本文選題：急性冠脈綜合征 + 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞　； 參考：《華中科技大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：第一部分急性冠脈綜合征患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞免疫抑制功能的研究 目的：動(dòng)脈粥樣硬化是一種免疫失調(diào)的慢性炎癥過(guò)程,是導(dǎo)致急性冠脈綜合征(acute coronary syndrome, ACS)的主要原因。特異性表達(dá)叉頭狀轉(zhuǎn)錄因子(Forkhead transcription factor P3, FOXP3)的胸腺生成的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4+CD25+regulatory T cells, Tregs)是CD4+T細(xì)胞的一個(gè)亞群,在限制機(jī)體對(duì)自身抗原或外來(lái)抗原過(guò)度的免疫反應(yīng)中發(fā)揮必不可少的免疫調(diào)節(jié)作用。Tregs的數(shù)量減少或免疫抑制功能受損均可誘發(fā)自身免疫性疾病或者使炎癥性疾病加重,因此,本實(shí)驗(yàn)旨在探討Tregs的免疫調(diào)節(jié)功能在急性冠脈綜合征發(fā)生中的作用。 方法：收集62例ACS患者及52例健康對(duì)照者的外周血標(biāo)本,采用密度梯度法分離出淋巴細(xì)胞后,用磁珠分選出CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及CD4+CD25效應(yīng)性T細(xì)胞。將Tregs與羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯(Carboxyfluorescein succinimidyl este,CFSE)標(biāo)記的自體及異體的Teffs以不同的比例混合培養(yǎng),用流式細(xì)胞儀檢測(cè)Teffs的增殖指數(shù),得出ACS患者及對(duì)照者Tregs的抑制率,比較ACS組與對(duì)照組Tregs抑制功能的差異。而且,將ACS患者與對(duì)照者CFSE標(biāo)記的Teffs分別培養(yǎng)3天,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)ACS組與對(duì)照組Teffs增殖功能的差異。 結(jié)果:①ACS患者與對(duì)照者的Teffs增殖功能未見(jiàn)差異(.P0.05)；②ACS患者及對(duì)照者的Tregs分別與自身Teffs以不同的比例混合培養(yǎng)后,與對(duì)照組相比,ACS患者Tregs的免疫抑制功能降低(P0.05)；③同樣地,ACS患者及對(duì)照者的Tregs分別與來(lái)自同一個(gè)體的Teffs以不同的比例混合培養(yǎng)后,與對(duì)照組相比,ACS患者Tregs的免疫抑制功能降低(P0.05)。 結(jié)論：急性冠脈綜合征患者[regs的免疫抑制功能降低可能是ACS發(fā)生的一種因素,干預(yù)Tregs可能會(huì)成為預(yù)防和治療ACS的一種策略。 第二部分急性冠脈綜合征患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞FOXP3甲基化水平的研究 目的：表觀遺傳學(xué)修飾在T細(xì)胞系分化中起著重要作用,FOXP3基因中存在一段保守序列即調(diào)節(jié)性T細(xì)胞特異性去甲基化區(qū)域,這段去甲基化的保守序列對(duì)于Tregs形成及保持Tregs免疫抑制功能極為重要。本研究旨在探索調(diào)節(jié)性T細(xì)胞FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平在ACS發(fā)病中的作用。 方法：入選60例ACS患者和56例對(duì)照者,采用密度梯度法從抗凝外周血中分離出淋巴細(xì)胞,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD4+CD25+FOXP3+Treg s的表達(dá)水平。用磁珠從入選者外周血中分選出CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及CD4+CD25效應(yīng)性T細(xì)胞,用焦磷酸測(cè)序法檢測(cè)分別檢測(cè)Tregs與Teffs的FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平。采用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)入選者淋巴細(xì)胞中的FOXP3mRNA含量。用ELISA檢測(cè)入選者血漿中IL-10,TGF-p和INF-γ含量。 結(jié)果：①應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)未發(fā)現(xiàn)ACS患者的CD4+CD25+FOXP3+Tregs的表達(dá)水平降低(P0.05)。②ACS患者與對(duì)照者Teffs的FOXP3增強(qiáng)子位點(diǎn)均呈高度甲基化水平,兩組間Teffs的FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平無(wú)差異(P0.05)；而ACS患者與對(duì)照者Tregs的FOXP3增強(qiáng)子位點(diǎn)均呈低甲基化狀態(tài),兩組患者Tregs的FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平均顯著低于Teffs的FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平(P0.05); ACS患者Tregs的FOXP3增強(qiáng)子位點(diǎn)甲基化水平顯著高于對(duì)照組Tregs的FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平(P0.05)。③ACS患者淋巴細(xì)胞中的FOXP3mRN A表達(dá)水平低于對(duì)照組(P0.05);與培養(yǎng)前比較,培養(yǎng)5天后,ACS患者及對(duì)照者淋巴細(xì)胞中的FOXP3mRNA表達(dá)水平均減低(P0.05),并且,ACS患者淋巴細(xì)胞中的FOXP3mRNA表達(dá)水減少比例顯著高于對(duì)照者(P0.05)。④各組間血漿IL-10的含量未見(jiàn)顯著差異(P0.05)；與對(duì)照組比較,ACS患者血漿中的TGF-β含量減少(P0.05),而INF-γ含量增加(P0.05)。 結(jié)論：急性冠脈綜合征患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平升高可能是造成Tregs免疫抑制功能受損的原因,進(jìn)而Tregs免疫抑制功能受損參與ACS的發(fā)生,因此,降低FOXP3增強(qiáng)子甲基化水平可能成為治療ACS的潛在策略。
[Abstract]:Part one study of regulatory T cell immunosuppression in patients with acute coronary syndrome
Objective: atherosclerosis is a chronic inflammatory process of immune disorders and is the main cause of acute coronary syndrome (ACS). CD4+CD25+ regulatory T cells specifically express the thymic gland of Forkhead transcription factor P3 (FOXP3). GS) is a subgroup of CD4+T cells. The decrease in the immune response of the body to the excessive immune response to the autoantigen or external antigen, the decrease in the number of.Tregs or the impairment of the immunosuppressive function can induce autoimmune diseases or aggravate the inflammatory disease. Therefore, the aim of this experiment is to explore the immunological modulation of Tregs. The role of joint function in the occurrence of acute coronary syndrome.
Methods: the peripheral blood samples from 62 ACS patients and 52 healthy controls were collected and the lymphocytes were separated by density gradient method. The CD4+CD25+ regulatory T cells and CD4+CD25 effector T cells were selected by magnetic beads. Tregs and carboxyl fluorescein two acetate succinimide (Carboxyfluorescein succinimidyl Este, CFSE) were labeled from Tregs. The body and allogenic Teffs were mixed in different proportions, and the proliferation index of Teffs was detected by flow cytometry. The inhibition rate of Tregs in ACS patients and controls was obtained. The difference of Tregs inhibitory function between the ACS group and the control group was compared. Moreover, the Teffs of the CFSE markers in the ACS patients and the control group was cultured for 3 days respectively, and the ACS group and the control were detected by flow cytometry. The difference in the proliferative function of group Teffs.
Results: (1) there was no difference in the proliferation of Teffs between the ACS patients and the control group (.P0.05); after the Tregs of the ACS patients and the controls was mixed with their own Teffs in a different proportion, the immunosuppressive function of Tregs in ACS patients was lower than that of the control group (P0.05); similarly, the Tregs of the ACS patients and the controls was from the same individual. After mixed culture of Teffs in different proportions, the immunosuppressive function of Tregs in ACS patients was lower than that in the control group (P0.05).
Conclusion: the decrease of immunosuppressive function of [regs in patients with acute coronary syndrome may be a factor in the occurrence of ACS, and intervention of Tregs may be a strategy for the prevention and treatment of ACS.
The second part is the FOXP3 methylation level of regulatory T cells in patients with acute coronary syndrome.
Objective: epigenetic modification plays an important role in the differentiation of T cell lines. There is a conservative sequence in the FOXP3 gene, the regulatory T cell specific demethylation region. The conservative sequence of this demethylation is very important for the formation of Tregs and the preservation of Tregs immunity. The aim of this study is to explore the FOXP3 enhancement of regulatory T cells. The role of the level of methylation in the pathogenesis of ACS.
Methods: 60 ACS patients and 56 controls were selected to separate the lymphocytes from the anticoagulant peripheral blood by the density gradient method, and the expression level of CD4+CD25+FOXP3+Treg s was detected by flow cytometry. The CD4+CD25+ regulatory T cells and CD4+ CD25 effect T cells were selected from the peripheral blood of the selected subjects by magnetic beads and detected by pyrosequencing method. The level of FOXP3 enhancer methylation of Tregs and Teffs was detected respectively. The content of FOXP3mRNA in the lymphocytes of the selected participants was detected by real-time quantitative PCR, and the content of IL-10, TGF-p and INF- in the plasma of the selected participants was detected by ELISA.
Results: (1) the expression level of CD4+CD25+FOXP3+Tregs in ACS patients was not detected by flow cytometry (P0.05). (2) the FOXP3 enhancer loci of Teffs in ACS patients and controls were highly methylation levels, and the level of methylation of FOXP3 enhancers in the two groups was no difference (P0.05), while ACS patients and control Tregs FOXP3 enhancers The methylation level of the Tregs FOXP3 enhancers in the two groups was significantly lower than that of the FOXP3 enhancer methylation level of Teffs (P0.05), and the level of methylation of the FOXP3 enhancer loci of Tregs in ACS patients was significantly higher than the FOXP3 enhancer methylation level (P0.05) of Tregs in the control group (P0.05). Compared with the control group (P0.05), the level of FOXP3mRNA expression in the lymphocytes of ACS patients and controls decreased (P0.05) after 5 days of culture, and the proportion of FOXP3mRNA expression in lymphocyte of ACS patients was significantly higher than that of the control (P0.05). In the control group, the TGF- beta content in plasma of ACS patients decreased (P0.05), while the INF- gamma content increased (P0.05).
Conclusion: the elevated level of FOXP3 enhancer methylation in T cells in patients with acute coronary syndrome may be the cause of the impairment of Tregs immunosuppressive function, and the damage of Tregs immunosuppressive function is involved in the occurrence of ACS. Therefore, reducing the level of FOXP3 enhancer methylation may be a potential strategy for the treatment of ACS.
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R541.4

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李小麗;急性冠脈綜合征與炎癥[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));2002年01期

2 ;急性冠脈綜合征(acutecoronary syndrome,ACS)[J];診斷學(xué)理論與實(shí)踐;2002年04期

3 李天德;急性冠脈綜合征診斷與治療策略的變化[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2002年08期

4 奉佳山;急性冠脈綜合征二例誤診分析[J];臨床誤診誤治;2003年06期

5 張艷,張寧坤;急性冠脈綜合征病人的健康指導(dǎo)[J];護(hù)理學(xué)雜志;2004年01期

6 王紫逸;中西醫(yī)結(jié)合治療急性冠脈綜合征15例[J];中醫(yī)研究;2005年05期

7 鄧學(xué)軍,覃數(shù);妊娠相關(guān)血漿蛋白A在判斷急性冠脈綜合征中的臨床意義[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2005年03期

8 楊雪,柴艷芬,崔書(shū)章,壽松濤;妊娠相關(guān)血漿蛋白A在急性冠脈綜合征中的應(yīng)用[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2005年02期

9 郜玉珍;張穎;;年齡及婚姻狀況對(duì)急性冠脈綜合征患者應(yīng)對(duì)方式的影響[J];臨床醫(yī)藥實(shí)踐;2006年02期

10 王艷麗;臧彬;董慧潔;;急性冠脈綜合征患者血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9的變化及臨床意義[J];中國(guó)實(shí)用內(nèi)科雜志;2006年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 莊海峰;;急性冠脈綜合征病人急救與護(hù)理[A];全國(guó)心臟內(nèi)、外科�？谱o(hù)理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2002年

2 李海燕;;急性冠脈綜合征的抗血小板治療[A];2008第十一次全國(guó)臨床藥理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2008年

3 彭民安;劉傳垠;萬(wàn)鳳福;王雪樵;易志強(qiáng);;31例急性冠脈綜合征女性患者臨床分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)心血管病學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2013年

4 龐永誠(chéng);劉明;龔瑞蕓;陳斌;魏丹霞;楊汝文;;五項(xiàng)炎性因子在急性冠脈綜合征中的變化及臨床意義[A];2009年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

5 韓君;陳玉成;宋瑩;黃浩;曾智;;急性冠脈綜合征治療現(xiàn)狀及預(yù)后影響因素分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第12次全國(guó)內(nèi)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

6 夏鵠;馮凱;劉利峰;張軍;王明志;金姍;路浩軍;;應(yīng)用蛋白質(zhì)譜技術(shù)進(jìn)行急性冠脈綜合征早期標(biāo)記蛋白的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)第十三次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)大會(huì)論文集[C];2010年

7 陳炳海;吳金;黃鑫財(cái);;急性冠脈綜合征患者的睡眠紊亂調(diào)查[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志社》第三屆組稿會(huì)暨急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2004年

8 鄧秋迎;鄧燕妹;;急性冠脈綜合征“綠色通道”中的臨床觀察和護(hù)理體會(huì)[A];第十一次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

9 謝培怡;許秀娟;姚宇玫;李靜芝;沈盛暉;茅國(guó)群;陳瑤;;多層螺旋CT診斷急性冠脈綜合征及其相關(guān)的臨床研究[A];2006年浙江省心血管病學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

10 何炳榮;;急性冠脈綜合征的綜合治療進(jìn)展[A];浙江省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)心血管病專業(yè)委員會(huì)第六次學(xué)術(shù)年會(huì)暨省級(jí)繼續(xù)教育學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 王丹 通訊員 孫進(jìn)軍;急性冠脈綜合征治療應(yīng)重視介入法[N];健康報(bào);2009年

2 記者周穎;治療急性冠脈綜合征有新進(jìn)展[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2002年

3 莎莎;急性冠脈綜合征介入后治療美歐達(dá)成共識(shí)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2007年

4 聞一;及早識(shí)別急性冠脈綜合征[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2009年

5 周自強(qiáng);治療急性冠脈綜合征的新觀點(diǎn)[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2002年

6 本報(bào)記者 王雪飛;拜瑞妥可顯著降低急性冠脈綜合征死亡率[N];健康報(bào);2012年

7 李杰;警惕無(wú)胸痛急性冠脈綜合征[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2008年

8 張旭;新型抗凝藥物可減少急性冠脈綜合征復(fù)發(fā)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

9 劉偉 向小峰;上海醫(yī)生解剖急性冠脈綜合征[N];健康報(bào);2004年

10 李穎;克賽將使急性冠脈綜合征患者獲益[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 楊彩娥;動(dòng)脈粥樣硬化和急性冠脈綜合征的血清標(biāo)志物的篩選與臨床應(yīng)用[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

2 Kisan Kumar Kushwaha（凱山）;氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）抑制急性冠脈綜合征病人體內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子BACH2的表達(dá)[D];華中科技大學(xué);2015年

3 楊俊;FOXP3甲基化介導(dǎo)的Treg細(xì)胞功能受損在急性冠脈綜合征發(fā)生中的作用[D];華中科技大學(xué);2015年

4 陳欣;淋巴毒素α與急性冠脈綜合征發(fā)病關(guān)系的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年

5 許竹梅;急性冠脈綜合征炎癥反應(yīng)及他汀類降脂藥的抗炎機(jī)制[D];中南大學(xué);2003年

6 戴健;基因、蛋白標(biāo)記物對(duì)急性冠脈綜合征危險(xiǎn)評(píng)估的初步研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2006年

7 杜綺鈞;晚期糖基化終產(chǎn)物對(duì)急性冠脈綜合征血小板活性的影響及其機(jī)制[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

8 袁敏杰;無(wú)創(chuàng)心電標(biāo)志對(duì)急性冠脈綜合征患者的預(yù)后價(jià)值[D];上海交通大學(xué);2014年

9 郭敏;干擾素調(diào)節(jié)因子-1對(duì)急性冠脈綜合征患者Th分化影響及其機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2010年

10 孫雪巖;遼寧地區(qū)非ST段抬高性急性冠脈綜合征診治現(xiàn)狀調(diào)查、預(yù)后因素分析及治療策略研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊天賜;急性冠脈綜合征患者外周血IL-17的表達(dá)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2015年

2 楊柳;急性冠脈綜合征質(zhì)量評(píng)價(jià)模型構(gòu)建及應(yīng)用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

3 陳潔;高遷移率族蛋白B1及腫瘤壞死因子α與急性冠脈綜合征的相關(guān)性研究[D];石河子大學(xué);2015年

4 楊寶剛;應(yīng)用瑞舒伐他汀對(duì)H型高血壓合并急性冠脈綜合征大鼠血管內(nèi)皮功能的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 趙東升;缺血修飾蛋白、胱抑素C、NT-proBNP聯(lián)合檢測(cè)在急性冠脈綜合征早期診斷中的價(jià)值[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 余陽(yáng)陽(yáng);強(qiáng)化他汀治療對(duì)急性冠脈綜合征冠狀動(dòng)脈支架術(shù)后的臨床研究[D];蘭州大學(xué);2015年

7 許晶晶;不同強(qiáng)度阿托伐他汀預(yù)處理對(duì)急性冠脈綜合征患者介入治療效果的對(duì)比研究[D];河北大學(xué);2015年

8 張明明;急性冠脈綜合征二級(jí)預(yù)防用藥現(xiàn)狀調(diào)查研究[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;2015年

9 衛(wèi)海松;替格瑞洛在急性冠脈綜合征患者介入治療中的應(yīng)用觀察[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

10 潘彩虹;替格瑞洛和氯吡格雷對(duì)急性冠脈綜合征合并糖尿病患者的血小板抑制作用[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：1962818