發(fā)布時(shí)間：2018-08-11 09:22

【摘要】：目的①對(duì)24例乙型血友病患者進(jìn)行臨床資料調(diào)查及分析,以期了解目前山東省乙型血友病患者治療現(xiàn)狀。②為確診乙型血友病患者的基因突變類型及尋找FIX基因突變的規(guī)律,同時(shí)分析山東省乙型血友病患者的基因突變譜,為遺傳學(xué)咨詢奠定基礎(chǔ),我們對(duì)24例明確診斷的乙型血友病男性患者進(jìn)行了基因檢測(cè)和分析。方法①采集24例乙型血友病患者的臨床資料,包括性別、年齡、發(fā)病年齡、確診年齡、遺傳史、近半年替代治療頻率等在內(nèi)的基本信息,并進(jìn)行全面的體格檢查及感染性標(biāo)志物檢查；②對(duì)24例乙型血友病患者進(jìn)行血漿凝血因子Ⅸ活性(FⅨ:C)、血漿凝血因子Ⅸ抗原(FⅨ:Ag)、血漿凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)及凝血常規(guī)檢測(cè),凝血常規(guī)主要包括活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶時(shí)間(TT)及纖維蛋白原(FIB)。而后結(jié)合24例乙型血友病患者具體的臨床癥狀明確其表型診斷；③采集24例乙型血友病患者的外周靜脈血,提取基因組DNA；依據(jù)NCBI上GenBank中的FIX基因參考序列(GenBank NM_000133.3),利用Primer Premier5.0軟件設(shè)計(jì)8對(duì)引物,覆蓋FIX基因全部外顯子及其側(cè)翼序列；應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增24例乙型血友病患者FIX基因8個(gè)外顯子及其側(cè)翼序列；運(yùn)用雙脫氧鏈終止法在ABI3730XL測(cè)序儀上對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；對(duì)測(cè)序結(jié)果結(jié)合Chromas軟件及BLAST與GenBank中參考序列進(jìn)行比對(duì),尋找基因變異,確定24例乙型血友病患者FIX基因的突變類型。結(jié)果①24例乙型血友病患者均為重、中型患者,其中重型患者16例(66.7%),中型患者8例(33.3%)。②對(duì)24例乙型血友病患者進(jìn)行基因檢測(cè)共發(fā)現(xiàn)18種基因突變類型,包括錯(cuò)義突變13種,無(wú)義突變2種,缺失突變3種。其中13種突變?yōu)榧簣?bào)道的突變類型,5種突變類型國(guó)際上未見(jiàn)報(bào)道。③5種新的突變類型分別為：c.200delA、c.306delT、c.688-690delGGA、c.1025C c.1157CA。結(jié)論乙型血友病患者臨床表現(xiàn)有明顯異質(zhì)性,主要表現(xiàn)在首次出血年齡、首次關(guān)節(jié)出血年齡、出血頻率、關(guān)節(jié)畸形數(shù)目等方面。FIX基因突變是導(dǎo)致乙型血友病的根本原因。對(duì)24例乙型血友病患者的FIX基因分析表明基因突變具有明顯的異質(zhì)性,且錯(cuò)義突變?nèi)允悄壳癋IX基因的主要突變方式。FIX基因突變常見(jiàn)的外顯子部位與他們編碼的氨基酸蛋白行使功能時(shí)所起的作用有關(guān)。通過(guò)基因檢測(cè)及分析,直接闡述了乙型血友病患者發(fā)病的分子學(xué)機(jī)制,為進(jìn)一步功能學(xué)方面的研究提供了基礎(chǔ)。本研究發(fā)現(xiàn)5種新的突變類型,豐富了FIX基因突變譜,也為乙型血友病的分子學(xué)發(fā)病機(jī)制提供了一定的分析依據(jù)�；驕y(cè)序技術(shù)是診斷乙型血友病患者及攜帶者最直接、最準(zhǔn)確的方法之一。
[Abstract]:Objective 1 to investigate and analyze the clinical data of 24 patients with type B hemophilia in order to understand the gene mutation type of type B hemophilia in Shandong Province and to find out the rule of mutation of FIX gene. In order to lay a foundation for genetic counseling, 24 patients with type B hemophilia were detected and analyzed. Methods 1 the clinical data of 24 patients with type B hemophilia were collected, including sex, age, age of onset, age of diagnosis, genetic history, frequency of replacement therapy in the last half year, etc. In addition, 24 patients with type B hemophilia were examined by physical examination and infectious markers. The plasma coagulation factor IX activity (F IX: C), the plasma coagulation factor IX antigen (F IX: AG), the plasma coagulation factor 鈪，

本文編號(hào)：2176576