發(fā)布時間：2018-03-30 22:11

  本文選題：瞬時受體電位通道　切入點(diǎn)：鈣釋放激活鈣通道調(diào)節(jié)分子　出處：《中國動脈硬化雜志》2017年12期

【摘要】：目的研究瞬時受體電位通道1(TRPC1)及鈣釋放激活鈣通道調(diào)節(jié)分子1(Orai1)在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)經(jīng)鈣池操縱性鈣通道(SOC)和受體操縱性鈣通道(ROC)介導(dǎo)的Ca2+內(nèi)流和一氧化氮(NO)生成中的作用。方法取2~3代HUVEC進(jìn)行隨機(jī)分組,將構(gòu)建的TRPC1、Orai1干擾質(zhì)粒(sh TRPC1、sh Orai1)分別轉(zhuǎn)染入HUVEC,采用real-time PCR和Western blot檢測TRPC1、Orai1 mRNA和蛋白的表達(dá)及轉(zhuǎn)染抑制效率。將各組細(xì)胞分別與鈣敏感受體(CaR)激動劑精胺、ROC模擬劑(TPA)+CaR負(fù)性變構(gòu)調(diào)節(jié)劑Calhex231、蛋白激酶C(PKC)抑制劑Ro31-8220與經(jīng)典型PKCs和PKCμ抑制劑Go6967孵育后,熒光探針Fura-2/AM及DAF-FM負(fù)載方法同步檢測[Ca2+]i和NO生成的變化。結(jié)果與對照組比較,sh TRPC1組和sh Orai1組mRNA表達(dá)(抑制率分別為84.50%、76.10%)和蛋白的表達(dá)(抑制率分別為83.98%、71.73%)明顯降低(P0.05)。在4種不同藥物作用下,sh TRPC1組和sh Orai1組[Ca2+]i△ratio值和NO凈熒光強(qiáng)度值均明顯降低(P0.05)。結(jié)論 TRPC1、Orai1參與了人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞SOC和ROC介導(dǎo)的鈣內(nèi)流和NO生成。
[Abstract]:Objective to study the Ca2 influx and nitric oxide (no) generation mediated by transient receptor potential channel 1 / TRPC 1) and calcium release activated calcium channel regulator 1 / Orai1) via calcium pool operable calcium channel (SOC1) and receptor operable calcium channel (roc) in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods 2 or 3 generations of HUVEC were randomly divided into two groups. Real-time PCR and Western blot were used to detect the expression of TRPC1Orai1 mRNA and protein and their transfection inhibition efficiency. The cells in each group were respectively negative to the Ca ~ (2 +) -sensitive receptor (Ca ~ (1)) agonist, spermatine (TPA) CaR, and the transfected cells were transfected into HUVECs. The expression and transfection inhibition efficiency of TRPC1- Orai1 mRNA and protein were detected by real-time PCR and Western blot, respectively. Ro31-8220, a protein kinase inhibitor, was incubated with classical PKCs and PKC 渭 inhibitor Go6967. Results compared with the control group, mRNA expression (inhibition rate was 84.50 and 76.10%) and protein expression (inhibition rate was 83.98% 71.73%) of mRNA and protein (83.98% 71.73%) were significantly decreased in sh TRPC1 group and sh Orai1 group compared with control group. I ratio and no net fluorescence intensity were significantly decreased in TRPC1 group and sh#en1# group. Conclusion TRPC 1 Orai1 is involved in calcium influx and no production mediated by SOC and ROC in human umbilical vein endothelial cells.
【作者單位】： 新疆地方病與民族高發(fā)病教育部重點(diǎn)實驗室石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31160239;81160018)
【分類號】：R54

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本文編號：1687863