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自發(fā)性高血壓大鼠外周血淋巴細(xì)胞連接蛋白43與炎性因子表達水平的相關(guān)性研究

發(fā)布時間:2018-08-27 06:21
【摘要】:目的探討自發(fā)性高血壓(SH)大鼠外周血CD_4~+T淋巴細(xì)胞和CD_8~+T淋巴細(xì)胞連接蛋白(Cx)43與炎性因子白介素(IL)-2、IL-6表達水平的相關(guān)性。方法于2015年4月—2016年4月,選取SH大鼠和正常血壓的Wistar京都(WKY)大鼠各20只。采集腹主動脈外周血,血漿用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測IL-2和IL-6表達水平;下層血細(xì)胞用于分離外周血淋巴細(xì)胞。收集5×10~5個淋巴細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀檢測CD_4~+T淋巴細(xì)胞和CD_8~+T淋巴細(xì)胞Cx43陽性表達率。將淋巴細(xì)胞分為空白對照組、刀豆蛋白A(Con A)組(培養(yǎng)48 h后加入5μg/ml Con A)和Gap27+Con A組(培養(yǎng)前加入500μmol/L Gap27,培養(yǎng)48 h后加入5μg/ml Con A)。提取淋巴細(xì)胞RNA,采用實時熒光定量RCR法檢測各組淋巴細(xì)胞IL-2 mRNA與IL-6 mRNA相對表達水平。結(jié)果 SH大鼠IL-2表達水平為(152.40±29.62)pg/ml,高于WKY大鼠的(73.41±20.16)pg/ml(t=7.24,P0.05);SH大鼠IL-6表達水平為(29.74±1.90)pg/ml,高于WKY大鼠的(22.58±1.06)pg/ml(t=14.72,P0.05)。SH大鼠CD_4~+T淋巴細(xì)胞Cx43陽性表達率為(3.48±0.58)%,高于WKY大鼠的(1.36±0.18)%(t=15.61,P0.05)。SH大鼠外周血CD_8~+T淋巴細(xì)胞Cx43陽性表達率為(39.02±4.77)%,高于WKY大鼠的(27.48±1.90)%(t=10.05,P0.05)。SH大鼠各組淋巴細(xì)胞IL-2 mRNA、IL-6 mRNA表達水平比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其中Con A組IL-2mRNA、IL-6 mRNA表達水平均高于空白對照組和Gap27+Con A組,Gap27+Con A組IL-6 mRNA表達水平低于空白對照組(P0.05)。WKY大鼠各組淋巴細(xì)胞IL-2 mRNA表達水平比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),其中Con A組IL-2 mRNA表達水平高于空白對照組和Gap27+Con A組(P0.05)。結(jié)論 SH大鼠伴隨炎性反應(yīng),炎性因子釋放增加,應(yīng)用縫隙連接阻斷劑阻斷淋巴細(xì)胞間信息通訊后,炎性因子的釋放顯著下降,縫隙連接可能參與高血壓的炎性反應(yīng)。
[Abstract]:Objective to investigate the relationship between the expression of (Cx) 43 in CD_4~ T lymphocytes and CD_8~ T lymphocytes in peripheral blood of spontaneously hypertensive (SH) rats and the expression of interleukin (IL)-2 (IL-2)-6. Methods from April 2015 to April 2016, 20 SH rats and 20 Wistar Kyoto (WKY) rats with normal blood pressure were selected. The peripheral blood of abdominal aorta was collected and plasma was used to detect the expression of IL-2 and IL-6 by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and the lower blood cells were used to isolate peripheral blood lymphocytes. 5 脳 10 ~ 5 lymphocytes were collected and the positive rates of Cx43 expression in CD_4~ T lymphocytes and CD_8~ T lymphocytes were detected by flow cytometry. Lymphocytes were divided into blank control group, concanavalin A (Con A) group (5 渭 g/ml Con A) and Gap27 Con A group after 48 h culture) and 5 渭 g/ml Con A). After 48 h culture with 500 渭 mol/L Gap27, before culture. The relative expression of IL-2 mRNA and IL-6 mRNA in lymphocytes of each group was detected by real-time fluorescence quantitative RCR. Results the expression level of IL-2 in SH rats was (152.40 鹵29.62) pg/ml, higher than that in WKY rats (73.41 鹵20.16) pg/ml (t = 7.24P 0.05). The IL-6 expression level in SH rats was (29.74 鹵1.90) pg/ml, higher than that in WKY rats (22.58 鹵1.06) pg/ml (tttir 14.72P0.05) .SH rats CD_4~ T lymphocyte Cx43 expression rate was (3.48 鹵0.58), higher than that in WKY rats (1.36 鹵0.18)% (t15.61p0.05). SH rats' CD_8~ T lymphocytes were higher than those in WKY rats (1.36 鹵0.18)% (t15.61p0.05). The positive expression rate of Cx43 was (39.02 鹵4.77), which was higher than that of WKY rats (27.48 鹵1.90%). The expression of IL-2mRNA,IL-6 mRNA in Con A group was higher than that in blank control group and Gap27 Con A group in Gap27 Con A group (P0.05), and the expression level of IL-6 mRNA in Gap27 Con A group was lower than that in control group (P0.05). The difference was statistically significant (P0.05). The level of IL-2 mRNA expression in Con A group was higher than that in blank control group and Gap27 Con A group (P0.05). Conclusion the release of inflammatory factors in SH rats was increased with inflammatory reaction. The release of inflammatory factors decreased significantly after blocking the communication between lymphocytes with gap junction blockers. The gap junction may be involved in the inflammatory response of hypertension.
【作者單位】: 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點實驗室;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室;中國石油烏魯木齊石化公司職工醫(yī)院;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(31260247,81460098,81560081,81660271) 石河子大學(xué)杰出青年人才培育計劃項目(2012ZRKXJQ01);石河子大學(xué)高層次人才科研啟動計劃(RCZX201449)
【分類號】:R544.1

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本文編號:2206393

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