發(fā)布時(shí)間：2019-08-26 16:06

【摘要】：目的探討蛻皮甾酮對同型半胱氨酸(Hcy)誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株CRL-1730凋亡的影響。方法體外常規(guī)培養(yǎng)人血管內(nèi)皮細(xì)胞CRL-1730,細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒法檢測蛻皮甾酮對CRL-1730細(xì)胞增殖活力的影響;Hcy處理人血管內(nèi)皮細(xì)胞CRL-1730建立損傷模型,分組為空白對照組、蛻皮甾酮高劑量組(Hcy+1.5μmol/L蛻皮甾酮)、蛻皮甾酮中劑量組(Hcy+1.0μmol/L蛻皮甾酮)、蛻皮甾酮低劑量組(Hcy+0.5μmol/L蛻皮甾酮)、Hcy組;流式細(xì)胞術(shù)檢測CRL-1730細(xì)胞凋亡率,并利用熒光染色進(jìn)行細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)觀察;RT-PCR法檢測CRL-1730細(xì)胞內(nèi)Bax、Bcl-2及Caspase-3基因的表達(dá);采用Western blot法檢測CRL-1730細(xì)胞內(nèi)Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase-3蛋白表達(dá)。結(jié)果所選濃度蛻皮甾酮對CRL-1730細(xì)胞增殖活性無明顯影響;流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示經(jīng)Hcy處理后的CRL-1730細(xì)胞凋亡率明顯增高,但經(jīng)過不同濃度的蛻皮甾酮處理后,Hcy誘導(dǎo)的CRL-1730細(xì)胞凋亡率明顯下降;與空白對照組比較,Hcy組CRL-1730細(xì)胞Bax和cleaved-Caspase-3的表達(dá)明顯增高,Bcl-2的表達(dá)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與Hcy組比較,經(jīng)過低、中、高劑量蛻皮甾酮處理后,Hcy誘導(dǎo)的CRL-1730細(xì)胞Bcl-2表達(dá)上調(diào),Bax和cleaved-Caspase-3表達(dá)下調(diào);與空白對照組比較,Hcy組CRL-1730細(xì)胞Bax mRNA和Caspase-3mRNA的表達(dá)明顯增高,Bcl-2 mRNA的表達(dá)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與Hcy比較,經(jīng)過低、中、高劑量蛻皮甾酮處理后,CRL-1730細(xì)胞Bcl-2 mRNA表達(dá)上調(diào),Bax mRNA和Caspase-3 mRNA表達(dá)下調(diào)。結(jié)論蛻皮甾酮對Hcy誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞CRL-1730凋亡具有保護(hù)作用,這為其治療心血管疾病提供了依據(jù)。
【圖文】：

1，P＞0.05)。見圖1。2．2蛻皮甾酮對Hcy誘導(dǎo)CＲL-1730細(xì)胞凋亡的影響在所選濃度范圍內(nèi)，，蛻皮甾酮能抑制Hcy誘導(dǎo)的CＲL-1730細(xì)胞凋亡。與空白對照組凋亡率(5.157±1.222)%比較，Hcy組(23.970±2.169)%CＲL-1730細(xì)胞凋亡率明顯上升(P＜0.01)，提示Hcy能誘導(dǎo)CＲL-1730細(xì)胞凋亡。與Hcy組比較，蛻皮甾酮0．5μmol/L組(18.130±2.084)%、蛻皮甾酮1μmol/L組(12.488±1.324)%、蛻皮甾酮1.5μmol/L組(8.307±1.888)%CＲL-1730細(xì)胞凋亡率逐漸下降(P＜0.01)，且三組組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=143.438，P＜0.01)。見圖2。圖1CCK-8法檢測各組CＲL-1730細(xì)胞存活率(n=6，xs

本文編號：2529419