本文選題：肺動(dòng)脈高壓 + 肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞��； 參考：《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:觀察丹參酮ⅡA磺酸鈉(STS)對(duì)低氧性肺動(dòng)脈高壓(HPH)的影響,并探討SIRT1-FOXO3a通路在其中的作用機(jī)制。方法:將購自河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心的SD大鼠隨機(jī)分為3組,每組各8只,分別為常氧組、低氧組、低氧+STS組。低氧組及低氧+STS組SD大鼠飼養(yǎng)于常壓低氧箱內(nèi),其氧濃度控制在(10±0.5)%,常氧組大鼠呼吸正�？諝�,與低氧組、低氧+STS組大鼠放于同一房間以相同飼料飼養(yǎng)。于造模開始起,低氧+STS組大鼠每日腹腔注射STS 10mg/kg,常氧組及低氧組大鼠注射相同劑量的生理鹽水,連續(xù)8周。造模結(jié)束后分析比較三組大鼠右心肥厚指數(shù)(RVHI),平均肺動(dòng)脈壓力(mPAP)等指標(biāo),觀察肺小動(dòng)脈HE染色等,分析STS對(duì)HPH的影響。體外培養(yǎng)原代人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(hPASMCs),取5~8代作為實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞。首先將hPASMCs設(shè)為6組,分別為常氧組、低氧組、低氧+不同濃度STS(0.1μmol/L,1.25μmol/L,12.5μmol/L,25μmol/L)干預(yù)組,常氧組為37℃、5%CO2和95%空氣的培養(yǎng)箱內(nèi)孵育24h,低氧組及低氧+不同濃度STS干預(yù)組分別置于37℃、3%O2、5%CO2、92%N2的三氣培養(yǎng)箱內(nèi)孵育24h。行MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞增殖情況,分析低氧及STS對(duì)hPASMCs的影響,并篩選最佳STS干預(yù)濃度。重新取5~8代hPASMCs并將其設(shè)為5組,分別為常氧組、低氧組、低氧+STS(25μmol/L)組、低氧+白藜蘆醇(RE,40μmol/L)組、低氧+STS(25μmol/L)+尼克酰胺(NAM,200μmol/L)組。不同干預(yù)因素處理后,再次比較細(xì)胞增殖情況,并采用蛋白免疫印跡(Western blot)和實(shí)時(shí)定量(RT)-PCR分別檢測(cè)各組SIRT1、FOXO3a、PCNA的表達(dá)情況。結(jié)果:長期慢性低氧可導(dǎo)致SD大鼠肺動(dòng)脈管壁增厚,mPAP增高,RVHI增高(P0.05),肺動(dòng)脈中膜增厚,應(yīng)用STS干預(yù)后可明顯降低上述指標(biāo)的改變程度(P0.05),改善HPH。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,低氧可顯著刺激hPASMCs增殖(P0.05),應(yīng)用STS及SIRT1激動(dòng)劑RE干預(yù)后,hPASMCs中SIRT1及FOXO3a表達(dá)同向增加(P0.05),PCNA表達(dá)減少(P0.05),hPASMCs增殖減少(P0.05)。而應(yīng)用SIRT1抑制劑NAM處理后,SIRT1及FOXO3a表達(dá)減少(P0.05),細(xì)胞增殖活躍,提示NAM在一定程度上削弱了STS通過SIRT1-FOXO3a通路發(fā)揮抑制hPASMCs增殖的作用。結(jié)論:長期慢性低氧可引起并加重大鼠肺動(dòng)脈高壓,應(yīng)用STS治療后,肺動(dòng)脈高壓指標(biāo)可明顯改善,提示STS可在一定程度上起到防治HPH的作用,而通過SIRT1-FOXO3a通路抑制肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖可能是STS實(shí)現(xiàn)治療肺動(dòng)脈高壓的機(jī)制之一。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of sodium tanshinone 鈪，

本文編號(hào)：2112957