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下肢動脈粥樣硬化斑塊內miRNA-199a-3p對外周血單核細胞的影響

發(fā)布時間:2018-07-15 07:16
【摘要】:目的探討下肢動脈粥樣硬化斑塊內miRNA-199a-3p對外周血單核細胞的影響。方法選取37例下肢動脈粥樣硬化閉塞癥(AS)患者外周血為AS組。另外選取同期37名健康體檢者外周血為對照組。新鮮血管組織取自1例下肢AS患者截肢遠端血管為實驗組,以其截肢近端血管為對照。實時熒光定量PCR檢測新鮮血管組織,分離得到的外周血中單核細胞和微泡中miRNA-199a-3p表達水平。以人單核細胞TTHP-1為載體,miRNA-199a-3p mimics組和miRNA-199a-3p inhibitor組分別轉染miRNA-199a-3p mimics和miRNA-199a-3p inhibitor,同時設置空白對照組。實時熒光定量PCR檢測各組miRNA-199a-3p、趨化因子單核細胞趨化蛋白(MCP)-1、調解活化正常T細胞表達和分泌的趨化因子(RANTES)和Fractalkine表達水平。結果下肢動脈粥樣硬化斑塊內miRNA-199a-3p表達水平顯著高于正常組織(P0.05)。AS組外周血單核細胞和微泡中miRNA-199a-3p表達水平均顯著高于對照組(P0.05)。與空白對照組相比,miRNA-199a-3p mimics組miRNA-199a-3p表達水平顯著上升(P0.05),miRNA-199a-3p inhibitor組miRNA-199a-3p表達水平顯著下降(P0.05)。與空白對照組相比,miRNA-199a-3p mimics組MCP-1、RANTES和Fractalkine的mRNA表達水平顯著降低(P0.05),miRNA-199a-3p inhibitor組MCP-1、RANTES和Fractalkine的mRNA表達水平顯著上升(P0.05)。結論動脈粥樣硬化斑塊內巨噬細胞高表達miRNA-199a-3p,并以微泡形式分泌到外周血中,抑制單核細胞中MCP-1、RANTES和Fractalkine等趨化因子的表達,是一種動脈粥樣硬化保護因素。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of miRNA-199a-3p in atherosclerotic plaque of lower extremity on peripheral blood monocytes. Methods the peripheral blood of 37 patients with lower extremity atherosclerosis obliterans (as) were selected as group. In addition, the peripheral blood of 37 healthy persons in the same period was chosen as the control group. Fresh vascular tissue was obtained from a patient with as in the experimental group, and the proximal vessel was used as the control group. The expression of miRNA-199a-3p in peripheral blood monocytes and microbubbles was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Human monocyte TTHP-1 was transfected with miRNA-199a-3p mimics and miRNA-199a-3p inhibitor, respectively. The expression of miRNA-199a-3p, monocyte chemotactic protein (MCP) -1, RANTES and Fractalkine were detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results the expression level of miRNA-199a-3p in atherosclerotic plaque of lower extremity was significantly higher than that in normal tissue (P0.05). The expression of miRNA-199a-3p in peripheral blood monocytes and microbubbles in as group was significantly higher than that in control group (P0.05). The expression level of miRNA-199a-3p in miRNA-199a-3p mimics group was significantly higher than that in blank control group (P0.05). The miRNA-199a-3p expression level in miRNA-199a-3p inhibitor group was significantly lower than that in control group (P0.05). Compared with the control group, the mRNA expression levels of MCP-1RANTES and Fractalkine in the mimics group were significantly lower than those in the control group (P0.05). The mRNA expression levels of MCP-1RANTES and Fractalkine in the MCP-1RANTES and Fractalkine inhibitor group were significantly increased (P0.05). Conclusion macrophages in atherosclerotic plaques express miRNA-199a-3phighly and secrete into peripheral blood in the form of microbubbles to inhibit the expression of chemokines such as MCP-1RANTES and Fractalkine in monocytes, which is a protective factor for atherosclerosis.
【作者單位】: 云南省第一人民醫(yī)院昆明理工大學附屬醫(yī)院普外一科;
【基金】:國家自然科學基金資助項目(81260066) 云南科技計劃項目(2013FB199)
【分類號】:R543.5

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