【摘要】：目的：niRNALet-7家族是最早在線蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的miRNA之一,人類miRNALet-7包含12個成員,它們在腫瘤、干細胞生物學(xué)、衰老和代謝等許多領(lǐng)域的功能都引起了重視。最近的研究發(fā)現(xiàn)其成員在心血管系統(tǒng)中高度表達,其中l(wèi)et-7i在冠心病患者中的表達明顯下降,let-7i和和TLR4的表達水平明顯負相關(guān),let-7i主要是通過負向調(diào)節(jié)TLR4,進而抑制TLR4信號通路來減少促炎因子和趨化因子如TNF-α、IL-6、IL-8、IL-12等的生成及釋放,從而延緩冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展,提示TLR4可能對動脈粥樣硬化過程有促進作用。DNA甲基化可以通過改變DNA的空間形態(tài),從而抑制DNA與相關(guān)蛋白結(jié)合能力,抑制相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄進而抑制其表達。目前有關(guān)動脈粥樣硬化病變進展的研究較少,我們課題組前期的MicroRNA芯片及基因芯片篩選發(fā)現(xiàn)：niRNA let-7i在冠心病的病變進展組明顯降低,TLR4基因啟動子甲基化在病變進展組也明顯降低,miRNA let-7i可能與動脈粥樣硬化相關(guān),同時我們認為nicroRNA let7i的靶向目標TLR4基因甲基化也可以通過降低TLR4的表達而參與冠心病非罪犯斑塊進展,為此,我們通過選取249例冠心病兩次造影患者,明確其血漿niRNA let-7i及TLR4基因甲基化與斑塊進展相關(guān)性,為進一步了解斑塊進展的機制提供方向,為冠心病的治療提供新的作用靶點提供依據(jù)。方法：①.選取2010年8月1日至2013年5月31日間行支架植入術(shù)后12個月左右行CAG復(fù)查并保存有血樣的冠心病患者249例,3D-QCA分析所有入選患者兩次造影結(jié)果直徑狹窄率,選取進展程度最大的非罪犯冠狀動脈粥樣硬化病變(No-culprit coronary lesion,NCCL)作為目標病變,非罪犯病變(NCCL)進展經(jīng)定義為：(1)原直徑狹窄50%以上(含50%)的病變復(fù)查造影直徑減少大于等于10%；(2)原直徑狹窄小于50%的病變直徑減少大于等于30%；(3)在原先正常的冠脈節(jié)段出現(xiàn)了新的直徑狹窄大于等于30%的病變；(4)原病變進展為完全阻塞。根據(jù)病變進展的定義將其分為進展組與非進展組；②.RT-PCR檢測249例患者血漿中MicroRNAlet-7i水平,比較進展組與非進展組循環(huán)MicroRNAlet7i差異③.提取249例患者的DNA,經(jīng)硫酸氫鹽硫化,PCR擴增硫化后待檢測基因,焦磷酸測序檢測所有患者的甲基化水平,比較進展組和非進展組TLR4基因甲基化水平差異。結(jié)果：非罪犯冠狀動脈斑塊進展組血漿中MicroRNA Let-7i (1.39±1.82 vs 3.09±5.03,P=0.019)明顯低于非進展組。非罪犯冠狀動脈粥樣硬化斑塊進展組MicroRNA Let-7i靶基因TLR4基因啟動子區(qū)甲基化率明顯低于非進展組(9.78±3.38 vs 12.95±5.23,P0.001)。結(jié)論：血漿中MicroRNA Let-7i降低與冠狀動脈粥樣硬化病變進展明顯相關(guān)。MicroRNALet-7i靶基因TLR4啟動子區(qū)甲基化降低與冠狀動脈粥樣硬化病變進展明顯相關(guān)。MicroRNAlet-7i及TLR4基因甲基化可以抑制動脈粥樣硬化的進展。目的：冠心病主要在老年人中出現(xiàn),但是也有一年輕人罹患該類疾病。已經(jīng)有報道7-10%的心肌梗死為小于45歲年輕患者。年輕冠心病患者的冠心病危險因素與其他年齡段冠心病患者相同,但是年輕冠心病患者個體多有多個危險因素,吸煙和血脂異常是年輕冠心病患者常見的相關(guān)危險因素。許多研究證實年輕冠心病患者的預(yù)后要好于年老冠心病,然而也有一些研究對冠心病患者進行了長期預(yù)后隨訪,發(fā)現(xiàn)冠心病患者15年總死亡率為30%,而年輕冠心病患者為45%,相關(guān)研究的結(jié)果明顯不相同,年輕冠心病仍然有很多問題需要我們?nèi)パ芯�。年輕冠心病患者發(fā)病年齡早,生存周期長,是一類比較特殊的群體,目前為止,有關(guān)年輕冠心病患者冠脈斑塊進展速度的研究較少,年輕冠心病發(fā)病年齡早,其動脈粥樣硬化斑塊進展速度是否快于非年輕冠心病患者,目前未見有相關(guān)研究,本文為回顧性觀察研究,主要研究年輕冠心病患者與非年輕冠心病患者斑塊進展速度的差異。方法：選取2008年1月至2013年5月曾經(jīng)在我院行經(jīng)皮冠狀動脈介入手術(shù)同時復(fù)查冠脈造影的冠心病患者共848名。3D-QCA分析所有入選患者兩次造影結(jié)果直徑狹窄率,選取進展程度最大的冠狀動脈非罪犯病變(No-culprit coronary lesion,NCCL)作為目標斑塊,非罪犯病變(NCCL)進展經(jīng)3D-QCA測量并定義為：(1)原直徑狹窄50%以上(含50%)的病變復(fù)查造影直徑減少大于等于10%;(2)原直徑狹窄小于50%的病變直徑減少大于等于30%;(3)在原先正常的冠脈節(jié)段出現(xiàn)了新的直徑狹窄大于等于30%的病變;(4)原病變進展為完全阻塞。根據(jù)病變進展的定義將其分為進展組與非進展組,①將年輕冠心病(45歲)作為病變進展危險因素引入回歸分析,COX回歸比率模型分析病變進展的獨立危險因素,繪制風(fēng)險模型；②根據(jù)第一次造影年齡將冠心病患者分為年輕冠心病(45歲)和非年輕冠心病(≥45歲)兩組,Kaplan-Meier去估計兩組患者的兩組患者的無斑塊進展事件存活率,繪制生存曲線；繪制兩組患者兩次造影間直徑狹窄率的累積曲線,比較兩次造影兩組患者的病變累積曲線的不同;分析年輕冠心病患者及非年輕冠心病兩組患者的臨床特征及危險因素差異,尋找年輕冠心病患者造成病變進展率較快的原因。結(jié)果：①.兩次造影平均時間為10.79月,136(16.0)名患者非罪犯冠狀動脈粥樣硬化病變呈現(xiàn)進展。進展組患者男性比率較高(88.2%vs.80.1%,p=0.03),ST段抬高性心肌梗死患者較多(39.0%vs.13.5%,p0.001),年輕患者的比率明顯高于非進展組(19.9%vs.10%,p=0.002)。斑塊進展組患者初次造影時的直徑狹窄百分值明顯小于非進展組(32.21±13.24%vs.35.03±13.01%,p=0.021),病變進展組的最小管腔面積大于病變非進展組(3.41±2.08 mm2 vs.3.99±2.75 mm2,respectively;p.0.018)。初次造影時,非罪犯病變進展組和非進展組所有的血脂指標無顯著的差異,第二次造影時,進展組患者血漿低密度脂蛋白水平高于非進展組(2.24±0.85 mmol/L vs 2.10± 0.75 mmol/L;P=0.046):進展組患者高密度脂蛋白水平明顯低于非進展組(1.01±0.27 mmol/L vs 1.07±0.30 mmol/L;P=0.027)。其他臨床指標無明顯差異。②多變量COX回歸分析顯示發(fā)病年齡早(45歲)及心肌梗死是非罪犯冠狀動脈病變進展的獨立危險因素。與非年輕冠心病患者(45歲)相比,年輕冠心病患者的風(fēng)險比為(Crude Hazard Ratio)為2.17(95%CI 1.42-3.30；P0.001),經(jīng)調(diào)整性別、ST段抬高性心肌梗死、體重指數(shù),舒張期及收縮期血壓,血脂水平,快速血糖,吸煙,飲酒,高血壓,家族心臟病史,糖尿病,藥物使用和斑塊特征后,調(diào)整后風(fēng)險比(adjusted HR)仍然具有顯著意義,為1.70(95%CI 1.06-2.72；P=0.029)：心肌梗死為病變進展的另外一獨立危險因素,首次造影為ST抬高性心肌梗死的患者(STEMI)與首次造影為非ST抬高性心肌梗死患者相比,其非罪犯病變(NCCL)進展的風(fēng)險比(Crude Hazard Ratio)為2.83(95%CI 2.00-3.99;P0.001),經(jīng)調(diào)整性別、ST段抬高性心肌梗死、體重指數(shù),舒張期及收縮期血壓,血脂水平,快速血糖,吸煙,飲酒,高血壓,家族心臟病史,糖尿病,藥物使用和病變特征后,其風(fēng)險比仍具有顯著意義為2.62(95%CI 1.79-3.84；P0.001);Kaplan-Meier生存曲線顯示年輕冠心病患者的無病變進展事件存活率明顯低于非年輕冠心病患者。③所有患者中有98位年齡小于45歲,與非年輕冠心病患者相比,年輕冠心病患者多為男性(93.9%vs 79.7%；P0.001),吸煙(64.3%vs 39.5%；P0.001)飲酒及心肌梗死的比率較高(27.6%vs 16.3%；P=0.01),高血壓比率較低(52.0%vs 65.5%；P=0.01)。年輕冠心病患者BMI(26.66±3.39 kg/m2 vs 25.84±3.04 kg/m2；P=0.013)、血尿酸水平(357.70±85.31μmol/L vs 330.97±86.55 μmol/L;P=0.005).舒張期血壓水平(75.92±1068 mmHg vs 73.37士10.37 mm Hg;P=0.023)較高,而收縮期血壓水平(123.60±14.56 mm Hg vs 127.31±15.52 mmHg；P=0.026)較低;3D-QCA分析非罪犯斑塊發(fā)現(xiàn),年輕冠心病患者所有的兩次造影NCCL特征改變都明顯大于非年輕冠心病患者。結(jié)論：1.年輕冠心病患者非罪犯動脈粥樣硬化病變進展明顯快于非年輕冠心病患者;心肌梗死為動脈粥樣硬化病變進展的另外一個獨立危險因素;2.年輕冠心病患者多具有多重危險因素,男性、吸煙、飲酒、及ST段抬高性心肌梗死的比率較高,患高血壓比率較低;
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圖片說明： 能夠幫助我們更加準確的判斷病變狹窄的進展。逡逑圖１是用３Ｄ邋ＱＣＡ分析冠狀動脈粥樣硬化病變進展的實例，ａ＾ｂ顯示基線時逡逑回旋支病變的最小管腔直徑為２．２２ｍｍ，最小管腔面積為４．１５ｍｍ２，斑塊體積是逡逑９．８５ｍｍ３；邋Ｃ，ｄ則顯示隨訪造影時與基線相同部位回旋支病變的最小管腔直徑為逡逑
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圖片說明： ２３年輕冠也病及非年輕冠也病患者基線臨床特征逡逑年輕冠也病和非年輕冠必病患者的基線臨床特征見表５，所有患者中有９８逡逑位年齡小于４５歲，，與非年輕冠也病患者相比，年輕冠也病患者多為男性（９３．９％邋ＶＳ逡逑７９．７％；邋Ｐ邋＜邋０．００１），吸煙（６４．３0／0邋ＶＳ邋３９．５％邋Ｐ邋＜邋０．００１）飲酒化邋１１、肌梗死的比率較高逡逑口７．６％邋ＶＳ邋１６．３＊？／0；邋Ｐ邋＝邋０．０１），高血壓比率較低口２．０0／0邋ＶＳ邋６５．５＜？／0；邋Ｐ邋＝邋０．０１）。年輕冠逡逑±．．±．＝．、
【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4


本文編號：2514561