本文選題：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞　切入點：功能化自組裝多肽納米纖維支架　出處：《北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院》2015年博士論文

【摘要】：目的：將雙重表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)和螢火蟲熒光素酶(Fluc)的SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(GFP/Fluc BMSCs),分別聯(lián)合功能化自組裝多肽RADA-PRG或RADA-KLT注射至Balb/c小鼠急性梗死心肌周圍,利用生物發(fā)光成像(BLI)、磁共振成像(MRI)雙模態(tài)示蹤移植后干細(xì)胞的定位、存活、增殖和遷移并評估治療后心功能的改善程度；結(jié)合病理HE染色及免疫組化驗證體內(nèi)干細(xì)胞分化、血管生成過程,從而探討功能化自組裝多肽納米纖維支架材料提高干細(xì)胞存活率及治療效果的可行性及可能機(jī)制。方法：構(gòu)建Balb/c小鼠急性心肌梗死模型,分別在梗死心肌周圍注射A組(對照組)：PBS緩沖液；B組：GFP/Fluc BMSCs; C組：GFP/Fluc BMSCs+RADA-PRG;D組:GFP/Fluc BMSCs+RADA-KLT.注射體積約40ul/只,細(xì)胞濃度約1.0×106/ml。術(shù)后第1、4、7、10、13天行BLI,術(shù)后第3、28天行MRI并計算左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF),術(shù)后第29天取心臟組織病理行HE染色以及GFP、CD34免疫組化,并計算梗死灶內(nèi)及周圍血管密度。結(jié)果：自術(shù)后第1天即可觀察到B、C、D三組心臟體表投射部位有明確的光學(xué)信號,第4天信號強(qiáng)度達(dá)到峰值,第7天開始逐漸減弱,B、D兩組至第10天消失,C組至第13天消失,而A組始終未觀察到光學(xué)信號。其中,C組信號強(qiáng)度自第4天開始均高于B組(Day 4, P=0.0008; Day 7, P=0.003; Day 10, P=10-7),而D組僅在第4天高于B組(P=0.02)。此外,三組均在第1天即可在心臟以外部位觀察到光學(xué)信號,尤以頭部最為明顯,與心臟區(qū)域維持同樣時間后消失。術(shù)后第3天四組LVEF無明顯差異(P=0.59)。術(shù)后第28天,四組LVEF均較前提高,其中A、B兩組仍無明顯差異(P=0.21),而C、D兩組均高于A(C組,P=0.01；D組,P=0.01)、B(C組,P=0.01；D組,P=0.02)兩組。心臟組織HE染色及GFP免疫組化示四組梗死灶均為纖維瘢痕組織替代,B組可見GFP陽性的心肌細(xì)胞,C、D兩組亦可見GFP陽性細(xì)胞,但與心肌細(xì)胞、血管結(jié)構(gòu)不一致,A組未見GFP陽性細(xì)胞。CD34免疫組化示B、C、D三組梗死灶內(nèi)及周圍血管密度明顯高于A組(B組,P=0.006；C組,P=0.0001；D組,P=0.0002),且C、D兩組明顯高于B組(C組,P=0.003；D組,P=0.002)。結(jié)論：將SD大鼠GFP/Fluc BMSCs注射至Balb/c小鼠急性梗死心肌周圍,利用BLI、MRI雙模態(tài)可以有效示蹤移植后BMSCs的定位、存活、增殖和遷移,并評估治療后心功能的改善程度。單純用BMSCs治療,BMSCs在體內(nèi)存活時間較短,心功能未見明顯改善。而聯(lián)合RADA-PRG可以促進(jìn)BMSCs在心肌組織的定位、增殖,加強(qiáng)BMSCs在體內(nèi)分化并誘導(dǎo)血管生成的作用,從而強(qiáng)化治療效果；聯(lián)合RADA-KLT可以促進(jìn)體內(nèi)血管生成、組織修復(fù)過程,從而強(qiáng)化治療效果。
[Abstract]:Objective: to inject GFP / Fluc BMSCs of SD rat bone marrow mesenchymal stem cells expressing green fluorescent protein (GFP) and fluorescein luciferase (luciferase) into the acute infarcted myocardium of Balb/c mice, respectively, in combination with functionalized self-assembly polypeptide RADA-PRG or RADA-KLT. The localization, survival, proliferation and migration of stem cells after transplantation were evaluated by bioluminescence imaging bli and magnetic resonance imaging (MRI), and the differentiation of stem cells in vivo was verified by HE staining and immunohistochemistry. To explore the feasibility and possible mechanism of functional self-assembled polypeptide nanofiber scaffolds for improving the survival rate and therapeutic effect of stem cells. Methods: the acute myocardial infarction model of Balb/c mice was established. Group A (control group: PBS buffer group B: GFP / Fluc BMSCs; group C: GFP / Fluc BMSCs RADA-PRGN D group: GFP / Fluc BMSCs RADA-KLT.Injection volume about 40ul/; The cell concentration was about 1.0 脳 10 6 / ml. Bli was performed on the 1st day, the 3rd day after operation, and the left ventricular ejection fraction (LVEFV) was calculated. On the 29th day after operation, the heart tissue was taken for HE staining and CD34 immunohistochemical staining. The density of blood vessels in and around the infarct was calculated. Results: from the first day after operation, clear optical signals could be observed in the projecting site of the heart surface in group B\ -C\ -C\ -D, and the intensity of the signal reached a peak on day 4. Group C disappeared from day 7 to day 13, group C disappeared gradually from day 7 to day 10, and group D disappeared gradually from day 7 to day 13. However, no optical signal was observed in group A. the signal intensity of group C was higher than that of group B from day 4 to day 4; Day _ 7, P _ (0.003); Day _ (10), P ~ (10 ~ (-7)), but that of group D was only higher than that of group B on day 4. Optical signals were observed on the first day in all the three groups, especially in the head, which disappeared at the same time as the heart region. There was no significant difference in LVEF between the four groups on the 3rd day after operation. The LVEF of the four groups increased on the 28th day after operation. There was still no significant difference between the two groups (P = 0.21), but the two groups were higher than those in group A (n = 0.01). He staining in cardiac tissue and GFP immunohistochemical staining showed that myocardial GFP was positive in the four groups. GFP positive cells were also found in two groups. But with cardiomyocytes, There were no GFP positive cells. CD34 immunohistochemical staining in group A showed that the density of blood vessels in and around the infarct focus in group B was significantly higher than that in group A (P = 0.006), and that in group D was significantly higher than that in group C (n = 0.0002), and that in group C was significantly higher than that in group C (n = 0.003). GFP/Fluc BMSCs was injected into the myocardium around acute infarction in Balb/c mice. The localization, survival, proliferation and migration of BMSCs after transplantation can be effectively traced by using BLII-MRI, and the degree of improvement of cardiac function after treatment can be evaluated. The survival time of BMSCs alone in vivo is shorter. The cardiac function was not obviously improved, but combined with RADA-PRG could promote the localization and proliferation of BMSCs in myocardial tissue, enhance the differentiation of BMSCs in vivo and induce angiogenesis, thus enhancing the therapeutic effect, and combined with RADA-KLT could promote angiogenesis in vivo. Tissue repair process to enhance the therapeutic effect.
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R542.22

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李曉彤,朱婭萍,馬勇波,朱景玉;男女性急性心肌梗死發(fā)病時間探討與護(hù)理[J];護(hù)士進(jìn)修雜志;2000年09期

2 王雪濤,張慧秋,馮倩;急性心肌梗死患者血清Ⅰ型前膠原羧基端肽的變化及黃芪對其影響[J];臨床薈萃;2000年08期

3 王遠(yuǎn)方;以右肩疼痛為主要表現(xiàn)的急性心肌梗死3例[J];臨床薈萃;2000年08期

4 宋麗絢;巴曲抗栓酶治療急性心肌梗死療效觀察[J];臨床心血管病雜志;2000年05期

5 朱少群;重組組織纖維蛋白溶酶原激活劑治療急性心肌梗死二例[J];上海醫(yī)學(xué);2000年02期

6 郝恒劍,胡大一,邊延濤,賈三慶,秦明照,陳方,許毓申;70歲以上急性心肌梗死患者直接經(jīng)皮冠狀動脈腔內(nèi)成形術(shù)的臨床分析[J];中華老年醫(yī)學(xué)雜志;2000年03期

7 李運(yùn)香,李永峰;急性心肌梗死與發(fā)病季節(jié)關(guān)系的探討[J];中國醫(yī)師雜志;2000年S1期

8 馮曉霞;青年急性心肌梗死的臨床特點[J];廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2000年02期

9 莫美容,李雪珍;急性心肌梗死患者的護(hù)理[J];廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2000年S1期

10 鄭心田,尚小明,姜玉如,葛健,盧峰;經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù)治療急性心肌梗死22例臨床觀察[J];河北醫(yī)藥;2000年09期

相關(guān)會議論文 前10條

1 張抒揚(yáng);;急性心肌梗死的治療原則[A];中華護(hù)理學(xué)會全國第7屆糖尿病護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

2 張抒揚(yáng);;急性心肌梗死的治療原則[A];中華護(hù)理學(xué)會全國第7屆血液凈化護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

3 苑慧;;中年急性心肌梗死患者健康教育[A];全國內(nèi)科護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議、全國心臟內(nèi)、外科護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議、第9屆全國糖尿病護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議、第9屆全國血液凈化護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議論文匯編[C];2011年

4 修紅;;心理干頂對急性心肌梗死患者影響的臨床研究[A];全國門急診護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議、第14屆全國骨科護(hù)理學(xué)術(shù)交流會議論文匯編[C];2012年

5 翟曉波;;9例可能與藥物相關(guān)的急性心肌梗死分析[A];第四屆全國藥物性損害與安全用藥學(xué)術(shù)會議、心血管藥物安全應(yīng)用與藥源性心血管疾病防治專題研討會會刊[C];2012年

6 隋欣炯;劉志;;糖尿病酮癥酸中毒合并急性心肌梗死患者的危險因素分析[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會第十六次全國急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2013年

7 陸江;姜榮欽;;中西醫(yī)結(jié)合治療急性心肌梗死32例體會[A];2009年全國危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

8 王婉云;;急性心肌梗死監(jiān)測及護(hù)理[A];中華護(hù)理學(xué)會全國第6屆重癥監(jiān)護(hù)護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2009年

9 劉培良;郝艷麗;苗磊;李偉光;董慶峰;洪飛;吳波;;再發(fā)急性心肌梗死的臨床特點及預(yù)防措施初步探討[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

10 郜俊清;趙德強(qiáng);金惠根;劉宗軍;;直接經(jīng)皮冠狀動脈介入治療急性心肌梗死住院死亡多元分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第11次心血管病學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2009年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 周虹;急性心肌梗死后該怎樣鍛煉？[N];大眾衛(wèi)生報;2007年

2 楊步月;防急性心肌梗死,專家提醒警惕“魔鬼時間”[N];新華每日電訊;2007年

3 本報記者 曹玉祥;炎夏尤須防急性心肌梗死[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2008年

4 關(guān)愛;防急性心肌梗死注意魔鬼時間[N];農(nóng)村醫(yī)藥報（漢）;2009年

5 本報記者 王霞;急性心肌梗死治療須“救急”[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2012年

6 周穎;北京5所中醫(yī)院聯(lián)合攻研急性心肌梗死[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

7 程守勤　蔣廷玉;“晨練不當(dāng)”頻頻引發(fā)急性心肌梗死[N];新華日報;2006年

8 記者 張淑會;石市成立急性心肌梗死救治中心[N];河北日報;2009年

9 記者 田雁;我市急性心肌梗死患者呈低齡化趨勢[N];大同日報;2011年

10 記者王淑軍;中醫(yī)藥治療急性心肌梗死作用顯著[N];人民日報;2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 范廣慈;血清松馳素在急性心肌梗死的發(fā)病和預(yù)后中的診斷價值[D];山東大學(xué);2014年

2 扎西多杰;急性心肌梗死患者并發(fā)新發(fā)房顫的相關(guān)臨床研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

3 齊曉云;丹參聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對兔急性心肌梗死后膠原重構(gòu)及心功能的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2009年

4 欒云;機(jī)械打孔復(fù)合緩釋支架聯(lián)合干細(xì)胞移植對急性心肌梗死的作用研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

5 倪玉霞;冠心Ⅱ號聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療急性心肌梗死的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2008年

6 農(nóng)一兵;中西醫(yī)結(jié)合治療對急性心肌梗死遠(yuǎn)期預(yù)后影響的臨床研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2005年

7 楊茗;粒細(xì)胞集落刺激因子動員自體骨髓干細(xì)胞治療急性心肌梗死的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

8 孫帥;體外心臟震波對急性心肌梗死豬心肌病理和生化過程的影響[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2010年

9 焦陽;入院臨床特征對急性心肌梗死患者住院期間不良結(jié)局的影響[D];蘇州大學(xué);2011年

10 張麗華;抗血小板藥物在中國急性心肌梗死患者中的應(yīng)用變化趨勢調(diào)查2001-2011[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李四海;急診PCI治療急性心肌梗死的臨床療效分析[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年

2 林麗容;急性心肌梗死急診PCI治療152例臨床分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2011年

3 劉小青;冠心Ⅱ號聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對大鼠急性心肌梗死的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2009年

4 韓森;影響急性心肌梗死預(yù)后相關(guān)因素分析[D];山東大學(xué);2009年

5 王德水;急性心肌梗死住院患者臨床特征和治療現(xiàn)狀調(diào)查及近期預(yù)后多因素分析[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2007年

6 彭繼仁;269例急性心肌梗死病例分析[D];浙江大學(xué);2007年

7 趙昕;琿春地區(qū)急性心肌梗死住院患者臨床特點對比觀察[D];延邊大學(xué);2007年

8 井雷;飽和氫鹽水對大鼠急性心肌梗死的保護(hù)作用[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2011年

9 潘凌云;降低血白細(xì)胞計數(shù)對急性心肌梗死大鼠的干預(yù)作用[D];山東大學(xué);2012年

10 劉房春;經(jīng)靜脈或冠脈移植臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療豬急性心肌梗死實驗研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

，

本文編號：1686442