【摘要】:目的:通過(guò)替普瑞酮預(yù)處理SD大鼠,建立心肌缺血再灌注損傷模型,觀察SD大鼠心肌形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)改變、熱休克蛋白70(HSP70)表達(dá)、血生化(LDH、CK、CK-MB)變化,探討替普瑞酮預(yù)處理對(duì)心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用。方法:隨機(jī)選取30只SD大鼠,雌雄不限,體重控制在300-350g,分成3組:假手術(shù)組(Sham組10只)、缺血再灌注組(I/R組10只)、替普瑞酮+缺血再灌注組(GGA組10只)。Sham組:術(shù)前3天每天予以生理鹽水2ml灌胃一次(共三次),術(shù)前當(dāng)天禁食禁飲,左前降支走行區(qū)域只穿縫線不結(jié)扎,150分鐘后頸動(dòng)脈采血,并摘除心臟進(jìn)行下一步處理。I/R組:術(shù)前3天每天予以生理鹽水2ml灌胃一次(共三次),術(shù)前當(dāng)天禁食禁飲,左前降支走行區(qū)域穿過(guò)縫線并結(jié)扎左前降支,30分鐘后剪斷縫線恢復(fù)左前降支血供,恢復(fù)血供120分鐘后(實(shí)驗(yàn)從結(jié)扎開(kāi)始計(jì)時(shí)總時(shí)間150分鐘)頸動(dòng)脈采血,并摘除心臟進(jìn)行下一步處理。GGA組:術(shù)前3天每天予以替普瑞酮溶于生理鹽水(稱量GGA組SD大鼠并編號(hào),按400mg/kg/d計(jì)算出GGA組每只老鼠每天所需替普瑞酮量)2ml灌胃一次(共三次),后續(xù)步驟同缺血再灌注組(I/R組)。頸動(dòng)脈采集動(dòng)脈血液分析LDH、CK、CK-MB濃度變化,心臟摘除后分別行HE染色、心肌組織Western Blot測(cè)hsp70、電鏡透視觀察心肌結(jié)構(gòu)。結(jié)果:1.三組實(shí)驗(yàn)所得血清ldh、ck、ck-mb濃度通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果為:gga組和i/r組所測(cè)血清ldh、ck、ck-mb濃度值要高于sham組,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;gga組較i/r組所測(cè)ldh、ck、ck-mb濃度降低,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.he染色結(jié)果:sham組心肌組織染色均勻,形態(tài)正常,結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞完整,規(guī)律排列,未見(jiàn)出血壞死,可見(jiàn)少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),未見(jiàn)明顯異常。i/r組心肌心肌排列紊亂,肌纖維出現(xiàn)血腫壞死,心肌破壞嚴(yán)重,肌纖維斷裂,可見(jiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。gga組he染色心肌組織排列紊亂,但較i/r組紊亂程度低;肌纖維間質(zhì)水腫,部分心肌壞死,水腫壞死程度較i/r組低;可見(jiàn)中量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。3.三組實(shí)驗(yàn)心肌組織westernblot測(cè)hsp70灰度比值通過(guò)統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果為:sham組灰度比值:0.25±0.04、gga組灰度比值:0.69±0.04、i/r組灰度比值:0.47±0.08。替普瑞酮預(yù)處理的缺血再灌注組hsp70灰度比值(0.69±0.04)與假手術(shù)組(0.25±0.04)對(duì)比,gga組明顯要高,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;缺血再灌注組hsp70灰度比值(0.47±0.08)較假手術(shù)組(0.25±0.04)高,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;替普瑞酮預(yù)處理的缺血再灌注組hsp70灰度比值(0.69±0.04)與缺血再灌注組hsp70灰度比值(0.47±0.08)比較,gga組hsp70灰度比值高,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.sham組心肌組織超微結(jié)構(gòu)(電鏡)示心肌形態(tài)正常,結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞內(nèi)線粒體、細(xì)胞核等結(jié)構(gòu)完整,線粒體內(nèi)有高度發(fā)達(dá)的嵴,細(xì)胞規(guī)律排列,肌絲均勻,細(xì)胞內(nèi)無(wú)空泡狀;I/R組示大多數(shù)心肌細(xì)胞出現(xiàn)核固縮或破裂,肌纖維排列不規(guī)則及線粒體腫脹(部分線粒體內(nèi)嵴破壞嚴(yán)重、少部分出現(xiàn)空泡狀),肌絲排列紊亂,部分肌絲斷裂;GGA組心肌組織超微結(jié)構(gòu)(電鏡)示口服GGA預(yù)處理后大鼠心肌結(jié)構(gòu)得到保護(hù),心肌細(xì)胞核完整,線粒體腫脹程度較I/R組輕,線粒體內(nèi)嵴較密集,未見(jiàn)明顯空泡狀,提示在替普瑞酮預(yù)處理的缺血再灌注組(GGA組)心肌超微結(jié)構(gòu)破壞程度低于缺血再灌注組(I/R組)。結(jié)論:1.替普瑞酮預(yù)處理能有效誘導(dǎo)心肌熱休克蛋白70表達(dá);2.替普瑞酮預(yù)處理減少大鼠心肌缺血再灌注后LDH、CK、CK-MB的釋放,減輕心肌細(xì)胞損傷;3.替普瑞酮預(yù)處理改善心肌缺血再灌注時(shí)組織形態(tài)學(xué)破壞,起到心肌保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】:南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類(lèi)號(hào)】:R542.2
【參考文獻(xiàn)】
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2556711
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