發(fā)布時(shí)間：2018-04-11 21:07

  本文選題：羧甲基賴氨酸 + 清道夫受體　； 參考：《中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志》2017年12期

【摘要】：目的探討清道夫受體CD36在羧甲基賴氨酸(CML)抑制泡沫細(xì)胞遷徙中的作用。方法 (1)首先觀察CML對(duì)RAW264.7巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積和細(xì)胞遷移的影響,繼之觀察泡沫細(xì)胞中CML與CD36的相互作用,實(shí)驗(yàn)分為:對(duì)照組、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)組(40 mg/L ox-LDL)、CML組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML);(2)觀察CD36在CML抑制泡沫細(xì)胞遷移中的作用。實(shí)驗(yàn)分兩部分:首先觀察CD36抑制劑SSO對(duì)RAW264.7泡沫細(xì)胞遷移的影響,分對(duì)照組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML)和SSO組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+25μmol/L SSO);其次觀察不同受體阻斷對(duì)CML抑制泡沫細(xì)胞遷移的影響,分對(duì)照組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML),anti-CD36組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+2μmol/L anti-CD36),anti-RAGE組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+2μmol/L anti-RAGE),mal BSA組(40 mg/L ox-LDL+10μmol/L CML+400 nmol/L mal BSA)。連續(xù)24 h 1%BSA的培養(yǎng)基培養(yǎng)干預(yù)后進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)(油紅O染色、Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)、CD36免疫熒光染色等)。結(jié)果膽固醇氧化酶法定量及油紅O染色定性顯示CML可以有效促進(jìn)RAW264.7巨噬細(xì)胞脂滴的蓄積并形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的關(guān)鍵組分泡沫細(xì)胞。Transwell細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)和定量分析結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,ox-LDL組中遷移泡沫細(xì)胞數(shù)減少43.5%(P0.05);與ox-LDL組相比,CML使泡沫細(xì)胞遷移數(shù)目減少49.2%(0.287±0.031比0.565±0.061,P0.05),表明CML抑制RAW264.7源性泡沫細(xì)胞遷移。免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)及免疫熒光染色結(jié)果顯示泡沫細(xì)胞中CML-CD36存在顯著的相互作用。進(jìn)一步的,用SSO或中和性抗體anti-CD36阻斷CD36和清道夫受體抑制劑mal BSA阻斷所有清道夫受體情況下,遷移的細(xì)胞數(shù)均較對(duì)照組顯著增加(P0.05)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,anti-CD36組細(xì)胞遷移指數(shù)為mal BSA組的81.3%(2.35±0.39比2.89±0.41,P0.05)。結(jié)論清道夫受體CD36是CML抑制RAW264.7泡沫細(xì)胞遷移的關(guān)鍵受體。
[Abstract]:Methods 1) to observe the effect of CML on lipid accumulation and cell migration of RAW264.7 macrophages, and then to observe the interaction between CML and CD36 in foam cells. The experiment was divided into two groups: control group.After 24 h culture of 1%BSA medium, the correlation was detected (oil red O staining and immunoprecipitation assay, CD36 immunofluorescence staining and so on).Results cholesterol oxidase assay and oil red O staining showed that CML could effectively promote the accumulation of lipid droplets in RAW264.7 macrophages and form atherosclerotic plaques.The results of co-immunoprecipitation and immunofluorescence staining showed that there was a significant interaction of CML-CD36 in foam cells.Statistical analysis showed that the cell migration index of anti-CD36 group was 81.3 鹵0.39 in mal BSA group vs 2.89 鹵0.41 in mal BSA group (P 0.05).Conclusion the scavenger receptor CD36 is the key receptor of CML to inhibit the migration of RAW264.7 foam cells.
【作者單位】： 江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;西安醫(yī)學(xué)院一附院心內(nèi)科;江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院病理科;江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院心內(nèi)科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81370408,81770450) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK20131246) 江蘇省衛(wèi)計(jì)委項(xiàng)目(Q201308,QNRC2016836) 鎮(zhèn)江市社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(SH2015038,SH2015023) 江蘇省研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(KYCX17_1801)
【分類號(hào)】：R54

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本文編號(hào)：1737674