【摘要】：目的探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)結(jié)合肝素/殼聚糖層層自組裝技術(shù)修飾異種去細(xì)胞血管,提高其生物相容性。方法采用肝素/殼聚糖在異種去細(xì)胞血管表面層層自組裝,以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺(EDC)進(jìn)行化學(xué)交聯(lián),并負(fù)載VEGF。采用掃描電鏡檢測(cè)血管表面微結(jié)構(gòu),甲苯胺藍(lán)法定量分析肝素結(jié)合量及緩釋性能,采用ELISA法定量分析VEGF結(jié)合量及緩釋性能,抗凝血活性和血小板黏附試驗(yàn)檢測(cè)材料血液相容性,采用細(xì)胞增殖試驗(yàn)評(píng)價(jià)材料的細(xì)胞增殖能力。結(jié)果肝素/殼聚糖層層自組裝在異種去細(xì)胞血管表面形成納米顆粒樣結(jié)構(gòu),EDC化學(xué)交聯(lián)顯著降低肝素及VEGF釋放速率,并提高血管的血液相容性。層層自組裝/化學(xué)交聯(lián)并負(fù)載VEGF促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖。結(jié)論載VEGF層層自組裝技術(shù)修飾異種去細(xì)胞血管,能夠改善其生物相容性,促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖。
【圖文】：

26山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)55卷5期圖1DS組和LBL5/EDC-DS組表面微結(jié)構(gòu)的表達(dá)A:DS組(×5000);B:DS組(×10000);C:LBL5/EDC-DS組(×5000);D:LBL5/EDC-DS組(×10000)。Fig．1MicrostructureofDSandLBL5/EDC-DSgroupsA:DSgroup(×5000);B:DSgroup(×10000);C:LBL5/EDC-DSgroup(×5000);D:LBL5/EDC-DSgroup(×10000)．表1不同時(shí)間點(diǎn)各組肝素釋放百分比(n=8)釋放天數(shù)(d)LBL5/EDC-DS組LBL5-DS組126．8±4．1*43．5±9．1341．7±6．2*66．8±7．9750．7±8．7*75．2±15．11059．7±11．4*84．3±10．81465．9±7．2*89．4±6．9*P＜0．05vs同一時(shí)間點(diǎn)LBL5-DS組。表2不同時(shí)間點(diǎn)各組VEGF釋放百分比(n=8)時(shí)間(d)50ngVEGFLBL5-DS組LBL5/EDC-DS組125．3±4．6*16．6±4．5346．7±7．3*27．9±8．9755．8±11．1*39．7±14．61060．6±15．7*41．7±10．11463．9±16．7*43．5±10．8時(shí)間(d)200ngVEGFLBL5-DS組LBL5/EDC-DS組131．6±11．9*20．7±7．7353．6±15．4*32．8±8．1760．3±14．9*42．0±8．41062．4±10．8*47．9±12．21467．1±12．7*52．9±8．8*P＜0．05vs同一濃度VEGF下LBL5/EDC-DS組。圖2各組VEGF釋放曲線的表達(dá)Fig．2VEGFreleaseperformancebyelutiontestinthedeliv-eryofdifferentgroups2．4DS組和LBL5/EDC-DS組血管片對(duì)血液相容性的影響DS組血管片表面可見少量血小板黏附，血小板伸出大量顆粒狀偽足。10個(gè)不同平面計(jì)數(shù)血小板為(60±12)個(gè)/cm2。LBL5/EDC-DS組表面血小板數(shù)量明顯減少，血小板形態(tài)較為規(guī)則，未形成偽足，10個(gè)不同平面計(jì)數(shù)血小板為(12±5)個(gè)/cm2

同時(shí)間點(diǎn)各組VEGF釋放百分比(n=8)時(shí)間(d)50ngVEGFLBL5-DS組LBL5/EDC-DS組125．3±4．6*16．6±4．5346．7±7．3*27．9±8．9755．8±11．1*39．7±14．61060．6±15．7*41．7±10．11463．9±16．7*43．5±10．8時(shí)間(d)200ngVEGFLBL5-DS組LBL5/EDC-DS組131．6±11．9*20．7±7．7353．6±15．4*32．8±8．1760．3±14．9*42．0±8．41062．4±10．8*47．9±12．21467．1±12．7*52．9±8．8*P＜0．05vs同一濃度VEGF下LBL5/EDC-DS組。圖2各組VEGF釋放曲線的表達(dá)Fig．2VEGFreleaseperformancebyelutiontestinthedeliv-eryofdifferentgroups2．4DS組和LBL5/EDC-DS組血管片對(duì)血液相容性的影響DS組血管片表面可見少量血小板黏附，血小板伸出大量顆粒狀偽足。10個(gè)不同平面計(jì)數(shù)血小板為(60±12)個(gè)/cm2。LBL5/EDC-DS組表面血小板數(shù)量明顯減少，血小板形態(tài)較為規(guī)則，未形成偽足，10個(gè)不同平面計(jì)數(shù)血小板為(12±5)個(gè)/cm2。見圖3。如表3所示，，DS組血管片無抗凝血活性。與DS組比較，LBL5/EDC-DS組血管片各個(gè)時(shí)間點(diǎn)
【作者單位】： 山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院心外科;山東大學(xué)附屬省立醫(yī)院婦科;中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院心外科;
【基金】：山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計(jì)劃(2013WS0115)
【分類號(hào)】：R318.08;R54


本文編號(hào)：2546724