【摘要】：目的:通過分析骨髓增生異常綜合征(MDS)患者骨髓巨噬細胞所占比例及其極化狀態(tài),并分析其與Th細胞活化、紅系分化與凋亡的關系,探討巨噬細胞在MDS發(fā)病機制中的作用及意義,為MDS貧血的治療提供新思路。方法:運用流式細胞術檢測骨髓增生異常綜合征患者與正常人骨髓巨噬細胞、M1型巨噬細胞、M2型巨噬細胞比例。并運用免疫組化、實時熒光定量PCR對流式結果進行驗證。酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測骨髓液上清IFH-γ、IL-4濃度。流式細胞術檢測Th細胞極化。流式細胞術檢測骨髓有核紅細胞分化及凋亡。分析MDS患者骨髓巨噬細胞與預后相關因素的相關性。并對MDS患者骨髓巨噬細胞與Th細胞極化、紅系分化與凋亡的相關性進行分析。結果:(1)低危MDS患者骨髓巨噬細胞比例顯著高于正常對照以及高危MDS患者,并且MDS患者M1型巨噬細胞比例與Th1細胞百分比呈現(xiàn)出正相關性;(2)低危MDS患者骨髓巨噬細胞出現(xiàn)異常極化,偏向于M1型巨噬細胞;(3)低危MDS患者CD45-細胞中,CD71~+CD235a~+細胞百分比與CD71~(int)CD235a~+百分比之比高于正常對照以及高危MDS患者,存在幼紅細胞分化阻滯,并且阻滯程度與骨髓巨噬細胞比例呈正相關;(4)低危MDS患者有核紅細胞凋亡率顯著增加,并且與M1型巨噬細胞占總巨噬細胞的百分比(M1%)呈正相關;(5)外周血血紅蛋白濃度與骨髓巨噬細胞比例呈負相關。(6)MDS患者骨髓巨噬細胞比例與IPSS積分呈負相關。(7)MDS患者骨髓巨噬細胞比例與骨髓CD34+細胞比例呈負相關。結論:巨噬細胞參與MDS異常免疫過程,低危MDS患者骨髓巨噬細胞比例增加并出現(xiàn)異常I型極化。骨髓巨噬細胞異常免疫狀態(tài)對紅系造血的負面影響可能是低危MDS患者貧血的原因之一。MDS患者骨髓巨噬細胞比例與IPSS積分及CD34+細胞比例呈負相關,或可提示疾病進展程度和評估預后。
【圖文】：

去上清。加入 1ml 破膜液，4℃避光反應 15 分鐘。加入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉/分鐘 5 分鐘，去上清。加入 5μl CD68-PerCP/Cy5.5 抗體 5μl，4℃避光反應 30 分鐘。加入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉/分鐘 5 分鐘，去上清。加入 200μlPBS 緩沖液重懸細胞，上機檢測。設門方式及分析如圖Flowjo 軟件分析結果。

入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉/分5 分鐘，去上清；1ml 固定液，混勻，4℃避光反應 15 分鐘；入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉/分5 分鐘，去上清；1ml 破膜液，混勻，4℃避光反應 15 分鐘；入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉/分5 分鐘，去上清；IFN-γ/IL-4 mix 抗體 7μl，4℃避光孵育 30 分鐘；入 2ml 含 1% BSA 的 PBS 緩沖液，水平離心機 1500 轉/分5 分鐘，去上清；200μlPBS 重懸細胞，，上機檢測。以 Flowjo 軟件分析結果。設2）。
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R551.3

【參考文獻】

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1 沈志祥;李莉;;表觀遺傳學藥物治療骨髓增生異常綜合征貧血[J];內科理論與實踐;2010年04期

2 李麗娟;付蓉;王化泉;岳蘭竹;劉惠;王s

本文編號：2642340