【摘要】：目的探討普羅布考對炎性單核細(xì)胞亞群分化的影響及其可能機(jī)制。方法用8周齡C57BL/6小鼠制備脾臟單細(xì)胞懸液,以100 k U/L重組干擾素γ誘導(dǎo)單核細(xì)胞亞群分化,再以25、50、100μmol/L普羅布考干預(yù),觀察其對各單核細(xì)胞亞群分化的影響。用抗-CD11b-PE及抗-Ly-6C-FITC抗體進(jìn)行細(xì)胞染色,通過流式細(xì)胞儀檢測各單核細(xì)胞亞群的分化情況,再以Flowjo軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。利用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色法,以2',7'-二氯熒光素二乙酸酯探針,通過流式細(xì)胞儀檢測各單核細(xì)胞亞群中活性氧(ROS)水平。用NADPH氧化酶試劑盒檢測人單核細(xì)胞系THP-1細(xì)胞內(nèi)NADPH氧化酶活性。結(jié)果 25、50、100μmol/L普羅布考呈濃度依賴性地抑制脾臟原代細(xì)胞中Ly-6C~(hi)炎性單核細(xì)胞亞群的分化。Ly-6C~+炎性單核細(xì)胞亞群中ROS水平是Ly-6C~-炎性單核細(xì)胞亞群的2倍,同時(shí)25、50、100μmol/L普羅布考呈濃度依賴性地抑制Ly-6C+炎性單核細(xì)胞亞群中ROS的產(chǎn)生。100μmol/L普羅布考顯著抑制THP-1細(xì)胞內(nèi)NADPH氧化酶的活性。結(jié)論普羅布考可能通過干預(yù)NADPH氧化酶活性,從而抑制Ly-6Chi炎性單核細(xì)胞亞群的分化及其ROS的產(chǎn)生。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of probucol on the differentiation of inflammatory monocyte subsets and its possible mechanism. Methods the splenic monocyte suspension was prepared in 8-week-old C57BL/6 mice, and the differentiation of monocyte subsets was induced by 100kUL recombinant interferon 緯, and then treated with 2550100 渭 mol/L propobucol to observe its effect on the differentiation of monocyte subsets. The cells were stained with anti-CD11b-PE and anti-Ly-6C-FITC antibodies. The differentiation of monocyte subsets was detected by flow cytometry, and the data were analyzed by Flowjo software. The levels of reactive oxygen species (ROS) in monocyte subsets were detected by flow cytometry with a 2-chloride-dichlorofluorescein diacetate probe and intracellular cytokine staining. The activity of NADPH oxidase in human monocyte THP-1 cells was detected by NADPH oxidase assay kit. Results Probucol (2550 渭 mol/L) inhibited the differentiation of Ly-6C- (hi) inflammatory monocyte subsets in a concentration-dependent manner. The level of ROS in Ly-6C- (hi) inflammatory monocyte subsets was twice as high as that in Ly-6Ca-inflammatory monocyte subsets. At the same time, Probucol (2550 渭 mol/L) inhibited the production of ROS in Ly-6C inflammatory monocytes in a concentration-dependent manner. 100 渭 mol/L probucol significantly inhibited the activity of NADPH oxidase in THP-1 cells. Conclusion Probucol may inhibit the differentiation of Ly-6Chi inflammatory monocyte subsets and the production of ROS by interfering with the activity of NADPH oxidase.
【作者單位】： 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81200199)
【分類號(hào)】：R543.5

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本文編號(hào)：2151513