【摘要】：背景及目的 冠心病是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病,其中急性冠脈綜合癥(ACS)是其嚴(yán)重類型,發(fā)病機(jī)制包括易損斑塊破裂、血小板聚集、血栓形成,而易損斑塊破裂被視為ACS發(fā)生中的最重要的始動(dòng)環(huán)節(jié)�，F(xiàn)已證實(shí)細(xì)胞外基質(zhì)降解與合成失衡是導(dǎo)致斑塊穩(wěn)定性下降的主要機(jī)制之一,多種蛋白酶如基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metal loproteinases, MMPs)、含血小板結(jié)合蛋白基序的解聚蛋白樣金屬蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs, ADAMTSs)等可降解纖維帽細(xì)胞外基質(zhì),與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定密切相關(guān)。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)是目前發(fā)現(xiàn)的特異性最強(qiáng)的促血管生成因子,已有臨床研究證實(shí)在不穩(wěn)定斑塊中VEGF表達(dá)水平增高,與ACS嚴(yán)重程度正相關(guān),其可加速動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程,是臨床判斷斑塊穩(wěn)定性及急性冠脈綜合癥的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的重要血清學(xué)標(biāo)志物。但VEGF誘導(dǎo)斑塊不穩(wěn)定具體機(jī)制尚未見相關(guān)研究。 本實(shí)驗(yàn)擬探討不同濃度血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子rhVEGF_(165)刺激人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)24h后基質(zhì)金屬蛋白酶家族中ADAMTS5. ADAMTS4. MMP9的表達(dá),探索VEGF對(duì)斑塊不穩(wěn)定可能的機(jī)制。 方法 1.培養(yǎng)臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,以不同濃度rhVEGF_(165)(實(shí)驗(yàn)組濃度lOng/ml,20ng/ml,50ng/ml,對(duì)照組0ng/ml)刺激24小時(shí)。 2.提取細(xì)胞總RNA,以Real time PCR檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶ADAMTS5、 ADAMTS4、 MMP9mRNA的表達(dá)水平。 3.提取細(xì)胞總蛋白,Western blot檢測(cè)內(nèi)皮細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶ADAMTS5、ADAMTS4、 MMP9的表達(dá)水平。 結(jié)果 1.與對(duì)照組相比,rhVEGF_(165).10ng/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ADAMTS5、 ADAMTS4、 MMP9mRNA表達(dá)分別為：1.161±0.029,1.238±0.077,1.357±0.059,對(duì)照組為1±0,P0.05。rhVEGF,_(165)20ng/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ADAMTS5.ADAMTS4.MMP9mRNA表達(dá)分別為：2.298±0.092,2.501±0.009,2.637±0.047, P0.05。 rhVEGF_(165)50ng/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ADAMTS5、 ADAMTS4、MMP9mRNA表達(dá)分別為：2.517±0.019,2.736±0.08,3.21±0.079,P0.05。同一指標(biāo)各組間相比P0.05,且ADAMTS5、ADAMTS4及MMP9轉(zhuǎn)錄水平的變化與rhVEGF_(165)的刺激濃度呈正相關(guān)(r=0.873、0.874、0.925,P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.與對(duì)照組相比,rhVEGF_(165)10ng/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ADAMTS5、 ADAMTS4、 MMP9蛋白水平表達(dá)分別為：0.091±0.006比0.043±0.005,0.147±0.003比0.047±0.005,0.172±0.029比0.086±0.009,P0.05。rhVEGF_(165)20ng/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ADAMTS5、 ADAMTS4、 MMP9蛋白水平表達(dá)分別為：0.1457±0.007比0.043±0.005,0.39±0.007比0.047±0.005,0.525±0.085比0.086±0.009,P0.05。rhVEGF_(165)50ng/ml組內(nèi)皮細(xì)胞ADAMTS5、 ADAMTS4、 MMP9蛋白水平表達(dá)分別為0.1767±0.003比0.043±0.005,0.624±0.055比0.047±0.005,0.598±0.024比0.086±0.009,P0.05。且同一指標(biāo)各組間相比P0.05或P0.01,且ADAMTS5、 ADAMTS4及MMP9蛋白表達(dá)總體呈劑量-效應(yīng)關(guān)系(r=0.991、0.970、0.946,P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論 1.VEGF刺激內(nèi)皮細(xì)胞可引起基質(zhì)金屬蛋白酶家族中ADAMTS5、 ADAMTS4、 MMP9表達(dá)上調(diào),且呈一定的濃度依賴效應(yīng),提示VEGF可能通過上調(diào)上述三種基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)而降解細(xì)胞外基質(zhì),在斑塊不穩(wěn)定中發(fā)揮重要作用。 2. VEGF可以加速動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程,是臨床判斷粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性及急性冠脈綜合癥的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后的重要血清學(xué)指標(biāo)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R541.4

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2274490