【摘要】：目的探討N-WASP在肺炎衣原體感染誘導(dǎo)血管新生中的作用及其可能機(jī)制。方法肺炎衣原體增殖培養(yǎng)后感染人血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC),免疫熒光染色確認(rèn)感染成功。Western blot檢測肺炎衣原體感染的VEC內(nèi)N-WASP磷酸化水平;CCK-8檢測N-WASP特異性抑制劑Wiskostain對VEC活力的影響;免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測工作濃度的Wiskostain對肺炎衣原體感染率的影響;肺炎衣原體感染以5μmol/L Wiskostain預(yù)處理的VEC后,管腔形成實(shí)驗(yàn)觀察各組VEC形成新生血管能力的變化。結(jié)果在熒光顯微鏡下,感染的VEC胞漿內(nèi)可見典型的肺炎衣原體包涵體。肺炎衣原體感染VEC 10、24 h后N-WASP磷酸化水平均明顯上調(diào)且高于正常對照組(P0.05)。管腔形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,肺炎衣原體感染VEC 16 h后,其所形成的微管腔節(jié)點(diǎn)數(shù)明顯多于正常對照組(P0.05);經(jīng)Wiskostain預(yù)處理后,肺炎衣原體感染促進(jìn)微管腔節(jié)點(diǎn)形成的作用被顯著削弱,幾乎不能形成微管腔結(jié)構(gòu)(P0.05)。結(jié)論肺炎衣原體感染可能通過N-WASP促進(jìn)人VEC形成新生血管。
[Abstract]:Objective to investigate the role of N-WASP in angiogenesis induced by chlamydia pneumoniae infection and its possible mechanism. Methods chlamydia pneumoniae proliferation culture infected human vascular endothelial cell (VEC), immunofluorescence staining confirmed successful. Western blot detection of chlamydia pneumoniae infection in VEC phosphorylation level; The effect of Wiskostain, a specific inhibitor of N-WASP, on the activity of VEC was detected by CCK-8, and the infection rate of chlamydia pneumoniae was detected by immunofluorescence assay. Chlamydia pneumoniae infection was pretreated with 5 渭 mol/L Wiskostain VEC, and the angiogenesis ability of VEC in each group was observed by lumen formation experiment. Results typical chlamydia pneumoniae inclusion bodies were found in cytoplasm of infected VEC under fluorescence microscope. The levels of N-WASP phosphorylation in chlamydia pneumoniae were significantly up-regulated 24 h after VEC infection and were significantly higher than those in normal control group (P0.05). The results of lumen formation test showed that the number of microtubule nodes formed by chlamydia pneumoniae infection 16 h after VEC infection was significantly higher than that in normal control group (P0.05). After pretreatment with Wiskostain, the role of Chlamydia pneumoniae infection in promoting the formation of nodes in microtubules was significantly weakened, and almost could not form the structure of microtubules (P0.05). Conclusion Chlamydia pneumoniae infection may promote the formation of neovascularization of human VEC through N-WASP.
【作者單位】： 天津醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81470551;81300206) 高等學(xué)校博士點(diǎn)基金項(xiàng)目(20111202110011)
【分類號】：R543.5

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本文編號：2385815