【摘要】：目的觀察二氫楊梅素(DMY)對(duì)氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)損傷的影響,并探討自噬在其中的作用。方法 DMY(0.01、0.10、1.00和10.00μmol/L)預(yù)處理HUVECs 2 h,用100.0 mg/L ox-LDL繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞24 h。以辛伐他汀作為陽(yáng)性對(duì)照組。采用噻唑藍(lán)法檢測(cè)細(xì)胞活力,Hoechst33258染色觀察細(xì)胞核形態(tài),透射電鏡觀察自噬體,Western blot檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(LC3)、Beclin-1和p62/SQSTM1的表達(dá),觀察自噬抑制劑對(duì)DMY作用的影響。結(jié)果與對(duì)照組比較,ox-LDL組細(xì)胞的存活率降低(P0.05),細(xì)胞核呈集中高強(qiáng)度藍(lán)色熒光,固縮致密濃染或碎塊狀致密濃染,顏色發(fā)白,細(xì)胞核較小,形態(tài)不規(guī)則,自噬體和自噬溶酶體數(shù)量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表達(dá)和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上調(diào),而p62的表達(dá)下調(diào)(P0.05)。與ox-LDL組比較,0.1、1.0和10.0μmol/L DMY預(yù)處理組細(xì)胞存活率均升高;細(xì)胞核熒光強(qiáng)度降低,核固縮致密濃染和碎塊狀致密濃染減少,形態(tài)較規(guī)則;1.0μmol/L DMY預(yù)處理組的自噬體和自噬溶酶體數(shù)量增加;Beclin-1、LC3-Ⅱ的表達(dá)和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值上調(diào),而p62的表達(dá)下調(diào)(P0.05)。自噬抑制劑3-MA部分抵消DMY抑制ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs存活率降低(P0.05)。結(jié)論 DMY能抑制ox-LDL誘導(dǎo)的HUVECs損傷,其機(jī)制與誘導(dǎo)自噬有關(guān)。
【圖文】：

表達(dá)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值（t=2.806和2.721，P=0.022和0.028）比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，ox-LDL組和DMY單獨(dú)處理組均上調(diào)；而p62表達(dá)比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.149和3.068，P=0.012和0.015），ox-LDL組和DMY單獨(dú)處理組均下調(diào)。與ox-LDL組比較，1.0μmol/LDMY預(yù)處理組的Beclin-1（t=2.957，P=0.018）、LC3-Ⅱ（t=2.731，P=0.026）的表達(dá)、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值（t=2.958，P=0.018）比較，，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，1.0μmol/LDMY預(yù)處理組上調(diào)；而p62表達(dá)比較，經(jīng)LSD-t檢驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)圖3HUVECs中自噬體（透射電鏡）ABCDEFGHABCDA：對(duì)照組；B：ox-LDL組；C：1.0μmol/LDMY單獨(dú)處理組；D：1.0μmol/LDMY預(yù)處理組。箭頭示自噬體或自噬溶酶體中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志第27卷·34·

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