本文選題：高血壓　切入點(diǎn)：延髓頭端腹外側(cè)區(qū)　出處：《第二軍醫(yī)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：【研究目的】高血壓(Hypertension)是一種高發(fā)病率的慢性疾病,導(dǎo)致全身組織器官形成多種嚴(yán)重并發(fā)癥,超過90%高血壓病人的發(fā)病原因不明。盡管目前已有多種治療手段能明顯降低血壓,但高血壓的并發(fā)癥如心力衰竭和腦卒中等仍高居不下,因此對高血壓發(fā)生和發(fā)展的基礎(chǔ)研究仍具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。血壓水平主要有體液和神經(jīng)機(jī)制兩個方面進(jìn)行調(diào)控,神經(jīng)調(diào)控包括交感和迷走神經(jīng)機(jī)制,其中交感神經(jīng)的調(diào)控中樞位于頭端延髓腹外側(cè)區(qū)(Rostral ventrolateral medulla,RVLM),其接收并整合高位腦干、中樞核團(tuán)(如孤束核(Nucleus tractus solitaries,NTS)、室旁核(Paraventricular nucleus,PVN))及外周感受器傳入的神經(jīng)沖動,并通過前交感神經(jīng)元神經(jīng)纖維傳遞至脊髓中間外側(cè)柱與交感節(jié)前神經(jīng)元發(fā)生單突觸聯(lián)系控制外周的交感神經(jīng)活動;因此,RVLM是中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)交感輸出及心血管功能的關(guān)鍵中樞。研究表明,RVLM內(nèi)微量注射γ-氨基丁酸,可有效抑制交感功能,降低血壓;電流刺激RVLM內(nèi)神經(jīng)元,可使交感功能活動亢進(jìn),升高血壓。RVLM內(nèi)前交感神經(jīng)元興奮性異常增高是交感神經(jīng)活動亢進(jìn)的主要原因;交感神經(jīng)活動亢進(jìn)是高血壓的一個重要發(fā)病機(jī)制,且與多種心血管疾病形成及預(yù)后密切相關(guān)。因此,闡明RVLM內(nèi)前交感神經(jīng)活動亢進(jìn)的機(jī)制并探索有效抑制其活性的方法對預(yù)防及治療高血壓具有深遠(yuǎn)意義。高血壓的形成和發(fā)展及其終末器官損傷與免疫系統(tǒng)紊亂、慢性低度炎癥等多種途徑引起的氧化應(yīng)激密切相關(guān)。當(dāng)活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的生成量增多或清除能力減弱,引起ROS過量積累,使ROS的生成與清除之間的平衡被打破,形成氧化應(yīng)激。氧化應(yīng)激可以導(dǎo)致高血壓的形成,持續(xù)的高血壓狀態(tài)又促進(jìn)氧化應(yīng)激水平升高,形成惡性循環(huán)。ROS主要由還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)氧化酶、線粒體呼吸、過氧化物酶及一氧化氮合酶等途徑產(chǎn)生,其中NADPH氧化酶是主要途徑;氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是機(jī)體內(nèi)源性抗氧化防御機(jī)制的主要組成部分,參與ROS的清除、阻斷ROS對細(xì)胞的損害、修復(fù)由ROS造成的細(xì)胞損傷。研究證實(shí)自發(fā)性高血壓大鼠(Spontaneously hypertensive rat,SHR)及血管緊張素II(Angiotensin II,Ang II)灌流的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠的RVLM內(nèi)氧化應(yīng)激增強(qiáng),引起神經(jīng)元活動增強(qiáng),導(dǎo)致腎交感神經(jīng)活動(Renal sympathetic nerve activity,RSNA)亢進(jìn),血壓升高。在SHR的RVLM內(nèi)微量注射SOD的模擬劑Tempol降低ROS水平和有效降低血壓。免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)為ROS生成的重要途徑之一且持續(xù)慢性低度炎癥反應(yīng)會導(dǎo)致過量的ROS產(chǎn)生,促進(jìn)高血壓的形成及終末器官損傷。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分泌的PGE2是一種重要的炎癥因子,通過自分泌及旁分泌的方式作用影響神經(jīng)元的功能。前列腺素類(Prostaglandins,PGs)具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng),在心血管功能調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮重要作用,其中環(huán)氧合酶(Cyclooxygenase,COX)是PGEs生成的限速酶。研究發(fā)現(xiàn),COX/PGEs軸在高血壓形成與發(fā)展過程中具有重要作用,并介導(dǎo)高血壓引起的終末器官損傷過程;大鼠腦室內(nèi)(Intracerebroventricular,ICV)灌流前列腺素E2(Prostaglandin E2,PGE2)或者室旁核(Paraventricular nucleus,PVN)內(nèi)微量注射PGE2可增強(qiáng)RSNA及升高血壓,而其它亞型的PGs并不參與心血管活動的中樞調(diào)控機(jī)制。然而,RVLM作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)交感輸出及心血管功能的最后樞紐,但PGE2在RVLM內(nèi)的含量變化以及是否參與心血管功能的調(diào)節(jié)均尚不明確,而且中樞PGE2與氧化應(yīng)激是否存在聯(lián)系仍有待驗證。因此,本研究的總體目標(biāo)是明確中樞PGE2在RVLM內(nèi)對心血管功能調(diào)控的作用,并探討其作用是否通過氧化應(yīng)激增強(qiáng)所介導(dǎo)。因此,闡明PGE2在RVLM內(nèi)對心血管功能的影響并探索其調(diào)控機(jī)制對高血壓的發(fā)病機(jī)制研究至關(guān)重要,從而為高血壓的預(yù)防與治療提供新的思路�！狙芯糠椒ā繉�(shí)驗動物為雄性16周SHR和腦室(Intraventricular,ICV)內(nèi)灌流Ang II(24μg/d)7天的280-320g Sprague-Dawley(SD)大鼠,經(jīng)股動脈穿刺測量平均動脈壓(Mean arterial pressure,MAP)和心率(Heart rate,HR);酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)RVLM內(nèi)PGE2含量;Western Blot檢測RVLM內(nèi)COX亞型的蛋白表達(dá)量。整體動物實(shí)驗觀察SD大鼠RVLM內(nèi)微量注射PGE2對大鼠MAP、HR及RSNA的影響;以及預(yù)處理Tempol后,PGE2對心血管效應(yīng)的影響。每側(cè)RVLM選擇3個位點(diǎn)微量注射PGE2,采用DHE檢測ROS含量,Western Blot檢測NOX及SOD的蛋白表達(dá)。【實(shí)驗結(jié)果】一、中樞PGE2對大鼠心血管功能的調(diào)節(jié)作用1、高血壓狀態(tài)下RVLM內(nèi)PGE2含量明顯升高SHR組MAP顯著高于WKY組:(157.8±4.9 vs.118.0±7.1 mm Hg,p0.05,n=5),SHR組RVLM內(nèi)PGE2含量顯著高于WKY組(0.25±0.01 vs.0.17±0.01μg/mg,P0.05,n=5)。中樞灌注Ang II組的MAP顯著高于a CSF組:(154.3±6.92 vs.113.3±3.57 mm Hg,P0.05,n=4),Ang II組RVLM內(nèi)PGE2含量顯著高于a CSF組(0.26±0.01 VS.0.15±0.01μg/mg,P0.05,n=4)。結(jié)果表明:高血壓狀態(tài)下,RVLM內(nèi)PGE2含量升高。2、RVLM內(nèi)微量注射PGE2增加血壓和交感神經(jīng)活動MAP變化值:a CSF組(2.25±0.49 mm Hg)、0.3 pmol PGE2組(11.75±1.93 mm Hg)、3 pmol PGE2組(24.25±3.43 mm Hg)和30 pmo L PGE2組(13.75±1.38 mm Hg);RSNA變化值:a CSF組(2.25±0.63%)、0.3 pmol PGE2組(12.75±2.29%)、3 pmol PGE2組(24.25±3.43%)和30 pmol PGE2組(14.25±1.89%)。結(jié)果表明:RVLM內(nèi)微量注射0.3-30 pmol PGE2劑量依賴性導(dǎo)致RSNA增強(qiáng)和MAP升高;其中3 pmol PGE2對心血管功能的影響最為顯著,后續(xù)實(shí)驗PGE2劑量選擇3 pmol。3、高血壓狀態(tài)下,RVLM內(nèi)PGE2含量升高由COX-2途徑介導(dǎo)COX-2蛋白表達(dá)在SHR組顯著高于WKY組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(1.80±0.11 vs.1.00±0.16,P0.05,n=4);而COX-1蛋白表達(dá)在SHR組與WKY組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)無顯著性差異(1.17±0.38 vs.1.00±0.19,P0.05,n=4)。COX-2蛋白表達(dá)在Ang II組顯著高于a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(2.86±0.46 vs.1.00±0.16,P0.05,n=5);而COX-1蛋白表達(dá)在Ang II組與a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)無顯著性差異(1.16±0.31vs.1.00±0.32,P0.05,n=5)。結(jié)果表明:高血壓狀態(tài)下,RVLM內(nèi)PGE2含量升高來源于COX-2蛋白高表達(dá)。二、RVLM內(nèi)微量注射PGE2引起氧化應(yīng)激增強(qiáng)1、DHE檢測RVLM內(nèi)超氧陰離子的變化PGE2組的超氧陰離子含量顯著高于a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(1.50±0.05 vs.1.00±0.08,P0.05,n=5),結(jié)果表明,PGE2引起氧化應(yīng)激增強(qiáng)。2、Western Blot檢測SOD蛋白的表達(dá)量PGE2組的SOD1蛋白表達(dá)量顯著低于a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(0.16±0.03 vs.1.00±0.19,P0.05,n=5),同時PGE2組的SOD2蛋白表達(dá)量也顯著低于a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(0.68±0.05 vs.1.00±0.11,P0.05,n=5)。結(jié)果表明:PGE2引起氧化應(yīng)激與抑制ROS消除機(jī)制有關(guān)。3、Western Blot檢測NOX蛋白的表達(dá)量PGE2組的NOX2蛋白表達(dá)量顯著高于a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(1.00±0.17 vs.2.75±0.62,P0.05,n=5),同時PGE2組的NOX4蛋白表達(dá)量也顯著高于a CSF組(標(biāo)準(zhǔn)化為1.0)(.3.65±0.35 vs.1.00±0.24,P0.05,n=5)。結(jié)果表明:PGE2促進(jìn)ROS的生成引起氧化應(yīng)激的增強(qiáng)。三、RVLM內(nèi)微量注射Tempol抑制PGE2的升壓作用Tempol+PGE2組RSNA變化值顯著低于a CSF+PGE2組(7.20±2.76 vs.21.00±3.27%,p0.05,n=5);Tempol+PGE2組MAP變化值也顯著低于a CSF+PGE2組(6.40±1.47 vs.27.4±3.12,p0.05,n=5)。結(jié)果表明:Tempol能有效抑制PGE2引起的RSNA增強(qiáng)及MAP升高。【結(jié)論】本研究顯示COX-2來源的PGE2在RVLM內(nèi)參與中樞心血管功能的調(diào)節(jié),并通過介導(dǎo)NOX2/4蛋白上調(diào)增加和SOD1/2蛋白下調(diào)引起ROS增多,提示PGE2誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激增強(qiáng)可能是引起高血壓和交感輸出亢進(jìn)的重要機(jī)制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R544.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 宛滌塵;章恒篤;鐘萍;葉云生;;科技人員的心血管功能剖析[J];鐵道勞動安全衛(wèi)生與環(huán)保;1992年03期

2 劉敏;;對體育研究生心血管功能的研究[J];考試周刊;2011年72期

3 張小平;心血管功能監(jiān)測的進(jìn)展[J];現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生;2001年04期

4 佟巖;多肽與心血管功能[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2003年06期

5 佘軍標(biāo);黃光民;;北京、上海、深圳3個城市2435人心血管功能隨機(jī)測試及其測試方法的研究和應(yīng)用[J];中國臨床康復(fù);2006年04期

6 佘軍標(biāo);黃光民;;普通居民心血管功能與健身效果的測試與觀察[J];深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報;2006年03期

7 邱遠(yuǎn);;中老年人心血管功能對長期登山鍛煉應(yīng)答的實(shí)驗研究[J];中國西部科技(學(xué)術(shù));2007年03期

8 卞伯高;潘華山;馬少輝;楊麟;;蛙泳運(yùn)動處方對中老年人心血管功能影響效果的實(shí)驗研究[J];山西師大體育學(xué)院學(xué)報;2008年04期

9 朱妹;;瑜珈對女大學(xué)生心血管功能的影響[J];福建體育科技;2009年04期

10 蔣廷忠;;老年人全麻圍術(shù)期心血管功能維護(hù)[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2009年05期

相關(guān)會議論文 前10條

1 郭鄭e，

本文編號：1608890