本文選題：抵抗素 + Apelin�。� 參考：《山西醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文

【摘要】：目的:通過Apelin干預(yù)抵抗素誘導(dǎo)的H9c2大鼠心肌細(xì)胞肥大模型,檢測心肌細(xì)胞表面積大小、單細(xì)胞總蛋白合成量、實時熒光定量PCR技術(shù)檢測心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物BNP和β-MHC的表達(dá),研究其對抵抗素誘導(dǎo)的H9c2大鼠心肌細(xì)胞肥大的影響,探索有效防治心肌細(xì)胞肥大的新方法,為其應(yīng)用于臨床心力衰竭的防治提供理論依據(jù)。方法:H9c2大鼠心肌細(xì)胞是源于BD1X大鼠胚胎心臟組織的亞克隆細(xì)胞株,用含10%FBS的DMEM培養(yǎng),每2-3 d換一次培養(yǎng)液,待細(xì)胞長到70%-80%時傳代培養(yǎng)。在倒置顯微鏡下觀察,H9c2大鼠心肌細(xì)胞呈圓形或橢圓形,未見心肌搏動。取長勢良好的細(xì)胞用于實驗。將1×105個H9c2大鼠心肌細(xì)胞分別接種于6孔板內(nèi),加入含10%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng),待細(xì)胞貼壁后,換含0.1%FBS的DMEM 3 ml饑餓16 h。根據(jù)實驗?zāi)康姆譃?組,C組(對照組):0.1%FBS的DMEM饑餓細(xì)胞后換含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)48 h。R組(抵抗素組):0.1%FBS的DMEM饑餓細(xì)胞后換抵抗素濃度為50 ng/ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)48 h。A組(抵抗素+Apelin組):0.1%FBS的DMEM饑餓細(xì)胞后換Apelin濃度為10μmol/3 ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)2 h后,換抵抗素濃度為50 ng/ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)46 h。N組(抵抗素+Apelin+LKB1抑制劑組):0.1%FBS的DMEM饑餓細(xì)胞后換LKB1抑制劑(NHE)濃度為20μmol/3 ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)2 h后,換Apelin濃度為10μmol/3 ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)0.5 h后,換為抵抗素濃度為50 ng/ml的含0.1%FBS的DMEM 3 ml培養(yǎng)45.5 h。培養(yǎng)48 h后,細(xì)胞拍照,Image J軟件分析細(xì)胞表面積;收集細(xì)胞計數(shù),BCA法測總蛋白含量,計算單細(xì)胞總蛋白含量;實時熒光定量PCR檢測心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物BNP和β-MHC的相對表達(dá)量。結(jié)果:與C組相比,R組心肌細(xì)胞表面積、單細(xì)胞蛋白合成量以及心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物的相對表達(dá)量明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01),成功構(gòu)建抵抗素誘導(dǎo)的H9c2大鼠心肌細(xì)胞肥大模型。與R組相比,A組心肌細(xì)胞表面積、單細(xì)胞蛋白合成量以及心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物的相對表達(dá)量明顯降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);與R組相比,N組心肌細(xì)胞表面積、單細(xì)胞蛋白合成量以及心肌細(xì)胞肥大標(biāo)志物的相對表達(dá)量無明顯減小,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:抵抗素可以誘導(dǎo)H9c2大鼠心肌細(xì)胞肥大;Apelin有抑制抵抗素誘導(dǎo)的H9c2大鼠心肌細(xì)胞肥大的作用;Apelin抑制抵抗素誘導(dǎo)的H9c2大鼠心肌細(xì)胞肥大的作用機(jī)制可能是通過激活LKB1/AMPK信號通路實現(xiàn)的。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of Apelin on cardiomyocyte hypertrophy induced by resistin in H9c2 rats, and to detect the surface area of cardiomyocytes, the total protein synthesis of single cell, and the expression of BNP and 尾 -MHC markers in cardiomyocyte hypertrophy by real-time fluorescence quantitative PCR. To study the effect of resistin on cardiomyocyte hypertrophy induced by resistin in H9c2 rats, to explore a new method to prevent and treat cardiomyocyte hypertrophy, and to provide a theoretical basis for its application in the prevention and treatment of clinical heart failure. Methods the rat cardiomyocytes were subcloned from the embryonic heart tissue of BD1X rats. They were cultured with DMEM containing 10s and cultured in different medium every 2-3 days. When the cells grew to 70% -80%, they were subcultured. The cardiomyocytes of H9c2 rats were round or oval under inverted microscope, and no myocardial pulsation was observed. The cells with good growth were used in the experiment. Myocardial cells of 1 脳 105 H9c2 rats were inoculated into 6-well plates and cultured with DMEM 3 ml containing 10s. After the cells were adhered to the cells, the cells were fed with 0.1 S DMEM 3 ml for 16 h. According to the objective of the experiment, four groups were divided into four groups (control group: 0.1 S DMEM starvation cells were cultured for 48h 路R with DMEM 3 ml containing 0.1 S) (resistin group: 0.1 S DMEM hunger cells were treated with resistin concentration of 50 ng/ml). DMEM 3 ml cultured for 48 h. A group (resistin Apelin group: 0. 1s DMEM starvation cells were cultured for 2 h with 10 渭 mol/3 ml of Apelin containing 0. 1 S DMEM 3 ml for 2 h). When the concentration of resistin was 50 ng/ml, 0.1 S DMEM 3 ml was cultured for 46 h. N group (resistin Apelin LKB1 inhibitor group: 0.1 S DMEM starvation cells were replaced with LKB1 inhibitor 3 ml) 20 渭 mol/3 ml, 0.1 S DMEM 3 ml was cultured for 2 h. When the concentration of Apelin was 10 渭 mol/3 / ml, the DMEM containing 0.1 S was incubated for 0.5 h, and the DMEM containing 0.1 S at the concentration of resistin was 50 ng/ml for 45.5 h. After 48 h culture, the cell surface area was analyzed by image-J software, the total protein content was measured by cell counting method, the total protein content of single cell was calculated, and the relative expressions of BNP and 尾 -MHC markers in cardiomyocyte hypertrophy were detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results: compared with group C, the surface area of cardiomyocytes, the amount of single cell protein synthesis and the relative expression of hypertrophic markers of cardiac myocytes in group R were significantly increased. The difference was statistically significant (P 0.01). Resistin induced cardiomyocyte hypertrophy model of H9c2 rats was successfully constructed. Compared with group R, the surface area of cardiomyocytes, the amount of single cell protein synthesis and the relative expression of hypertrophic markers of cardiomyocytes in group A were significantly lower than those in group R, the difference was statistically significant (P 0.01), and the surface area of cardiomyocytes in group N was significantly lower than that in group R. The amount of single cell protein synthesis and the relative expression of hypertrophic markers in cardiomyocytes were not significantly decreased, but the difference was not statistically significant (P 0.05). Conclusion: resistin can induce cardiomyocyte hypertrophy in H9c2 rats. Apelin can inhibit cardiomyocyte hypertrophy induced by resistin in H9c2 rats. The active LKB1/AMPK signal pathway is realized.
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R541.6

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 席雨濤;機(jī)械刺激與心肌細(xì)胞肥大[J];中國分子心臟病學(xué)雜志;2002年04期

2 王彥珍,羅健東;活性氧介導(dǎo)內(nèi)皮素-1誘導(dǎo)的培養(yǎng)新生大鼠心肌細(xì)胞肥大[J];生理學(xué)報;2004年03期

3 董頎,陳敏生,李曉云,李瑩輝,劉振秀;神經(jīng)肽Y誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞肥大的鈣信號機(jī)制[J];上海第二醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2005年09期

4 朱艷霞;田宗文;朱紅霞;楊曉寧;;雌激素對培養(yǎng)心肌細(xì)胞肥大和凋亡的抑制作用[J];中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志;2006年01期

5 朱艷霞;田宗文;朱紅霞;楊曉寧;;去甲腎上腺素對培養(yǎng)心肌細(xì)胞肥大和凋亡的作用[J];解剖學(xué)雜志;2007年01期

6 張同欣;唐發(fā)寬;董頎;劉啟才;陳敏生;;神經(jīng)肽Y1受體激動藥誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞肥大的研究[J];武警醫(yī)學(xué);2008年01期

7 李姣鋒;羅健東;;非對稱二甲基精氨酸誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞肥大的作用[J];廣州醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年01期

8 林巖;孫東升;王睿;林宇;牛英才;周麗;柏青楊;;多胺在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大中的作用[J];齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年23期

9 周小波;堿性成纖維細(xì)胞生長因子與心肌細(xì)胞肥大[J];重慶醫(yī)學(xué);1998年04期

10 符民桂,許松,龐永正,劉乃奎,唐朝樞;鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶介導(dǎo)堿性成纖維細(xì)胞生長因子誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞肥大[J];北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2001年01期

相關(guān)會議論文 前10條

1 李愛民;李巍;耿建萌;;氯沙坦對UⅡ誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞肥大的抑制作用[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國心血管病學(xué)大會論文匯編[C];2013年

2 李子健;劉寧;龔開政;蔡元彬;張永新;劉志強(qiáng);韓啟德;張幼怡;;腎上腺素受體介導(dǎo)新生大鼠心肌細(xì)胞肥大相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)譜及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)模式[A];中國藥理學(xué)會第九次全國會員代表大會暨全國藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2007年

3 李玲;袁文俊;;尾加壓素Ⅱ促新生大鼠心肌細(xì)胞肥大作用及其機(jī)制[A];中國藥理學(xué)會第八次全國代表大會論文摘要集（第二部分）[C];2002年

4 周紅敏;晉玉章;謝文利;劉艷霞;;黃芪苷Ⅳ對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)新生大鼠心肌細(xì)胞肥大的保護(hù)作用[A];中國藥理學(xué)會第十次全國學(xué)術(shù)會議�？痆C];2009年

5 潘秀頡;李玲;吳國宏;袁文俊;;尾加壓素Ⅱ促培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞肥大作用[A];中國生理學(xué)會第21屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

6 韓冬;曲紹春;于曉風(fēng);睢大{|;;人參皂苷Rb_3對血管緊張素Ⅱ致心肌細(xì)胞肥大的影響[A];第八屆海峽兩岸心血管科學(xué)研討會論文集[C];2011年

7 田澤君;崔煒;李擁軍;郝玉明;都軍;劉凡;祖秀光;張輝;劉素云;謝瑞琴;楊曉紅;武宇洲;;Gp130下游信號傳導(dǎo)通路在心肌營養(yǎng)素-1致心肌細(xì)胞肥大中的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

8 韓冬;曲紹春;于曉風(fēng);睢大{|;;人參皂苷Rb3對血管緊張素Ⅱ致心肌細(xì)胞肥大的影響及機(jī)制[A];中國藥理學(xué)會補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會成立大會暨人參及補(bǔ)益藥學(xué)術(shù)研討會會議論文集[C];2011年

9 耿召華;牛麗麗;劉玉峰;胡寶奎;王江;;Rad對心肌營養(yǎng)素1誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大負(fù)性調(diào)控作用的基礎(chǔ)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十五次全國心血管病學(xué)大會論文匯編[C];2013年

10 鄒永鵬;;川芎嗪對血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大、凋亡的影響[A];第十三次全國心血管病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2011年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 張弋;神經(jīng)肽Y誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大的鈣調(diào)控機(jī)制研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2008年

2 林瑾儀;促紅細(xì)胞生成素對心肌細(xì)胞肥大影響的實驗研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

3 文淵;促紅細(xì)胞生成素拮抗血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞肥大的研究[D];華中科技大學(xué);2009年

4 侯寧;瘦素誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大的機(jī)制研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2010年

5 楊晉靜;溶血磷脂酸對心肌細(xì)胞肥大和抗缺氧/復(fù)氧損傷的信號調(diào)控機(jī)制[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

6 王曉y=;肌纖生成調(diào)節(jié)因子-1致心肌細(xì)胞肥大的分子機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

7 許旭東;miR-22在大鼠心肌細(xì)胞肥大中的作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

8 石永英;TGF-β_1誘導(dǎo)的大鼠心肌細(xì)胞肥大及葛根素干預(yù)的實驗研究[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2008年

9 于林君;磷酸酶與張力蛋白同源物PTEN過度表達(dá)負(fù)性調(diào)控血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大及其機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 鄭斌;hhlim基因的表達(dá)調(diào)節(jié)及其與心肌細(xì)胞肥大發(fā)生之間的關(guān)系[D];河北醫(yī)科大學(xué);2003年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 韓福平;STVNa對Iso誘導(dǎo)的成年大鼠心肌細(xì)胞肥大的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2015年

2 雒建衛(wèi);Apelin抑制抵抗素誘導(dǎo)的H9c2心肌細(xì)胞肥大[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

3 黃秋菊;ERK1/2/PPARα/SCAD信號途徑對生理性和病理性心肌細(xì)胞肥大的調(diào)控研究[D];廣東藥學(xué)院;2015年

4 徐新麗;UCP2在硫酸吲哚酚誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大中的作用和機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

5 朱春瑜;鈣神經(jīng)素信號途徑在前列腺素F2α誘導(dǎo)大鼠心肌細(xì)胞肥大中的作用[D];華中科技大學(xué);2008年

6 陳軍紅;尾加壓素Ⅱ調(diào)控心肌細(xì)胞肥大的作用和阿伐他汀干預(yù)效果的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 王瑾;內(nèi)源性緩繳肽對血管緊張素-I誘導(dǎo)乳鼠心肌細(xì)胞肥大的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2005年

8 王麗;烏蘇里藜蘆生物堿抑制乳鼠心肌細(xì)胞肥大作用的實驗研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2007年

9 楊曉寧;17β雌二醇對培養(yǎng)的新生大鼠心肌細(xì)胞肥大的影響[D];武漢大學(xué);2005年

10 代文靜;活性氧介導(dǎo)PGF_（2α）誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大[D];華中科技大學(xué);2008年

，

本文編號：1870723