本文選題：L4F + 血紅素氧合酶1��； 參考：《中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2015年博士論文

【摘要】：目的：研究L4F對(duì)代謝綜合征(MS)大鼠心功能的影響,探討L4F通過(guò)上調(diào)血紅素氧合酶-1(HO-1)發(fā)揮心血管系統(tǒng)保護(hù)作用的可能機(jī)制,以期為代謝綜合征導(dǎo)致心功能損害的防治尋找新的靶點(diǎn)與思路。方法：選取雄性7周齡Wistar大鼠60只,根據(jù)體重隨機(jī)分為2組,對(duì)照組喂食普通飼料(Control組,n=20);實(shí)驗(yàn)組即代謝綜合征組喂食高果糖飼料(MS組,n=40),喂養(yǎng)6周。6周后每組隨機(jī)抽取10只,先后行心臟超聲及血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè),腹主動(dòng)脈采血檢測(cè)生化指標(biāo),根據(jù)血壓、甘油三酯、血糖水平升高,高密度脂蛋白膽固醇水平降低,驗(yàn)證代謝綜合征大鼠模型建立成功。剩余40只大鼠分為4組,每組10只：即1).對(duì)照(Control)+對(duì)照溶液[PH7.4的碳酸銨緩沖溶液(ABCT)]組；2).MS+ABCT組;3)MS+L4F (HO-1誘導(dǎo)劑,L4F)組；4). MS+L4F+SnMP(HO-1抑制劑,錫中卟啉)組。分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始基線(xiàn)水平、第6周(模型建立后)和第12周(實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)),行心臟超聲檢查評(píng)價(jià)大鼠心功能各項(xiàng)指標(biāo)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)所有動(dòng)物采用BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)檢測(cè)心臟血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)。檢測(cè)后處死動(dòng)物,腹主動(dòng)脈采血測(cè)定血糖、血脂等生化指標(biāo),留取心肌行HE染色及Masson染色觀(guān)察標(biāo)本病理變化;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法測(cè)定血清APN、INS、CRP、IL-1β、, IL-6、TNF-α、SOD1、MDA、GSH、nNOS、TXB2、PGI2、ET1等水平。Western-Blot法檢測(cè)心肌APN、HO-1、HO-2、AMPK、p-AMPK、Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS、 iNOS以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)GRP78、CHOP、PERK、p-PERK蛋白表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)APN、HO-1、AMPK、Akt、eNOS、iNOS以及GRP78、CHOP、 PERK等mRNA表達(dá)。結(jié)果：與對(duì)照組相比,MS組血壓、血糖、血脂水平和內(nèi)臟脂肪重量顯著升高;±dp/dtmax顯著降低,LVEDP顯著升高;血清INS、IL-6、MDA、TXB2水平升高和APN、GSH、PGI2水平降低(P0.05)。病理結(jié)果顯示,MS組具有明顯的心肌肥厚和部分心肌纖維化。Western-Blot結(jié)果顯示,MS組HO-1、APN、p-AMPK、 p-Akt、p-eNOS蛋白表達(dá)減少,GRP78、CHOP、p-PERK蛋白表達(dá)增加;熒光定量PCR檢測(cè)HO-1和APN mRNA表達(dá)減少,iNOS、CHOP、GRP78mRNA表達(dá)增多(P0.05)。對(duì)MS組給予HO-1誘導(dǎo)劑L4F進(jìn)行干預(yù),與聯(lián)合應(yīng)用HO-1抑制劑SnMP組比較,L4F能使得HO-1表達(dá)增加,同時(shí)能夠顯著降低血壓、血糖及血脂水平(P0.05)；恢復(fù)升高的LVEDP和下降的±dp/dtmax;降低血清TXB2、IL-6、MDA、 INS、Glu水平,提高血清APN、SOD1、GSH、PGI2水平(P0.05)：部分減輕心肌肥厚;并能顯著增加心肌中APN、HO-1、p-AMPK、p-Akt、p-eNOS蛋白表達(dá)(P0.05),減少GRP78、CHOP、p-PERK蛋白表達(dá)(P0.05)。而應(yīng)用SnMP能夠阻斷L4F對(duì)MS大鼠的血壓、心功能的改善情況以及對(duì)氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、內(nèi)皮損傷、能量代謝以及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激因子的拮抗作用,證明LAF對(duì)于心功能的保護(hù)作用是通過(guò)上調(diào)HO-1來(lái)實(shí)現(xiàn)的。結(jié)論：代謝綜合征大鼠模型早期表現(xiàn)為血糖和血壓升高、心室舒張功能下降、心肌肥厚以及過(guò)度的炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激與內(nèi)皮功能紊亂等多種病理生理現(xiàn)象。而L4F能夠通過(guò)上調(diào)HO-1的表達(dá)和活性,降低MS模型大鼠的血壓和血糖水平,改善心室順應(yīng)性。這些作用可能是通過(guò)抑制機(jī)體過(guò)度的炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激、改善內(nèi)皮功能和通過(guò)作用于能量代謝通路HO-1--APN-pAMPK-pAkt-peNOS以及改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等途徑來(lái)實(shí)現(xiàn)的。目的;研究UF對(duì)代謝綜合征合并心'肌棱死(Ml)大鼠心'功能的影響,探討L4F可能通過(guò)上調(diào)血紅素氧合酶1發(fā)揮‘。血管系統(tǒng)保護(hù)作用的機(jī)制,W期為代謝綜合征并心'肌梗死后心'功能損害的防治尋找新的把點(diǎn)與思路。方法:選取雄性7周齡wi star大鼠70只,根據(jù)體重隨機(jī)分為2組,對(duì)照組喂食普通巧料(n=20),實(shí)驗(yàn)組即代謝綜合征組喂食高果糖飼料(n巧0),巧養(yǎng)6周,建立代謝綜合征大鼠模型。每組拖機(jī)抽取10只大鼠,心'臟超聲及血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)后取血,根據(jù)血壓、血糖、甘油王醋、總膽固醇升高,高密度脂蛋白膽固醇降低,驗(yàn)證代謝綜合征模型建立成功。取MS模型大鼠30只,按照J(rèn)ons法,開(kāi)胸結(jié)扎冠狀動(dòng)脈前降支,建立心'肌梗死模型后,將存活大鼠共分為3組:1).心'肌梗死(M0+ABCT;2).MI+L4F;3).MI+L4F+SnMP。剩余10只MS大鼠作為假手術(shù)組,開(kāi)胸帶線(xiàn)后不結(jié)扎,即:4).MS+Sham+ABCT;剩余對(duì)照組大鼠設(shè)為對(duì)照組5).Contr01+ABCT。分R%于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始基線(xiàn)水平、第6周(MS模型建立后)和第12周(實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)),行心'臟超聲檢查評(píng)價(jià)大鼠‘。功能各項(xiàng)指標(biāo)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)所有動(dòng)物采用BL-420S生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)行血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)。第12周時(shí),行超聲、血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)后處死動(dòng)物,腹主動(dòng)脈采血測(cè)定血糖、血脂等生化指標(biāo),取臟行HE及Masson染色觀(guān)察心'肌梗死灶及心肌細(xì)胞變化情況:酶聯(lián)免疫硬附試驗(yàn)化LISA)法測(cè)定血清APN、INS、CRP、IL-1 3、IL-6、TNF-a、S0D1、MDA、GSH、nNOS、TXB2、PGI2、ET1等水平。Western-Blot法檢測(cè)'。肌APN、HO-K HO-2、AMPK、p-AMPK、Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS、iNOSW及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)GRP78、州OP、PERK、p-巧RK蛋白表達(dá);實(shí)時(shí)焚光定量PCR法檢測(cè)APN、HO-1、AMPK、Akt、eNOS、iNOSW及GRP78、CHOP、巧RK等mRNA表達(dá)。結(jié)果;與對(duì)照組相比,假手未組的生理、生化、I。功能W及血清化ISA指標(biāo)變化與本文第一部分安慰劑和對(duì)照組比較結(jié)果類(lèi)似。假手術(shù)組也同樣存在著山'肌肥厚、部分奸維化和H0-1、APN、p-AMPK、p-Akt、p-eNOS蛋白表達(dá)減少,及服P78、CHOP、p-PERK蛋白增多:焚光定量PCR檢測(cè)H0-1、APN基因表達(dá)減少,iN0S、G冊(cè)P、GRP78基因表達(dá)增多(K0.05)。與假手術(shù)組比較,梗安慰劑組大鼠血壓、射血分?jǐn)?shù)等血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)明顯降低,血清GLU、INS、山-6、MDA木平進(jìn)一步升高,血清APN、GSH、PGI2水平降低(戶(hù):0.化)�！＜〔±順�(biāo)本顯示‘。室壁坡苑灶部位明顯變薄,巧維化增多。對(duì)代謝綜合征并心'肌梗苑大鼠模型應(yīng)用L4F進(jìn)行干預(yù),與合用SnMP組叱較,L4F能使得H0-1表達(dá)及活性增加,同時(shí)能夠顯著睜低血糖及血脂木平(K0.05);部分恢復(fù)下降的血壓、LVEF、LVFS和±化/化max:降低血清CRP、IL-6、MDA、INS水平,提高血清APN、S0D1、GSH水平(M).05);并能顯著增加APN、H0-1、p-AMPK、P-Akt和p-eNOS蛋白表達(dá)W0.05),減少內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)CHOP、GR巧8、p-巧RK蛋白表達(dá)。而應(yīng)用SnMP能夠陽(yáng)斷L4F對(duì)MS大鼠的血壓、I。功能的改善情況,證明L4F的作用是通過(guò)上調(diào)H0-1來(lái)實(shí)現(xiàn)的。結(jié)論:代謝綜合征合并心'肌梗死后表現(xiàn)為血糖進(jìn)一步升高,血壓下降、‘。化收縮及舒張功能下降,�；课恍�'室肌變薄和奸}，

本文編號(hào)：2049915