本文選題：冠狀動脈平滑肌細(xì)胞　切入點：組織塊貼壁法　出處：《中國病理生理雜志》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:探討SD大鼠冠狀動脈平滑肌細(xì)胞(coronary artery smooth muscle cells,CASMCs)原代培養(yǎng)方法,并建立CASMCs內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)模型。方法:用組織塊貼壁法培養(yǎng)CASMCs,光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)。免疫熒光技術(shù)檢測CASMCs的標(biāo)志分子α-SMA和SM-MHC的表達(dá)。采用Western blot檢測ERS發(fā)生的標(biāo)志物BiP和CHOP的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:冠狀動脈組織塊貼壁培養(yǎng)6 d后,細(xì)胞從組織塊邊緣爬出,呈長梭型,9~10 d細(xì)胞生長匯合后表現(xiàn)出平滑肌細(xì)胞典型的"峰-谷"狀。免疫熒光技術(shù)鑒定結(jié)果顯示,α-SMA和SM-MHC表達(dá)呈陽性。不同濃度(0.5、1和2μmol/L)的毒胡蘿卜素(thapsigargin,TG)處理CASMCs 24 h后,Western blot結(jié)果顯示,TG(1和2μmol/L)處理組的BiP和CHOP蛋白表達(dá)與對照組相比增加,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。與對照組相比較,1μmol/L TG處理CASMCs 24和48 h后BiP和CHOP蛋白表達(dá)顯著性增加。結(jié)論:采用組織塊貼壁法可以成功培養(yǎng)CASMCs。利用1μmol/L TG誘導(dǎo)24 h可建立CASMCs的ERS模型。
[Abstract]:Objective: to investigate the primary culture method of coronary artery smooth muscle cells (CASMC) in SD rats. The endoplasmic reticulum stress stress (CASMCs) model was established. Methods: the cells were cultured with tissue attachment method, the morphology of cells was observed by optical microscope, the expression of 偽 -SMA and SM-MHC, the markers of CASMCs were detected by immunofluorescence technique, and ERS was detected by Western blot. Results: the tissue mass of coronary artery was cultured for 6 days. The cells crawled out from the edge of the tissue mass, After 10 days of growth and confluence, the cells showed typical "peak-valley" shape of smooth muscle cells. The expression of 偽 -SMA and SM-MHC was positive by immunofluorescence technique. The CASMCs 24 was treated with different concentrations of carotene (0.5 渭 mol / L) and 2 渭 mol / L (TG2 渭 mol / L). After h, the expression of BiP and CHOP protein in TGG 1 and 2 渭 mol / L treated group was increased compared with the control group, the results of Western blot showed that the expression of BiP and CHOP in the treated group was higher than that in the control group. Compared with the control group, the expression of BiP and CHOP protein was significantly increased after treated with 1 渭 mol/L TG for 24 and 48 h. Conclusion: the expression of BiP and CHOP protein can be successfully cultured by tissue mass adherence method. ERS model of CASMCs can be established by 1 渭 mol/L TG for 24 h.
【作者單位】： 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院;廣東省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)研究部廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(No.81273516;No.81470440)
【分類號】：R54

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1652106