。加入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉(zhuǎn)/分鐘 5 分鐘，去上清。加入 5μl CD68-PerCP/Cy5.5 抗體 5μl，4℃避光反應 30 分鐘。加入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉(zhuǎn)/分鐘 5 分鐘，去上清。加入 200μlPBS 緩沖液重懸細胞，上機檢測。設(shè)門方式及分析如圖Flowjo 軟件分析結(jié)果。

入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉(zhuǎn)/分5 分鐘，去上清；1ml 固定液，混勻，4℃避光反應 15 分鐘；入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉(zhuǎn)/分5 分鐘，去上清；1ml 破膜液，混勻，4℃避光反應 15 分鐘；入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉(zhuǎn)/分5 分鐘，去上清；IFN-γ/IL-4 mix 抗體 7μl，4℃避光孵育 30 分鐘；入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉(zhuǎn)/分5 分鐘，去上清；200μlPBS 重懸細胞，，上機檢測。以 Flowjo 軟件分析結(jié)果。設(shè)2）。
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R551.3

【參考文獻】

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1 沈志祥;李莉;;表觀遺傳學藥物治療骨髓增生異常綜合征貧血[J];內(nèi)科理論與實踐;2010年04期

2 李麗娟;付蓉;王化泉;岳蘭竹;劉惠;王s

本文編號：2642340