【摘要】:目的:研究頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊在酸性條件下與膽汁發(fā)生的軟化溶解反應(yīng),分析測(cè)定反應(yīng)前后斑塊成分的改變。方法:第一部分,驗(yàn)證頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊與膽汁在酸性條件下發(fā)生的溶解現(xiàn)象:通過頸動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫術(shù)收集頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊,根據(jù)斑塊的成分將其分為不穩(wěn)定性斑塊與穩(wěn)定性斑塊兩類,并將每類斑塊分成3組,在25℃的實(shí)驗(yàn)條件下,分別加入膽汁(PH≈7),稀鹽酸(PH=2),酸化后的膽汁(PH=2),觀察并記錄各組斑塊的溶解情況。第二部分,使用氣相色譜聯(lián)合質(zhì)譜的方法研究反應(yīng)前后斑塊成分的改變:分別將反應(yīng)前不穩(wěn)定性斑塊的脂質(zhì)壞死核心和反應(yīng)后生成的墨綠色絮狀物質(zhì)進(jìn)行成分測(cè)定,對(duì)比分析二者之間成分的差異。第三部分,使用考馬斯亮藍(lán)法聯(lián)合質(zhì)譜的技術(shù)測(cè)定反應(yīng)前后斑塊中蛋白質(zhì)成分的改變:分別將反應(yīng)前后的樣本進(jìn)行蛋白提取、濃度測(cè)定、酶解后行質(zhì)譜檢測(cè),對(duì)比反應(yīng)前后樣本中蛋白質(zhì)成分的改變。結(jié)果:1.只有酸化后的膽汁(PH=2)可以與頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊發(fā)生明顯的溶解反應(yīng),稀鹽酸(PH=2)和普通膽汁(PH=7)與頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定性及穩(wěn)定性斑塊均無明顯反應(yīng)。2.頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的分類中,只有不穩(wěn)定性斑塊能夠與酸化后的膽汁發(fā)生明顯的溶解反應(yīng)。3.不穩(wěn)定性斑塊與酸化后的膽汁發(fā)生的溶解反應(yīng)中,可見不穩(wěn)定性斑塊的脂質(zhì)壞死核心在酸化后的膽汁作用下迅速軟化溶解,最終轉(zhuǎn)化成為一種墨綠色絮狀物質(zhì)。4.氣相色譜聯(lián)合質(zhì)譜法可測(cè)得反應(yīng)前后樣本中糖、酸、醇、酯等較小分子量物質(zhì)成分的變化。最終測(cè)得反應(yīng)前的脂質(zhì)壞死核心中有小分子物質(zhì)11種,反應(yīng)后生成的絮狀物質(zhì)中則有50種,對(duì)比發(fā)現(xiàn)消失了 5種,新生成了 44種。5.考馬斯亮藍(lán)法聯(lián)合質(zhì)譜的技術(shù)可測(cè)得反應(yīng)前后樣本中大分子蛋白成分的改變。最后測(cè)得反應(yīng)前的脂質(zhì)壞死核心中有蛋白416種,反應(yīng)后的生成物中則有191種,對(duì)比發(fā)現(xiàn)消失了 285種,新生成了 60種。結(jié)論:1.頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊與酸性條件下的膽汁(PH=2)發(fā)生的溶解現(xiàn)象,實(shí)質(zhì)是斑塊中的脂質(zhì)壞死核心與酸化后的膽汁反應(yīng),最終軟化溶解成為一種墨綠色絮狀物質(zhì)。2.脂質(zhì)壞死核心體積占比較大的不穩(wěn)定性斑塊在酸化后的膽汁中溶解效果顯著,此現(xiàn)象有望為不穩(wěn)定性斑塊的血管介入治療提供新方法。3.氣相色譜聯(lián)合質(zhì)譜法可用于脂質(zhì)壞死核心和反應(yīng)后生成的墨綠色絮狀物質(zhì)中糖、酸、醇、酯等較小分子物質(zhì)的對(duì)比測(cè)定。4.考馬斯亮藍(lán)法聯(lián)合質(zhì)譜的技術(shù)可適用于反應(yīng)前后樣本中大分子蛋白質(zhì)成分的對(duì)比測(cè)定。5.不穩(wěn)定性斑塊的脂質(zhì)壞死核心和反應(yīng)后生成的絮狀物質(zhì)的成分均極其復(fù)雜,研究頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定性斑塊與膽汁在酸性條件下反應(yīng)的關(guān)鍵機(jī)理是一項(xiàng)復(fù)雜的工作,需要經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)、修改、調(diào)整,并且需要神經(jīng)外科、肝膽外科、生物化學(xué)專家等不同學(xué)科研究人員的密切合作。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R543.4
【參考文獻(xiàn)】
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2323044
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