【摘要】：背景:心力衰竭是冠心病、瓣膜病、心肌病等心血管疾病發(fā)生發(fā)展的終末階段,已成為當今世界亟待解決的公共衛(wèi)生問題之一。擴張型心肌病是心力衰竭的病因之一,具有較高的發(fā)病率及死亡率,其病因及發(fā)病機制還有待于進一步研究。有觀點認為,心力衰竭可以被看作是一種以反復(fù)炎癥為特征的全身性、系統(tǒng)性炎癥疾病。炎癥因子、細胞自噬在心力衰竭過程中起著重要作用。細胞自噬是心肌細胞受到外來刺激時的保護機制還是導(dǎo)致心肌細胞進一步受損的原因,這一問題尚未有定論。他汀類藥物除了具有調(diào)脂的功能外,還可以抗氧化應(yīng)激、抗炎癥、改善內(nèi)皮功能,防治動脈粥樣硬化,被推薦用于缺血性心臟病的治療,然而其對擴張型心肌病等其他病因?qū)е滦牧λソ叩寞熜写嬖跔幾h。曲美他嗪作為心血管保護藥物,能夠增強心肌細胞能量代謝,改善內(nèi)皮功能,對抗氧化應(yīng)激、抗炎癥等,但其對心肌細胞自噬水平的影響還尚未可知。目的:通過觀察擴張型心肌病大鼠的生存狀態(tài)、心功能情況、心肌組織形態(tài)、炎癥因子及細胞自噬水平,探討炎癥因子及細胞自噬在擴張型心肌病心力衰竭中的作用。同時觀察他汀類調(diào)脂藥或曲美他嗪對大鼠心功能、心肌組織形態(tài)、炎癥因子及自噬水平的影響,探討其可能存在的作用機制,為臨床擴張型心肌病致心力衰竭的藥物治療提供一定的理論基礎(chǔ)。方法:本實驗從52只SPF級成年雄性Wistar大鼠中隨機抽取42只,以腹腔注射阿霉素溶液的方式制備擴張型心肌病大鼠模型,另外10只作為正常對照組(Control組),腹腔注射等量的生理鹽水。10周后,將制備成功的擴張型心肌病大鼠模型31只(模型制備過程中死亡11只),隨機分成三組:瑞舒伐他汀組(RSFTT組,n=10),將瑞舒伐他汀以2.5mg/kg/d對大鼠進行灌胃治療,療程4周;曲美他嗪組(QMTQ組,n=11),將曲美他嗪以15 mg/kg/d對大鼠進行灌胃治療,療程4周;生理鹽水組(Saline組,n=10),給予等量的生理鹽水對大鼠進行灌胃,療程為4周。療程結(jié)束后,應(yīng)用超聲心動圖、血流動力學(xué)檢測等評價心功能,通過HE染色、Masson染色、TUNEL及DAPI雙熒光染色來觀察心肌組織形態(tài),應(yīng)用ELISA法測定血清中IL-1β、IL-6、TNF-α等炎癥因子水平,通過Western-Blot、RT-PCR檢測心肌細胞自噬相關(guān)蛋白及自噬相關(guān)基因m RNA的表達,以評估心肌細胞自噬水平。結(jié)果:1、在制備擴張型心肌病模型的過程中,11只大鼠死亡,死亡率為21.15%;Control組大鼠整體情況最佳,活潑好動,無脫毛、厭食現(xiàn)象出現(xiàn);Saline組大鼠整體情況最差,精神萎靡,活動及進食差,脫毛嚴重,毛色灰暗,終體重較初體重顯著減低(P0.01);RSFTT組及QMTQ組大鼠整體情況較Saline組有不同程度的改善,表現(xiàn)為精神狀態(tài)逐漸好轉(zhuǎn),活動及進食增加,脫毛減少,大鼠終體重較Saline組明顯增加(P0.01)。2、與Control組相比,Saline組NT-pro BNP、hs-Tn T、肺指數(shù)、心室體重比LVIDs、LVIDd增加,LVEF、LVFS、CO、SV、+dp/dtmax、-dp/dtmax、LVPWs及LVPWd減少(P0.05或P0.01);與Saline組相比,RSFTT組及QMTQ組NT-pro BNP、hs-Tn T、肺指數(shù)、LVIDs、LVIDd減少,LVEF、LVFS、CO、SV、+dp/dtmax及-dp/dtmax增加(P0.05或P0.01)。3、HE染色、Masson染色、TUNEL及DAPI雙熒光染色顯示:Control組大鼠心肌細胞大小、形態(tài)、結(jié)構(gòu)及排列均正常;Saline組大鼠心肌細胞部分出現(xiàn)空泡樣變性,心肌細胞凋亡,心肌細胞排列紊亂,胞質(zhì)染色不均,疏松水腫,細胞間隙明顯變大,心肌細胞附近可見廣泛的藍色膠原纖維沉積,血管破裂及血細胞浸潤,肌纖維排列紊亂;與Saline組相比,RSFTT組及QMTQ組在上述組織學(xué)改變上有不同程度的改善。4、ELISA法測定炎癥因子(IL-1β、IL-6、TNF-α及hs-CRP)水平顯示:與Control組相比,Saline組炎癥因子水平顯著升高(P0.01);與Saline組相比,QMTQ組及RSFTT組能夠明顯降低炎癥因子水平(P0.01)。5、Western-Blot及RT-PCR結(jié)果顯示:與Control組相比,Saline組P62表達下降(P0.05),LC3B、LC3B II/I及自噬相關(guān)基因(Beclin1、Atg5、Atg7、Atg14)m RNA表達明顯升高(P0.01),自噬水平上調(diào);與Saline組相比,RSFTT組及QMTQ組P62表達升高(P0.05或P0.01),LC3B及自噬相關(guān)基因m RNA表達均明顯降低(P0.01),自噬水平下調(diào);與RSFTT組相比,QMTQ組對于自噬水平的影響更顯著。結(jié)論:1.炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α及hs-CRP水平可能與擴張型心肌病大鼠的心功能惡化程度呈正相關(guān)。2.擴張型心肌病大鼠心肌細胞損傷加重可能與心肌細胞自噬水平升高有關(guān)。3.炎癥反應(yīng)與自噬在擴張型心肌病大鼠心力衰竭進展中可能有協(xié)同作用。4.瑞舒伐他汀和曲美他嗪可以通過降低相關(guān)炎癥因子水平減輕擴張型心肌病大鼠的心肌細胞損傷,改善其心功能。5.瑞舒伐他汀和曲美他嗪可能通過抑制炎癥反應(yīng),下調(diào)心肌細胞自噬水平,改善擴張型心肌病大鼠的心功能。
【圖文】：

16動及進食增加，脫毛減少，大鼠終體重較Saline組明顯增加（P<0.01）。四組大鼠的初體重（實驗前）與終體重（麻醉前）的比較見表1，圖1 。表1 各組大鼠體重的變化（ x±s）組別 例數(shù) 初體重（g） 終體重（g）Control 組 10 214.32±11.31 214.65±10.51Saline 組 10 215.65±8.52 159.91±14.55**RSFTT 組 10 213.89±7.91 204.43±4.03*##QMTQ 組 11 215.77±10.14 201.58±12.41*##注：與初體重相比，*P<0.05，**P<0.01；與 Saline 終體重組相比，##P<0.01。圖 1 各組大鼠體重變化注：與初體重相比，，*P<0.05，**P<0.01；與 Saline 終體重組相比，##P<0.01。1.2.2 各組大鼠心功能的變化1.2.2.1 各組大鼠 NT-proBNP、hs-TnT 水平的變化與 Control 組相比，Saline 組 NT-proBNP 及 hs-TnT 水平顯著升高（P<0.01）

天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文 結(jié)果表 2 各組大鼠 NT-proBNP、hs-TnT 水平的變化（ x±s）Control 組（n=10）Saline 組（n=10）RSFTT 組（n=10）QMTQ 組（n=11）NT-proBNP 134.88±28.65 357.08±35.25** 240.92±28.62**##235.12±18.33**hs-TnT 58.27±21.07 199.71±79.69** 114.80±19.71##102.53±39.81##注：與 Control 組相比，**P<0.01；與 Saline 組相比，##P<0.01。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R541.6

【參考文獻】

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1 蔡永青;胡建輝;李小麗;;炎癥因子調(diào)節(jié)細胞自噬的研究進展[J];免疫學(xué)雜志;2016年09期

2 陳華玲;馬曉鸝;袁圣亮;;自噬與炎癥的關(guān)系研究進展[J];山東醫(yī)藥;2016年23期

3 吳振陽;;BNP在慢性心力衰竭診斷、治療及預(yù)后中的應(yīng)用價值[J];中國醫(yī)藥指南;2016年15期

4 張軍;谷翔;黃問銀;李衛(wèi)東;;自噬在糖尿病心肌病中的作用機制研究[J];中國心血管病研究;2016年05期

5 馬夢晴;林先和;;自噬參與缺血性心臟病的發(fā)生發(fā)展[J];安徽醫(yī)藥;2015年09期

6 楊其彬;周京國;;自噬與Toll樣受體NOD樣受體信號通路相互調(diào)控在痛風(fēng)炎癥反應(yīng)中的作用[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2015年05期

7 陳松峰;邵增務(wù);;自噬相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路研究進展[J];國際骨科學(xué)雜志;2013年04期

8 徐菲菲;劉秀華;;心肌自噬的生理與病理生理作用[J];生理科學(xué)進展;2013年03期

9 黃嵐;王江;;心力衰竭發(fā)病機制的研究現(xiàn)狀[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年11期

10 付艷東;趙翠萍;;PCI術(shù)后心肌缺血再灌注損傷機制與保護治療[J];新醫(yī)學(xué);2012年06期

本文編號：2540005