本文選題：缺氧　切入點(diǎn)：線粒體損傷　出處：《中國老年學(xué)雜志》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的探討缺氧對大鼠心肌細(xì)胞系H9C2的損傷及機(jī)制。方法在1%O_2+5%CO_2+94%N_2條件下培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞株H9C2 3、6、12、24、48 h,并以正常大鼠心肌細(xì)胞株作對照,使用臺(tái)盼藍(lán)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù);CCK-8法檢測細(xì)胞存活率;實(shí)時(shí)監(jiān)測心肌細(xì)胞生長狀態(tài);透射電鏡觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu);活性氧檢測試劑盒檢測胞內(nèi)活性氧(ROS);Western印跡法檢測線粒體色素C蛋白表達(dá)水平;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率;乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測細(xì)胞壞死程度。結(jié)果缺氧狀態(tài)下,隨著缺氧時(shí)間的不斷增加,大鼠心肌細(xì)胞株H9C2的細(xì)胞生長、存活率均明顯降低、細(xì)胞形態(tài)明顯改變,細(xì)胞器結(jié)構(gòu)明顯損傷,ROS水平升高,線粒體細(xì)胞色素釋放增加,細(xì)胞凋亡率明顯增加,LDH的釋放率明顯增高。結(jié)論缺氧會(huì)造成大鼠心肌細(xì)胞的生長速度減慢、形態(tài)改變及心肌線粒體損傷,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡和細(xì)胞壞死。
[Abstract]:Objective to investigate the damage and mechanism of hypoxia on rat myocardial cell line H9C2. Methods cultured rat cardiomyocyte line H9C23, H99C2 for 2448 hours, and normal rat cardiomyocytes as control. Trypan blue was used to count cells and CCK-8 method was used to detect cell survival rate, real-time monitoring of cardiac myocyte growth status, transmission electron microscope observation of cell internal structure. The expression of mitochondrial pigment C protein was detected by Western blotting, apoptosis rate was detected by flow cytometry, necrosis degree was detected by LDH kit. With the increase of hypoxia time, the cell growth and survival rate of rat cardiomyocyte line H9C2 decreased significantly, the cell morphology changed obviously, the level of Ros and the release of cytochrome from mitochondria increased significantly. Conclusion hypoxia can decrease the growth rate of rat cardiomyocytes, change the morphology and damage myocardial mitochondria, and eventually lead to apoptosis and cell necrosis.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;寧夏醫(yī)科大學(xué)科技中心;寧夏醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院;中國人民解放軍第五醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目資助(81360042)
【分類號】：R54

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本文編號：1633386