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microRNA-152對(duì)影RAW264.7巨噬細(xì)胞膽固醇蓄積的響及其靶基因驗(yàn)證

發(fā)布時(shí)間:2018-07-26 06:32
【摘要】:目的探討micro RNA-152(mi R-152)對(duì)ox-LDL刺激下的RAW264.7巨噬細(xì)胞膽固醇蓄積的影響及其靶基因的確定。方法小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞分為兩組,mi R-152組和陰性對(duì)照組。ox-LDL刺激兩組細(xì)胞48 h后,酶熒光學(xué)法測(cè)定各組細(xì)胞內(nèi)總膽固醇(total cholesterol,TC)、膽固醇酯(cholesterolester,CE)的含量和TC/CE比例。生物信息學(xué)方法、雙熒光素酶報(bào)告及實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot證實(shí)mi R-152的下游靶基因。結(jié)果與對(duì)照組相比,mi R-152組巨噬細(xì)胞內(nèi)TC和CE含量增加,CE/TC的比值明顯升高;并且,mi R-152組ABCAl的m RNA和蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組明顯降低。結(jié)論 mi R-152能夠促進(jìn)ox-LDL誘導(dǎo)的RAW264.7巨噬細(xì)胞膽固醇蓄積,其機(jī)制可能與靶向調(diào)控ABCA1有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of micro RNA-152 (mi R-152) on cholesterol accumulation in RAW264.7 macrophages stimulated by ox-LDL and to identify its target gene. Methods Murine RAW264.7 macrophages were divided into two groups (n = 48). After stimulation with ox-LDL for 48 h, the contents of total cholesterol (TC), cholesterol ester (CE) and TC/CE ratio were measured by enzyme fluorescence assay. The downstream target gene of mi R-152 was confirmed by bioinformatics method, double luciferase report and real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. Results compared with the control group, the ratio of TC and CE in macrophages was significantly increased and the expression level of m RNA and protein in ABCAl was significantly decreased in the mi-R-152 group compared with the control group. Conclusion MiR-152 can promote the accumulation of cholesterol in RAW264.7 macrophages induced by ox-LDL, and its mechanism may be related to the targeted regulation of ABCA1.
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)電力教學(xué)醫(yī)院腎內(nèi)科;上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院內(nèi)分泌科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):81400802)
【分類號(hào)】:R543.5

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2 田s,

本文編號(hào):2145165


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